一种厚朴辐照前后质量检测方法技术

本发明专利技术属于中药分析领域，具体涉及一种厚朴辐照前后质量检测方法；该方法通过对厚朴辐照处理，得到辐照后的厚朴；通过辐照前后厚朴的厚朴酚与和厚朴酚含量分和指纹图谱分析。本发明专利技术建立了厚朴辐照前后指纹图谱的共有模式，标定有18个峰为共有峰，能有效的表征其质量，克服了原质量控制方法的单一性，具有较高的应用价值。

【技术实现步骤摘要】
一种厚朴辐照前后质量检测方法
本专利技术属于中药分析领域，具体涉及一种厚朴辐照前后质量检测方法。
技术介绍
厚朴，植物学范围内别名紫朴、紫油朴、温朴等，为木兰科、木兰属植物，常见为厚朴(原亚种)M.officinalissubsp.officinalis与凹叶厚朴(亚种)M.officinalissubsp.biloba两种，主产于四川、湖北等地。中药材中专指该植物的干燥干皮、根皮及枝皮。4～6月剥取根皮及枝皮直接阴干，干皮置沸水中微煮后堆置阴湿处，"发汗"至内表面皮紫褐色或棕褐色时，蒸软取出，卷成筒状，干燥。切丝，姜制用。对食积气滞、腹胀便秘、湿阻中焦等疾病有治疗作用。还能加入癌症药物中。厚朴广泛用于人们的日常生活中，由于中药材的特性，一般中药材含有大量的微生物，根据卫生部发布关于《钴60辐照灭菌剂量标准》中，厚朴可以进行一定剂量的辐照，对厚朴进行辐照前后质量研究，保证产品的疗效有重要意义。但是现有技术中，未有一个全面的辐照前后的质量分析方法。
技术实现思路
为了解决现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种厚朴辐照前后质量检测方法，本方法能有效、全面的表征厚朴辐照前后的质量，克服了原质量控制方法的单一性，具有较高的应用价值。为了实现上述目的，本专利技术采用以下技术方案：一种厚朴辐照前后质量检测方法，包括以下步骤：(1)对厚朴辐照处理，得到辐照后的厚朴；(2)辐照前后厚朴的厚朴酚与和厚朴酚含量分析第1步，对照品溶液的制备：取厚朴酚对照品2.0mg，和厚朴酚2.4mg，精密称定，加入甲醇溶液定容至刻度，称量，离心，取上清液，稀释，制成含厚朴酚40.0μg/mL，和厚朴酚24.0μg/mL的单一对照品溶液；第2步，供试品溶液的制备：分别取辐照前和辐照后的厚朴粉末0.2g，精密称定，加入甲醇25mL，称量，室温浸渍，滤过，精密量取续滤液5mL置25mL量瓶中，加甲醇置刻度，摇匀，得到辐照前和辐照后供试品溶液；第3步，采用高效液相色谱仪对单一对照品溶液、辐照前和辐照后供试品溶液进行样品分析并测得相应峰面积及计算所得含量具体数值；其中，色谱条件为：检测波长294nm；流速1.0mL/min；柱温30℃；进样量4μL；以甲醇-水为流动相等度洗脱；(3)指纹图谱分析第1步，供试品溶液的制备：分别取辐照前或辐照后的厚朴粉末0.2g，精密称定，加入甲醇25mL，密塞，称定重量，超声处理，冷却至室温，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，离心，取上清液，即得对照品溶液，其中，所述对照品溶液编号S1～S6，奇数号为辐照前厚朴供试品溶液，偶数号为辐照后供试品溶液；第2步，采用高效液相色谱法建立，色谱条件为：检测波长：274nm；流速1mL/min；柱温40℃；以乙腈C-0.1％磷酸溶液D为流动相，进样量10μL；按如下顺序进行梯度洗脱；0-7min,15％-25％C；7-15min，25％-35％C；15-25min，35％-44％C；25-28min，44％-60％C；28-35min，60％-80％C；35-40min，80％-95％C；40-50min，95％-100％C；建立辐照前后的厚朴HPLC指纹图谱。优选地，所述步骤(1)离心速率为13000r/min，离心时间为10min。优选地，所述步骤(1)甲醇-水的体积比为78：22。