一种快速检测人体血液中铅离子的胶体金免疫试纸条制备方法技术

本发明专利技术涉及免疫学技术领域，具体公开了一种快速检测人体血液中铅离子的胶体金免疫试纸条制备方法，包括如下步骤：步骤a：胶体金溶液的制备；步骤b：抗铅离子单抗标记的胶体金溶液的制备；步骤c：喷金；步骤d：硝酸纤维素膜上包被C线与T线；步骤e：胶体金免疫试纸条的组装。本发明专利技术制备的铅离子的胶体金免疫试纸条可用于人体血液中铅离子的检测，解决了现有技术中对于人体内铅离子的检测存在的检测时间长、检测成本高的问题。

A preparation method of colloidal gold immunoassay strip for rapid detection of lead ion in human blood

The invention relates to the field of immunology technology, and specifically discloses a preparation method of colloidal gold immunoassay strip for rapid detection of lead ions in human blood, which includes the following steps: step a: preparation of colloidal gold solution; step b: preparation of colloidal gold solution labeled with anti-lead monoclonal antibody; step c: gold spraying; step d: coating C and T lines on cellulose nitrate membrane; step e: colloidal gold; The assembly of immune test strip. The colloidal gold immunoassay strip prepared by the invention can be used for the detection of lead ion in human blood, thus solving the problems of long detection time and high detection cost existing in the detection of lead ion in human body in the prior art.

【技术实现步骤摘要】
一种快速检测人体血液中铅离子的胶体金免疫试纸条制备方法
本专利技术涉及免疫学
，具体涉及一种快速检测人体血液中铅离子的胶体金免疫试纸条制备方法。
技术介绍
铅是一种对人体危害极大的有毒重金属。铅及其化合物进入机体后将对神经、造血、消化、肾脏、心血管和内分泌等多个系统造成危害，若含量过高则会引起铅中毒。随着工业市场的迅速发展，铅被广泛应用到各行各业，铅对环境的污染越来越重，对人体的健康危害也越来越大。目前铅主要是通过食物、饮用水、空气等方式影响人体健康。对于成年人，铅的入侵会破坏神经系统，消化系统，男性生殖系统且影响骨骼的造血功能，进而人出现头晕、乏力、眩晕、困倦、失眠、贫血、免疫力低下、腹痛、便秘、肢体酸痛、肌肉关节前、月经不调等症状。对于儿童，由于大脑正在发育，神经系统处于敏感期，在同样的铅环境下吸入量比成人高出好几倍，受害极为严重，因此小孩铅中毒则会出现发育迟缓、食欲不振、行走不便和便秘、失眠；还有的伴有多动、听觉障碍、注意不集中和智力低下等现象，严重者造成脑组织损伤，可能导致终身残废。铅进入孕妇体内则会通过胎盘屏障，影响胎儿发育，造成畸形，流产或死胎等。世卫组织已经把铅确本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种铅离子胶体金免疫层析快速检测试纸条制备方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤a：胶体金溶液的制备：质量浓度为0.008～0.012％的氯金酸水溶液80～120mL，搅拌加热至沸腾后一次性快速加入质量浓度为0.8～1.2％的柠檬酸三钠水溶液，继续加热搅拌直至溶液呈酒红色，室温冷却后得含有胶体金颗粒的胶体金溶液，所述胶体金颗粒的粒径为10～30nm；步骤b：抗铅离子单抗标记的胶体金溶液的制备：将步骤a中的胶体金溶液8～12mL离心后弃上清液，沉淀用pH为8.0～8.5的碳酸钾溶液重新悬浮；将铅离子单克隆抗体0.04～0.1mg加入到胶体金溶液中，搅拌均匀后静置；逐滴加入质量浓度为8～12％的...

【技术特征摘要】
1.一种铅离子胶体金免疫层析快速检测试纸条制备方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤a：胶体金溶液的制备：质量浓度为0.008～0.012％的氯金酸水溶液80～120mL，搅拌加热至沸腾后一次性快速加入质量浓度为0.8～1.2％的柠檬酸三钠水溶液，继续加热搅拌直至溶液呈酒红色，室温冷却后得含有胶体金颗粒的胶体金溶液，所述胶体金颗粒的粒径为10～30nm；步骤b：抗铅离子单抗标记的胶体金溶液的制备：将步骤a中的胶体金溶液8～12mL离心后弃上清液，沉淀用pH为8.0～8.5的碳酸钾溶液重新悬浮；将铅离子单克隆抗体0.04～0.1mg加入到胶体金溶液中，搅拌均匀后静置；逐滴加入质量浓度为8～12％的无菌牛血清蛋白，搅拌后室温下静置过夜得标记后的胶体金溶液；将标记后的胶体金溶液再次离心，弃上清液，沉淀用4～6mL重悬液复溶，重悬液的组成为0.01-0.03mol/L磷酸盐、质量浓度为3％-8％的牛血清蛋白、质量浓度为0.1％-0.3％的吐温20和质量浓度为5％-15％的蔗糖，得到铅离子单克隆抗体标记的胶体金溶液；步骤c：喷金：将步骤b所得的铅离子单克隆抗体标记的胶体金溶液按6-15μL/cm的喷量喷在结合垫上，烘干后得喷金后的结合垫；步骤d：硝酸纤维素膜上包被C线与T线：其中C线为质控线，包被羊抗鼠IgG(免疫球蛋白G)，浓度为0.5-1.5mg/ml；T线为检测线，包被铅的检测抗原Pb2+-iEDTA(1-(4-异硫氰苄基)乙烯基二胺-N,N,N',N'-四乙酸)-BSA(牛血清蛋白)，浓度为0.1-1.0mg/ml；37℃-45℃抽风烘干...

【专利技术属性】
技术研发人员：付冠艳，许商成，龚进，杨福成，施丝，冷晓晓，张茂林，朱冰峰，杜航，宋云波，赵万江，裴雯，屈亚平，任秀龙，段维霞，刘心怡，
申请(专利权)人：重庆市职业病防治院重庆市第六人民医院，
类型：发明
国别省市：重庆,50