3种乳酸菌或其组合及在制备青贮饲料中的应用制造技术

本发明专利技术公开了3种乳酸菌或其组合及在制备青贮饲料中的应用，具体地，所述乳酸菌分别为：乳酸片球菌(Pediococcus acidilactici)YLW002、干酪乳酸杆菌(Lactobacillus casei)YLW003和鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)YLW001，均于2018年11月09日保存于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保存编号分别为CCTCC NO:M2018760、M2017761、M2018759。所述乳酸菌可显著降低青贮牧草的pH、氨态氮、可溶性糖含量，显著增加乳酸含量，改善牧草青贮品质。本发明专利技术还公开了添加有上述乳酸菌的青贮饲料，该青贮饲料可以显著增加肉牛、肉羊的体重增重，同时可显著提高肉牛血液尿素和葡萄糖水平。

Three Lactic Acid Bacteria or Their Combinations and Their Application in Silage Production

【技术实现步骤摘要】
3种乳酸菌或其组合及在制备青贮饲料中的应用
本专利技术涉及动物饲料领域，具体地涉及3种乳酸菌或其组合及在制备青贮饲料中的应用。
技术介绍
禾本科和豆科牧草是青藏高原牧区种植面积最大，分布最广泛的一年生饲料作物。其中豆科牧草含有较高的蛋白质和钙等营养元素，但豆科牧草含水量较多，茎叶所含水分差异较大，调制干草时易落叶，不易单独青贮；而禾本科牧草则相反，其含有较多的碳水化合物，两种牧草混播具有较单播牧草高而稳定的产量(通常产草量提高14％～25％左右)，营养均衡，适口性好，可增加土壤有机质，形成稳定的团粒结构，提高土壤肥力，加快草地生长快，延长利用期。目前禾豆混播为主的圈窝种草已占青海种植面积的80％以上，在家畜的舍饲和冬春补饲中发挥着极其重要的作用。青藏高原由于其独特的环境条件，适宜人工种植的牧草品种较少，即使适宜栽培的品种，由于其栽培技术不同，很难维持豆科和禾本科牧草的相对平衡。在实际生产中，对禾豆混播牧草的最佳混播比例以及最佳收获期缺乏科学的数据支撑和准确的理论基础，导致饲草产量和品质良莠不齐，特别是饲草中能量和蛋白质含量较低，在家畜的舍饲过程中需要补饲大量的精料；同时刈割的混播牧草在贮存过程中，因物理、化学与生物的因素，导致其营养价值下降，甚至不堪饲用，严重危害家畜健康，既增加了牧民的经济负担，又浪费了大量的人力、物力和财力。饲草作物种植模式单一，主导品种和主推技术不突出，导致产量不稳，品质较低。禾本科饲草作物以地膜玉米为主，作物结构单一且玉米品种多乱杂，没有主导品种。其它燕麦等禾本科优质饲草作物种植面积较小，尤其，饲用甜高粱作物品种种植面积更少，而且在饲草作物良种繁育基地建设和生产基地建设过程中，仍以传统的作物和品种为主，作物结构和品种结构均比较单一。饲草产业发展除青贮玉米外，在养殖业中也需要大量的高蛋白青干草，因此，在退粮改饲中，稳定推进饲用玉米的同时，适度增加燕麦、黑饲麦以及饲用甜高粱等优质饲用作物，对于平衡饲草需求以及优化作物布局和饲草种植结构，促进持续发展具有重要意义。另外，饲草作物品种种植的比较粗放，集约化程度较低，产量和种植效益比较低，严重影响着种植户的积极性，制约饲草产业的持续性。近几年来，青海地区牦牛、肉牛、奶牛以及藏羊、绒山羊养殖业突飞猛进，对青贮饲料的需求越来越多。但由于目前使用的青贮饲料加工技术大多依靠牧草自身微生物进行天然发酵，因填压不紧密、气温低、好氧微生物杂菌污染，促使贮存期缩短，降低了牧草的营养价值，导致该项技术在应用推广过程中存在较大风险和成本。同时青海地区缺乏有效的、自主研发和生产的青贮接种剂和添加剂品牌，引进的国外生物制剂产品由于难以适应青海高海拔地区环境，导致添加效果不佳，青贮品质低下。落后的青贮技术已成为制约反刍动物生产的主要因素，亟待加强这方面的研究。
技术实现思路
为了解决上述技术问题的至少一个，专利技术人运用实时荧光定量PCR技术分析青海高海拔地区反刍动物瘤胃优势乳酸菌，并通过MRS-CaCO3平板筛选、产酸能力测定、生物学特性和益生特性研究，获得了3株产酸能力强、益生特性优良、适合青贮发酵的优势乳酸菌，从而完成本专利技术。为此，本专利技术的一方面提供3种乳酸菌或其组合，所述乳酸菌分别为：保藏编号是CCTCCNO:M2018760的乳酸片球菌(Pediococcusacidilactici)YLW002、保藏编号是CCTCCNO:M2018761的干酪乳酸杆菌(Lactobacilluscasei)YLW003和保藏编号是CCTCCNO:M2018759的鼠李糖乳杆菌(Lactobacillusrhamnosus)YLW001，三种菌株均于2018年11月09日保存于中国典型培养物保藏中心。