优选地，所述步骤(2)超声处理的功率为250W，频率为40kHz，超声处理时间为30min。优选地，所述步骤(2)离心速率为13000r/min，离心时间为10min。本专利技术与现有技术相比，其有益效果为：本方法能有效、全面的表征厚朴辐照前后的质量；且本专利技术建立了厚朴辐照前后指纹图谱的共有模式，标定有18个峰为共有峰，能有效的表征其质量，克服了原质量控制方法的单一性，具有较高的应用价值。附图说明图1为厚朴对照品和样品色谱图；图2为3批次厚朴辐照前后指纹图谱；图3为厚朴HPLC对照指纹图谱；图4为厚朴稳定性考察HPLC对照指纹图谱。具体实施方式下面通过具体实施方式对本专利技术作进一步详细说明。但本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本专利技术，而不应视为限定本专利技术的范围。实施例中未注明具体技术或条件者，按照本领域内的文献所描述的技术或条件按照说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。其中，本专利技术实施例所用仪器为：KQ-500E型超声波清洗器(昆山禾创超声仪器有限公司)；TG16W台式高速离心机(长沙湘智离心机仪器有限公司)；FA2104分析电子天平(上海良平仪器仪表有限公司)。Agilent1260高效液相色谱仪(四元泵，自动进样器，柱温箱，DAD检测器)(美国)。本专利技术实施例所用试剂为：提取用甲醇(分析醇，南京化学试剂股份有限公司)、液相色谱用甲醇(HPLC、Tedia)、乙腈(HPLC、Tedia)、磷酸(分析纯，南京化学试剂服务有限公司)、水为超纯水。厚朴酚(中国食品药品检定研究院，批号110729-201513，含量98.8％)、和厚朴酚(中国食品药品检定研究院，批号110730-201614，含量99.3％)。3批辐照前后厚朴粉末，批号分别为y-1603-1、y-1702-1、y-1702-2，标记为S1、S2、S3。实施例12.1厚朴辐照处理对厚朴辐照处理，得到辐照后的厚朴；2.2厚朴酚与和厚朴酚含量分析2.2.1对照品溶液的制备取厚朴酚对照品2.0mg，和厚朴酚2.4mg，精密称定，分别置于10mL容量瓶中，加入甲醇溶液定容至刻度，称量，离心(13000r/min，10min)，取上清液，稀释一定倍数，制成含厚朴酚40.0μg/mL，和厚朴酚24.0μg/mL的单一对照品溶液。2.2.2供试品溶液的制备取厚朴粉末0.2g，精密称定，置于具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25mL，称量，室温浸渍24h，滤过，精密量取续滤液5mL置25mL量瓶中，加甲醇置刻度，摇匀，即得。2.2.3色谱条件Agilent1260高效液相色谱仪，AgilentSB-C18(4.6×250mm,5μm)，AgilentC18ODS保护柱(4.6mm×12.5mm，5μm)；流动相：甲醇-水(78：22)；检测波长：294nm；流速1.0mL/min；柱温30℃；进样量4μL；等度洗脱。2.2.4样品分析将各样品及对照药材按“2.2”项下方法进样，每个样进样2次，测得相应峰面积及计算所得含量具体数值见表1，色谱图见图1。表1厚朴辐照前后厚朴酚及和厚朴酚含量测定数据如表1和图1所示：三批次厚朴辐照前后样品厚朴酚和和厚朴酚含量总和均高于2015版中国药典规定(厚朴酚与和厚朴酚总量不少于1.6％)，均为合格厚朴药材。从3批次厚朴中厚朴酚和和厚朴酚平均值来看，辐照后厚朴酚和和厚朴酚含量均有所降低，绝对含量差为0.14％和0.20％，相对含量下降比例分别为3.80％和4.36％，厚朴酚和和厚朴酚总量绝对含量相差为0.34％，相对含量下降比例为4.11％。三批次含量进行配对样本t检验，结果表明p>0.05，无统计学差异。三批次辐照前后厚朴样品分析结果表明辐照会使厚朴药材中厚朴酚和和厚朴酚含量降低，但降低比例较小。