补料发酵工艺生产雷帕霉素的方法技术

本发明专利技术提供一种补料发酵工艺生产雷帕霉素的方法，其特征在于，以吸水链霉菌(Streptomyees hygroscopicus)作为发酵菌种，将种子液接入装有液体发酵培养基的发酵罐内，采用补料发酵工艺生产雷帕霉素，发酵罐培养时间为168‑216h；其中，发酵48h开始用氨水控制发酵液pH值为4.65‑5.15，发酵96h开始按每天批补葡萄糖水溶液，直至发酵结束。采用本发明专利技术的补料工艺，所需原材料成本低廉，操作简便，结果稳定，HPLC法测定发酵单位可达1000ug/ml以上，适合于规模化生产。

Production of rapamycin by fed-batch fermentation

The invention provides a method for rapamycin production by fed-batch fermentation process, which is characterized by taking Streptomyees hygroscopicus as fermentation strain, inserting seed liquid into fermentation tank with liquid fermentation medium, using fed-batch fermentation process to produce rapamycin, and the fermentation tank culture time is 168_h, in which ammonia water is used to control fermentation liquid p 48 hours after fermentation. The H value was 4.65 5.15, and the glucose solution was batched daily for 96 hours until the end of fermentation. The feeding process of the invention has the advantages of low cost of raw materials, simple operation and stable results. The determination of fermentation unit by HPLC can reach more than 1000ug/ml, which is suitable for large-scale production.

【技术实现步骤摘要】
补料发酵工艺生产雷帕霉素的方法
本专利技术属于发酵工程
，具体地说，涉及一种补料发酵工艺生产雷帕霉素的方法。
技术介绍
雷帕霉素作为新型大环内酯类的抗排斥药物，是目前世界上最新的强效免疫抑制剂，临床上用于器官移植的抗排斥反应和自身免疫性疾病的治疗。它是吸水链霉菌发酵过程中产生的。在发酵过程中，影响雷帕霉素生物合成的因素很多，如pH、通风、搅拌转速、温度以及培养基营养成分等。其中pH和碳源对代谢影响较大，需加以有效控制。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种补料发酵工艺生产雷帕霉素的方法。为了实现本专利技术目的，本专利技术提供一种补料发酵工艺生产雷帕霉素的方法，以吸水链霉菌(Streptomyeeshygroscopicus)作为发酵菌种，将种子液接入装有液体发酵培养基的发酵罐内，采用补料发酵工艺生产雷帕霉素，发酵罐培养时间为168-216h(优选188-214h)。其中，发酵48h开始用氨水(浓度为23％)控制发酵液pH值为4.65-5.15，发酵96h开始按如下A-D每天批补葡萄糖水溶液(浓度为50％)，直至发酵结束；A、发酵96h，补加的葡萄糖水溶液的体积为初始发酵液体积的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.补料发酵工艺生产雷帕霉素的方法，其特征在于，以吸水链霉菌(Streptomyees hygroscopicus)作为发酵菌种，将种子液接入装有液体发酵培养基的发酵罐内，采用补料发酵工艺生产雷帕霉素，发酵罐培养时间为168‑216h；其中，发酵48h开始用氨水控制发酵液pH值为4.65‑5.15，发酵96h开始按如下A‑D每天批补葡萄糖水溶液，直至发酵结束；A、发酵96h，补加的葡萄糖水溶液的体积为初始发酵液体积的5.0‑7.0％；B、发酵120h，补加的葡萄糖水溶液的体积为初始发酵液体积的3.2‑5.0％；C、发酵144h，补加的葡萄糖水溶液的体积为初始发酵液体积的2.4‑3.2％；D、发...

【技术特征摘要】
1.补料发酵工艺生产雷帕霉素的方法，其特征在于，以吸水链霉菌(Streptomyeeshygroscopicus)作为发酵菌种，将种子液接入装有液体发酵培养基的发酵罐内，采用补料发酵工艺生产雷帕霉素，发酵罐培养时间为168-216h；其中，发酵48h开始用氨水控制发酵液pH值为4.65-5.15，发酵96h开始按如下A-D每天批补葡萄糖水溶液，直至发酵结束；A、发酵96h，补加的葡萄糖水溶液的体积为初始发酵液体积的5.0-7.0％；B、发酵120h，补加的葡萄糖水溶液的体积为初始发酵液体积的3.2-5.0％；C、发酵144h，补加的葡萄糖水溶液的体积为初始发酵液体积的2.4-3.2％；D、发酵168h，补加的葡萄糖水溶液的体积为初始发酵液体积的1.0-2.4％；所述葡萄糖水溶液的浓度为50％。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，发酵96h开始按如下a-d每天批补葡萄糖水溶液；a、发酵96h，补加的葡萄糖水溶液的体积为初始发酵液体积的5.4-6.0％；b、发酵120h，补加的葡萄糖水溶液的体积为初始发酵液体积的3.6-4.6％；c、发酵144h，补加的葡萄糖水溶液的体积为初始发酵液体积的2.6-3.0％；d、发酵168h，补加的葡萄糖水溶液的体积为初始发酵液体积的1.6-2.0％。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，用氨水控制发酵液pH值的具体方法为：发酵48-144h，用氨水控制发酵液pH值为4.65-4.90；发酵144-216h，用氨水控制发酵液pH值为4.90-5.15；所述氨水的浓度为23％。4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，用氨水控制发酵液pH值的具体方法为：发酵48-144h，用氨水控制发酵液pH值为4.70-4.80；发酵144-216h，用氨水控制发酵液pH值为4.95-5.05。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，发酵条件为：发酵罐的罐温25.0-29.0℃，搅拌转速350-550rpm，罐压为0.04-0.06MPa，通气比1:1；优选地，发酵条件为：27.0-28.0℃，400-500rpm。6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述液体发酵培养基的配方为：棉籽饼粉25g/L、L-赖氨酸盐酸盐15g/L、葡萄糖...

【专利技术属性】
技术研发人员：谭启茂，张葵，
申请(专利权)人：北大方正集团有限公司，北大医药重庆大新药业股份有限公司，北大医疗产业集团有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11