一种甘草总黄酮提取物的制备方法及其在蜜炼余甘子枇杷膏中的应用技术

本发明专利技术公开了一种甘草总黄酮提取物的制备方法及其在蜜炼余甘子枇杷膏中的应用，属于生物与新医药中轻工和化工生物技术的天然产物有效成份的分离提取技术。该制备方法的步骤如下：1）甘草粉碎过30目筛网；2）乙醇溶液提取，超声浸提；3）过滤，滤液浓缩；4）加热水搅拌溶解；5）加石油醚、乙酸乙酯萃取；6）加碳酸钠水溶液萃取，浓盐酸调节pH值；7）加乙酸乙酯萃取；8）减压浓缩，真空干燥。传统的甘草总黄酮提取工艺繁琐，成本较高；有机溶剂用量大，对环境污染严重。本专利通过改进能降低成本，减少有机溶剂的使用并保证产品质量。采用该方法制备的甘草总黄酮提取物在蜜炼余甘子枇杷膏中对心肌纤维化细胞的增殖具有较强的抑制作用。

A preparation method of total flavone extract from licorice and its application in honey-refined emblic loquat extract

The invention discloses a preparation method of total flavonoid extract of licorice and its application in honey-refined emblica loquat extract, belonging to the separation and extraction technology of effective components of natural products of light industry and chemical biotechnology in biology and new medicine. The steps of the preparation method are as follows: 1) liquorice is crushed through 30 mesh screen; 2) ethanol solution extraction, ultrasonic extraction; 3) filtration, filtrate concentration; 4) heating water stirring dissolution; 5) adding petroleum ether, ethyl acetate extraction; 6) adding sodium carbonate aqueous solution extraction, concentrated hydrochloric acid to adjust the pH value; 7) adding ethyl acetate extraction; 8) vacuum drying. The traditional extraction process of total flavonoids from licorice is cumbersome and costly, and the amount of organic solvents is large, which causes serious environmental pollution. This patent can reduce costs, reduce the use of organic solvents and ensure product quality through improvement. The total flavonoid extract of liquorice prepared by this method has a strong inhibitory effect on the proliferation of myocardial fibrosis cells in honey-refined Phyllanthus emblica Loquat Ointment.

