百合杂交后代高效离体成球及缩短童期的方法技术

本发明专利技术提供百合杂交后代高效离体成球及缩短童期的方法，包括百合胚珠挽救及愈伤诱导、丛生芽的诱导、仔球的分化及膨大、变温处理相变诱导和再生植株移栽等步骤。与传统的仔球未经童期相变处理的百合组培技术相比，传统方法一般需要3年及以上时间方可培养成大球或开花，本发明专利技术方法可使百合种球在相对短的时间内(两年左右便可开花)大规模繁殖出遗传背景完全相同、外观整齐的植株，再生植株变异低，再生体系高效；平均单株再生苗的成本极低，适合在百合杂交后采收杂交种子，将杂交种子的胚珠作为外植体，提高百合新品种选育的效率，以及大批量高效快速繁殖新品种的百合种球，非常适合于工厂化生产。

Efficient in vitro balling and shortening childhood of Hybrid Progenies of Lily

The invention provides a method for efficient in vitro balling and shortening childhood of lily hybrid offspring, including ovule rescue and callus induction, cluster bud induction, differentiation and expansion of larvae, phase transformation induction of temperature change treatment and transplantation of regenerated plants, etc. Compared with the traditional tissue culture technology of Lily without childhood phase change treatment, the traditional method generally takes 3 years or more to cultivate big bulbs or blossom. The method of the present invention can make lily bulbs produce large-scale plants with identical genetic background and neat appearance in relatively short time (blossom in about two years), and the regeneration plant variation is low, and the regeneration system is efficient. The cost of regenerated seedlings per plant is very low. It is suitable for harvesting hybrid seeds after hybridization. The ovules of hybrid seeds are used as explants to improve the efficiency of breeding new lily varieties and large-scale high-efficient and rapid propagation of new lily varieties. It is very suitable for industrial production.

【技术实现步骤摘要】
百合杂交后代高效离体成球及缩短童期的方法
本专利技术涉及组织培养和快繁技术，具体地说，涉及百合杂交后代高效离体成球及缩短童期的方法。
技术介绍
百合是百合科(Liliaceae)百合属(Lilium)多年生草本植物，是世界著名切花之一，具有很高的观赏价值，是重要的商品花卉和园林绿化植物。我国拥有丰富的百合资源，全世界约90余种百合属植物，其中有48个种和18个变种分布在我国。目前市面上常见的经营较多的有东方百合杂种系列、亚洲百合杂种系列等。传统的百合繁殖主要包括鳞片扦插，分球，分株等方法，但这些方法大都存在繁殖系数低，易感染病毒等问题，严重影响了百合的质量。自从上世纪50年代开始有人用百合鳞茎通过组织培养技术培育出百合后，目前百合鳞茎、叶片、茎尖、花器官等不同组织和器官的组织培养已获得成功，建立起基本的组培快繁技术，可在短时间内获得大量的无病毒、优质种苗。传统百合组培技术中，仔球没有经过童期相变处理，直接出瓶，在适宜环境下仔球也可成活，但是仔球不能长出主茎，只能长出一片叶片，光合同化产物积累慢，出瓶后仔球膨大缓慢，一般需要至少3年时间才能够培养成大球或开花。专利技术内容本专利技术的目本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.百合杂交后代高效离体成球及缩短童期的方法，其特征在于，包括以下步骤：A、百合胚珠挽救及愈伤诱导：从百合杂交后代果实中收集胚珠，消毒处理后用刀沿着纵向划破胚珠的珠被，然后接种在含6‑BA 0.8～1.0mg/L、NAA 0.3～0.5mg/L和蔗糖30～45g/L，pH值5.5～6.5的MS培养基上，培养至长出黄绿色愈伤或丛生苗；B、丛生芽的诱导：将步骤A的黄绿色愈伤或丛生苗转接到诱导分化培养基上进行培养，诱导产生丛生芽；所述诱导分化培养基为：MS+6‑BA 0.8～1mg/L+NAA 0.5～0.6mg/L+蔗糖30～45g/L，pH值5.5～6.5；C、仔球的分化及膨大：从步骤B的丛生芽...

【技术特征摘要】
1.百合杂交后代高效离体成球及缩短童期的方法，其特征在于，包括以下步骤：A、百合胚珠挽救及愈伤诱导：从百合杂交后代果实中收集胚珠，消毒处理后用刀沿着纵向划破胚珠的珠被，然后接种在含6-BA0.8～1.0mg/L、NAA0.3～0.5mg/L和蔗糖30～45g/L，pH值5.5～6.5的MS培养基上，培养至长出黄绿色愈伤或丛生苗；B、丛生芽的诱导：将步骤A的黄绿色愈伤或丛生苗转接到诱导分化培养基上进行培养，诱导产生丛生芽；所述诱导分化培养基为：MS+6-BA0.8～1mg/L+NAA0.5～0.6mg/L+蔗糖30～45g/L，pH值5.5～6.5；C、仔球的分化及膨大：从步骤B的丛生芽中切下芽头，将芽头纵切，一分为二，再将切分好的半个芽头转接到仔球分化及膨大培养基中，培养至每个材料离体分化出2～4粒小仔球；所述仔球分化及膨大培养基为：MS+6-BA0.1mg/L+NAA0.1～0.15mg/L+蔗糖90～120g/L，pH值5.5～6.5；D、变温处理相变诱导：将步骤C分化出的小仔球转移到11～15℃条件下暗处理5～6周；然后于4℃条件下暗处理10周；E、再生植株移栽：将步骤D经处理后的仔球转移到温室中适应2周后，移栽至基质中培养，直至仔球出芽，出芽后继续在基质中培养一年，之后移栽大田，常规种植管理；所述基质为草炭：蛭石：细沙体积比2:1:1，或草炭：蛭石：珍珠岩体积比2:1:1。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤A培养条件为：20～30℃，光照12～14h/d，光照强度15000～20000Lux。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤B和C培养条件为：21～25℃，光照12～14h/d，光照强度15000～20000Lux。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤D是将分化出的小仔球转移到13℃条件下暗处理5～6周；然后...

【专利技术属性】
技术研发人员：张克中，崔金腾，葛伟，邵杨，左杨，牛子丹，
申请(专利权)人：北京农学院，
类型：发明
国别省市：北京,11