本专利技术的第二方面提供本专利技术第一方面的3种乳酸菌或其组合在制备青贮饲料中的应用。在本专利技术的实施方案中，所述乳酸菌选自所述菌株组合中的1种、2种或3种。在本专利技术的优选实施方案中，所述乳酸菌选自所述菌株组合中的3种，即将3种乳酸菌混合而成的组合菌。在本专利技术的更优选实施方案中，所述乳酸菌为3种菌株等量混合而成的组合菌。本专利技术的第三方面提供一种青贮饲料，包含一定量的乳酸菌，所述乳酸菌选自下述菌株组合中的至少一种：保藏编号是保藏编号是CCTCCNO:M2018760的乳酸片球菌(Pediococcusacidilactici)YLW002、保藏编号是CCTCCNO:M2018761的干酪乳酸杆菌(Lactobacilluscasei)YLW003和保藏编号是CCTCCNO:M2018759的鼠李糖乳杆菌(Lactobacillusrhamnosus)YLW001。在本专利技术的实施方案中，所述乳酸菌选自所述菌株组合中的1种、2种或3种。在本专利技术的优选实施方案中，所述乳酸菌选自所述菌株组合中的3种，即将3种乳酸菌混合而成的组合菌。在本专利技术的更优选实施方案中，所述乳酸菌为3种菌株等量混合而成的组合菌。在本专利技术的实施方案中，所述青贮饲料由禾本科牧草单贮而成或与豆科牧草混贮而成。在本专利技术的具体实施方案中，所述禾本科牧草为玉米，所述豆科为箭筈豌豆或毛苕子。在本专利技术的实施方案中，所述一定量是指1×103～5×107CFU/g，优选地，为3×105CFU/g。本专利技术的有益效果本专利技术的乳酸菌可显著降低青贮牧草的pH、氨态氮、可溶性糖含量，显著增加乳酸含量，改善牧草青贮品质。本专利技术添加有上述乳酸菌的青贮饲料，可以显著增加肉牛、肉羊的日增重，同时可显著提高肉牛血液尿素和葡萄糖水平。附图说明图1示出了牦牛瘤胃优势乳酸杆菌实时荧光定量PCR分析，A：牦牛瘤胃内容物细菌基因组DNA提取；B：实时荧光定量PCR分析。图2示出了12株乳酸菌在平板划线纯化的形态。图3示出了12株乳酸菌革兰氏染色结果。图4示出了12株乳酸菌产酸产气试验结果。图5示出了12株菌株16SrDNA基因扩增结果(M：DL2000DNAmarker)。图6示出了菌株生长曲线测定图。图7示出了菌株产乳酸能力测定结果。图8示出了菌株抑菌活性和抗生素敏感性测定结果(A：菌株抑菌活性测定；B：菌株抗生素敏感性测定)。图9示出了添加菌株对全株玉米和箭筈豌豆混贮牧草pH的影响(平均值±标准差；A-D上标大写字母不同表示差异极显著，P<0.01；a-d上标小写字母不同表示差异显著，P<0.05；下同)。图10示出了添加菌株对全株玉米和箭筈豌豆混贮牧草氨态氮含量的影响。图11示出了添加菌株对全株玉米和箭筈豌豆混贮牧草可溶性糖含量的影响。图12示出了添加菌株对全株玉米和箭筈豌豆混贮牧草粗蛋白含量的影响。图13示出了添加菌株对全株玉米和箭筈豌豆混贮牧草粗纤维含量的影响(A：酸性洗涤纤维；B：中性洗涤纤维)。图14示出了添加菌株对全株玉米和箭筈豌豆混贮牧草感官品质的影响。图15示出了添加菌株对全株玉米和毛苕子混贮牧草pH的影响(平均值±标准差；A-D上标大写字母不同表示差异极显著，P<0.01；a-d上标小写字母不同表示差异显著，P<0.05；下同)。图16示出了添加菌株对全株玉米和毛苕子混贮牧草氨态氮含量的影响。图17示出了添加菌株对全株玉米和毛苕子混贮牧草可溶性糖含量的影响。图18示出了添加菌株对全株玉米和毛苕子混贮牧草粗蛋白含量的影响。图本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.3种乳酸菌或其组合，其特征在于，所述乳酸菌分别为：保藏编号是CCTCC M 2018760的乳酸片球菌YLW002、保藏编号是CCTCC M 2018761的干酪乳酸杆菌YLW003和保藏编号是CCTCC M 2018759的鼠李糖乳杆菌YLW001。

【技术特征摘要】
1.3种乳酸菌或其组合，其特征在于，所述乳酸菌分别为：保藏编号是CCTCCM2018760的乳酸片球菌YLW002、保藏编号是CCTCCM2018761的干酪乳酸杆菌YLW003和保藏编号是CCTCCM2018759的鼠李糖乳杆菌YLW001。2.乳酸菌在制备青贮饲料中的应用，其特征在于，所述乳酸菌选自下述菌株组合中的至少一种：保藏编号是CCTCCM2018760的乳酸片球菌YLW002、保藏编号是CCTCCM2018761的干酪乳酸杆菌YLW003和保藏编号是CCTCCM2018759的鼠李糖乳杆菌YLW001。3.根据权利要求2的所述的应用，其特征在于，所述乳酸菌选自所述菌株组合中的1种、2种或3种。4.根据权利要求3的所述的应用，其特征在于，所述乳酸菌选自所述菌株组合中的3种。5.根据权利要求4的所述的应用...

【专利技术属性】
技术研发人员：王磊，冯宇哲，张晓卫，吴国芳，牛建章，巩文，
申请(专利权)人：青海省畜牧兽医科学院，
类型：发明
国别省市：青海,63