一种用压电技术制备部分植物单细胞样品的方法技术

本发明专利技术公开了一种用压电技术制备部分植物单细胞样品的方法，操作环境制备、植物组织提取、处理和观察、植物组织固定和植物单细胞分离；本发明专利技术的有益效果在于，首先，该方法开创性的利用压电陶瓷产生可调节机械振动技术，解决了部分植物单细胞制备的问题，避免了制备植物原生质体工作中对于植物细胞内部细胞壁等结构与功能的破坏，尽可能最大程度上保持了植物细胞原有的形态与活性；其次，该方法根据不同植物组织情况进行各项参数调整并记录，方便了实际操作，保证了实验的成功率，提高了实验的效率。

A Method of Preparing Some Plant Single Cell Samples by Piezoelectric Technology

The invention discloses a method for preparing part of plant single-cell samples by piezoelectric technology, including preparation of operating environment, extraction, treatment and observation of plant tissues, fixation of plant tissues and separation of plant single-cell. The beneficial effect of the invention is that, firstly, the method pioneers the use of piezoelectric ceramics to produce adjustable mechanical vibration technology and solves the problem of preparing part of plant single-cell. This method avoids destroying the structure and function of the inner cell wall of plant cells in the preparation of plant protoplasts, and maintains the original morphology and activity of plant cells to the greatest extent possible. Secondly, this method adjusts and records various parameters according to different plant tissues, which facilitates the actual operation, ensures the success rate of the experiment and improves the efficiency of the experiment.

【技术实现步骤摘要】
一种用压电技术制备部分植物单细胞样品的方法
本专利技术涉及生物医学
，尤其涉及一种用压电技术制备部分植物单细胞样品的方法。
技术介绍
目前随着单细胞测序技术的迅猛发展，单细胞PCR技术也随之进展迅速，其中单细胞分离技术是这些技术的基础，而植物研究应用等领域中却没有太好的办法获取完整的单细胞，只得通过各种酶解法(果胶酶，纤维素酶等)进行各种植物组织，破坏植物细胞间的正常粘连结构，但植物细胞壁因其成分结构类似于细胞间结构，因此在分离单细胞的过程中也一并被去除，这种去除植物细胞壁的细胞称作原生质体，现有的方法是以这种单原生质体分离测序的方法代表完整植物单细胞分离测序，而这种酶解消化处理后获得的原生质体是否可以代表完整的植物单细胞所有分子生理状态确实是个问题，因此在目前正在兴起的各种植物单细胞分离测序的工作中如何获取含细胞壁的完整植物单细胞成为是必须要首先解决的难题。
技术实现思路
1.要解决的技术问题针对现有技术中存在的问题，本专利技术的目的在于提供一种用压电技术制备部分植物单细胞样品的方法，来达到分离植物细胞间粘连，同时又保护植物细胞壁的目地，这样即分离开了植物细胞，又保持了植物细胞完本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用压电技术制备部分植物单细胞样品的方法，其特征在于，包含如下步骤：步骤1，用100uL移液器及配套枪头在培养皿中制备若干调试液滴(操作液滴)和对比液滴；步骤2，镊取活体植株芽尖顶端分生组织，保留1～2片含生长点的叶原基，经过清洗等预处理后转入所述调试液滴(操作液滴)中；步骤3，在显微镜下观察植物分生组织结构形态；步骤4，调节和测试电破膜仪功能；步骤5，使用显微操作针展开植物顶端分生组织，并固定部分分生组织；步骤6，根据镜下实际情况，调整电破膜仪的工作参数并启动压电振动，通过显微操作针处理植物顶端分生组织，直至植物单细胞从分生组织上脱落；步骤7，松开固定在部分分生组织的显微操作针，并在分...

【技术特征摘要】
1.一种用压电技术制备部分植物单细胞样品的方法，其特征在于，包含如下步骤：步骤1，用100uL移液器及配套枪头在培养皿中制备若干调试液滴(操作液滴)和对比液滴；步骤2，镊取活体植株芽尖顶端分生组织，保留1～2片含生长点的叶原基，经过清洗等预处理后转入所述调试液滴(操作液滴)中；步骤3，在显微镜下观察植物分生组织结构形态；步骤4，调节和测试电破膜仪功能；步骤5，使用显微操作针展开植物顶端分生组织，并固定部分分生组织；步骤6，根据镜下实际情况，调整电破膜仪的工作参数并启动压电振动，通过显微操作针处理植物顶端分生组织，直至植物单细胞从分生组织上脱落；步骤7，松开固定在部分分生组织的显微操作针，并在分生组织其他部分重复步骤5-步骤6。2.根据权利要求1所述的一种用压电技术制备部分植物单细胞样品的方法，其特征在于，所述步骤4包括如下步骤：步骤4.1，用10uL移液器与微量上样针往显微操作针内装入5uL左右的重油；步骤4.2，用油压式显微注射仪将重油推到显微操作针的头部；步骤4.3，将显微操作针降入所述调试液滴(...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘晓，
申请(专利权)人：刘晓，
类型：发明
国别省市：上海,31