2.3厚朴指纹图谱分析2.3.1供试品溶液制备取本品粉末0.2g，精密称定，置本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种厚朴辐照前后质量检测方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)对厚朴辐照处理，得到辐照后的厚朴；(2)辐照前后厚朴的厚朴酚与和厚朴酚含量分析第1步，对照品溶液的制备：取厚朴酚对照品2.0mg，和厚朴酚2.4mg，精密称定，加入甲醇溶液定容至刻度，称量，离心，取上清液，稀释，制成含厚朴酚40.0μg/mL，和厚朴酚24.0μg/mL的单一对照品溶液；第2步，供试品溶液的制备：分别取辐照前和辐照后的厚朴粉末0.2g，精密称定，加入甲醇25mL，称量，室温浸渍，滤过，精密量取续滤液5mL置25mL量瓶中，加甲醇置刻度，摇匀，得到辐照前和辐照后供试品溶液；第3步，采用高效液相色谱仪对单一对照品溶液、辐照前和辐照后供试品溶液进行样品分析并测得相应峰面积及计算所得含量具体数值；其中，色谱条件为：检测波长294nm；流速1.0mL/min；柱温30℃；进样量4μL；以甲醇‑水为流动相等度洗脱；(3)指纹图谱分析第1步，供试品溶液的制备：分别取辐照前或辐照后的厚朴粉末0.2g，精密称定，加入甲醇25mL，密塞，称定重量，超声处理，冷却至室温，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，离心，取上清液，即得对照品溶液，其中，所述对照品溶液编号S1～S6，奇数号为辐照前厚朴供试品溶液，偶数号为辐照后供试品溶液；第2步，采用高效液相色谱法建立，色谱条件为：检测波长：274nm；流速1mL/min；柱温40℃；以乙腈C‑0.1％磷酸溶液D为流动相，进样量10μL；按如下顺序进行梯度洗脱；0‑7min,15％‑25％C；7‑15min，25％‑35％C；15‑25min，35％‑44％C；25‑28min，44％‑60％C；28‑35min，60％‑80％C；35‑40min，80％‑95％C；40‑50min，95％‑100％C；建立辐照前后的厚朴HPLC指纹图谱。...

【技术特征摘要】
1.一种厚朴辐照前后质量检测方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)对厚朴辐照处理，得到辐照后的厚朴；(2)辐照前后厚朴的厚朴酚与和厚朴酚含量分析第1步，对照品溶液的制备：取厚朴酚对照品2.0mg，和厚朴酚2.4mg，精密称定，加入甲醇溶液定容至刻度，称量，离心，取上清液，稀释，制成含厚朴酚40.0μg/mL，和厚朴酚24.0μg/mL的单一对照品溶液；第2步，供试品溶液的制备：分别取辐照前和辐照后的厚朴粉末0.2g，精密称定，加入甲醇25mL，称量，室温浸渍，滤过，精密量取续滤液5mL置25mL量瓶中，加甲醇置刻度，摇匀，得到辐照前和辐照后供试品溶液；第3步，采用高效液相色谱仪对单一对照品溶液、辐照前和辐照后供试品溶液进行样品分析并测得相应峰面积及计算所得含量具体数值；其中，色谱条件为：检测波长294nm；流速1.0mL/min；柱温30℃；进样量4μL；以甲醇-水为流动相等度洗脱；(3)指纹图谱分析第1步，供试品溶液的制备：分别取辐照前或辐照后的厚朴粉末0.2g，精密称定，加入甲醇25mL，密塞，称定重量，超声处理，冷却至室温，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，离心，取上清液，即得对照品溶液，其中，所述对照品溶液编号S1～S6...

【专利技术属性】
技术研发人员：贺敬竹，
申请(专利权)人：江苏七零七天然制药有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32