一种检测癌胚抗原的新型蛋白质-DNA复合物及其合成方法和应用技术

本发明专利技术属于生物检测技术领域，具体涉及一种检测癌胚抗原的新型蛋白质‑DNA复合物及其合成方法和应用。所述新型蛋白质‑DNA复合物包括辣根过氧化物酶标记的癌胚抗原二抗、葡萄糖氧化酶和DNA结构。本发明专利技术基于滚环复制技术构建了一种包封大量酶标二抗和葡萄糖氧化酶的新型蛋白质‑DNA复合结构，将其作为酶级联信号放大探针。通过采用96孔板固定癌胚抗原单克隆抗体分子，加入待测癌胚抗原后，形成三明治结构。通过采用封装的葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化产生H2O2，辣根过氧化物酶继而催化H2O2氧化ABTS的反应，实现了癌胚抗原的高灵敏、高特异性的比色法检测，对癌症的早期诊断和临床研究具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】
一种检测癌胚抗原的新型蛋白质-DNA复合物及其合成方法和应用
本专利技术属于生物检测
，具体涉及一种检测癌胚抗原的新型蛋白质-DNA复合物及其合成方法和应用。
技术介绍
DNA除了具有存储和传递遗传信息的功能外，由于其具有序列可设计性、合成简单、易于功能化、生物相容性好等优点，因此在DNA组装过程中可以精确地控制DNA纳米结构的分子结构和动态功能，从而构建二维和三维DNA纳米结构。目前，构建DNA结构的方法主要有单链平铺组装、杂交平铺组装、DNA折纸等，已广泛应用于生物传感、生物成像、生物医药等领域。然而基于沃森-克里克碱基互补配对原则的DNA自组装技术，在构建DNA结构的过程中普遍存在序列设计和合成复杂、空间位阻较大、分子装载效率低等问题。滚环复制是一种酶催化的恒温核酸扩增技术。该技术借鉴噬菌体DNA分子滚环的复制方式，可以指数放大特异性核酸序列。不同于常规DNA纳米自组装技术，滚环复制技术不依赖于沃森-克里克碱基互补配对原则，通过结晶作用就可以构建DNA纳米结构。该技术避免了DNA序列的复杂设计与合成，在DNA纳米结构的构建、生物分子检测、疾病诊断等领域应用广泛。《基于酶放本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种新型蛋白质‑DNA复合物，其特征在于，所述新型蛋白质‑DNA复合物包括辣根过氧化物酶标记的癌胚抗原二抗、葡萄糖氧化酶和DNA结构。

【技术特征摘要】
1.一种新型蛋白质-DNA复合物，其特征在于，所述新型蛋白质-DNA复合物包括辣根过氧化物酶标记的癌胚抗原二抗、葡萄糖氧化酶和DNA结构。2.根据权利要求1所述的新型蛋白质-DNA复合物，其特征在于，辣根过氧化物酶标记的癌胚抗原二抗和葡萄糖氧化酶封装进DNA结构中，形成HRP-Ab2/GOD@DNA复合物。3.根据权利要求1或2所述的新型蛋白质-DNA复合物，其特征在于，所述DNA结构由滚环复制自组装合成，合成方法为：将锁式探针与引物链进行成环反应，合成滚环扩增环形模板，进而触发滚环扩增反应，形成长的DNA单链；所述长的DNA单链由于局部浓度过高，通过各向异性的结晶方式析出形成微米级的多孔DNA结构。4.根据权利要求3所述的新型蛋白质-DNA复合物，其特征在于，所述锁式探针的核苷酸序列如SEQIDNO:1所示，锁式探针5'端修饰磷酸基团；所述引物链的核苷酸序列如SEQIDNO:2所示。5.权利要求1～4任一所述的新型蛋白质-DNA复合物的合成方法，其特征在于，包括以下步骤：S1.将锁式探针和引物链进行成环反应，合成滚环扩增环形模板；所述锁式探针的核苷酸序列如SEQIDNO:1所示，锁式探针5'端修饰磷酸基团；所述引物链的核苷酸序列如SEQIDNO:2所示；S2.将步骤S1制备得到的环形模板与辣根过氧化物酶标记的癌胚抗原二抗、葡萄糖氧化酶溶液混合后，触发滚环扩增反应，得到HRP-Ab2/GOD@DNA复合物。6.根据权利要求5所述的合成方法，其特征在于，步骤S2所用环形模板浓度为1.5～1.8μM。7.权利要求1～6任一所述的新型蛋白质-DNA复合物在制备检测癌胚抗原试剂或试剂盒中的应用。8.一种检测癌胚抗原的试剂盒，其特征在于，包括以下成分...

【专利技术属性】
技术研发人员：毕赛，闫永存，李园芳，李娟，
申请(专利权)人：青岛大学，
类型：发明
国别省市：山东,37