【技术实现步骤摘要】
一种甘草总黄酮提取物的制备方法及其在蜜炼余甘子枇杷膏中的应用
本专利技术属于生物与新医药中轻工和化工生物技术的天然产物有效成份的分离提取技术，尤其涉及一种甘草中总黄酮提取物的制备方法及其在蜜炼余甘子枇杷膏中的应用。
技术介绍
蜜炼余甘子枇杷膏具有润肺化痰、止咳平喘、清热凉血、调心降火等功效，其主要含有枇杷、余甘子、甘草等活性成分。甘草作为蜜炼余甘子枇杷膏的主要成分，是一种常用的补益中草药。甘草多生长在干旱、半干旱的荒漠草原、沙漠边缘和黄土丘陵地带。具有补脾益气，清热解毒，祛痰止咳，缓急止痛，调和诸药等功效，用于脾胃虚弱，心悸气短，咳嗽痰多，四肢挛急疼痛等症状。甘草含有多种化学成分，甘草甜素和黄酮类物质是甘草中最重要的生理活性物质，主要存在于甘草根表皮以内的部分。黄酮作为甘草的主要成分之一，在抗菌、抗病毒、心肌保护、增强免疫力、抗癌防癌等方面具有显著疗效。本专利技术通过提高与改进甘草中总黄酮的提取率，并评价所提取的总黄酮在心肌纤维化细胞改善方面的作用，对药物防治心肌纤维化等多种心脏病具有积极的作用。本专利技术结合传统工艺与现代工艺，细化工艺参数，提取时辅助超声，极大的提高了总黄酮提取率，节约了提取时间和成本。
技术实现思路
本专利技术提供了甘草中总黄酮的提取与应用。本专利技术将传统工艺与现代工艺相结合，细化工艺参数，在浸提时辅助超声提取，其工艺具有选择性高、操作时间短、溶剂消耗小、有效成分收率高的特点。为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供如下技术方案：一种甘草总黄酮提取物的制备方法，包括以下步骤：（1）将甘草于40℃烘干、采用万能粉碎机将其粉碎，过30目筛网；（2）向甘草粉末中加入乙醇溶液，混匀，辅助超声浸提；（3）将浸提后的料液合并、过滤，滤液减压浓缩至浓稠呈膏状得浓缩浸膏；（4）向浓缩浸膏中加入热水，搅拌溶解得提取物溶液；（5）加石油醚、乙酸乙酯萃取，静置分离有机层和水层，水层重复萃取1次，收集有机层；（6）将有机层合并，加入碳酸钠水溶液萃取，静置去除有机层，用浓盐酸调节溶液pH值；（7）加入乙酸乙酯萃取，搅拌60min，静置30min，去除水层；（8）将有机层浓缩呈膏状，用真空干燥箱烘干制得甘草总黄酮提取物。优选的，所述步骤（2）中加入甘草与乙醇溶液料液体积比为1:10~1:25g/ml。优选的，所述步骤（2）中加入乙醇溶液浓度为40%~80%。优选的，所述步骤（2）中辅助超声温度为30~60℃，超声时间为30~60min。优选的，所述步骤（2）中采用超声辅助乙醇溶液进行提取，提取次数为2~3次。优选的，所述步骤（4）中浓缩浸膏与热水的料液体积比为1:20~1:30g/ml，热水温度为50~80℃。优选的，所述步骤（5）中提取物溶液与石油醚的料液体积比为1:10~1:15，与乙酸乙酯体积比为1:15~1:25。优选的，所述步骤（6）中加入碳酸钠水溶液浓度为4~6%，有机层与碳酸钠水溶液料液体积比为1:5~1:10。优选的，所述步骤（6）中用浓盐酸调节pH值为5~6。优选的，所述步骤（7）中水溶液与乙酸乙酯料液体积比为1:5~1:10。优选的，所述步骤（8）中采用减压法将有机层浓缩呈膏状，减压温度为40~50℃。优选的，所述步骤（8）中采用真空干燥箱烘干，干燥温度50~60℃，干燥时间为18~32小时。本专利技术操作简单易懂，与现有技术相比，本专利所述的一种甘草总黄酮提取物的制备方法及应用具有以下有益效果。本专利技术结合传统工艺与现代工艺，采用乙醇溶剂作为提取液，在浸提时辅助超声提取，节约了提取时间，减少了有机溶剂的使用量，节约了成本。本专利技术制备的甘草总黄酮提取物在蜜炼余甘子枇杷膏中发挥了较强的对心肌纤维化细胞的增殖抑制作用。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术作进一步的详细说明，但实施例并不是对本专利技术技术方案的限定，所有基于本专利技术教导所作出的变化或等同替换，均应属于本专利技术的保护范围。实施例一准确称取干燥粉碎过30目筛网的甘草粉末20g，按照料液体积比1:10g/ml加入40%的乙醇溶液，混匀，辅助超声浸提2次，超声提取温度30℃、时间30min，将浸提后的料液合并、过滤。滤液在40℃下减压浓缩得浓缩浸膏，按照料液体积比1:20g/ml向浸膏中加入60℃热水，搅拌120min，按溶液与萃取溶剂体积比依次加入1:10石油醚、1:15乙酸乙酯，搅拌120min，静置60min，分离有机层和水层，水层重复萃取1次，收集有机层；合并有机层，加入浓度4%碳酸钠水溶液，有机层与碳酸钠水溶液的料液体积比为1:5，搅拌120min，静置60min，去除有机层，水层滴加浓盐酸，调节pH值至5。水溶液中加入体积比为1:5的乙酸乙酯，搅拌60min，静置30分钟，去除水层。有机层40℃浓缩至呈膏状，将浓缩后的膏状物料置于50℃真空干燥箱内干燥，干燥18小时，得甘草总黄酮提取物，提取物收率5.93%，总黄酮纯度81.7%。实施例二准确称取干燥粉碎过30目筛网的甘草粉末20g，按照料液体积比1:15（g/ml）加入80%的乙醇溶液，混匀，辅助超声浸提3次，超声提取温度60℃、时间60min，将浸提后的料液合并、过滤。滤液在50℃下减压浓缩得浓缩浸膏，按照料液体积比1:30g/ml向浸膏中加入70℃热水，搅拌120min，按溶液与萃取溶剂体积比依次加入1:15石油醚、1:20乙酸乙酯，搅拌120min，静置60min，分离有机层和水层，水层重复萃取1次，收集有机层；合并有机层，加入浓度5%碳酸钠水溶液，有机层与碳酸钠水溶液的料液体积比为1:10，搅拌120min，静置60min，去除有机层，水层滴加浓盐酸，调节pH值至6。水溶液中加入体积比为1:10的乙酸乙酯，搅拌60min，静置30分钟，去除水层。有机层50℃浓缩至呈膏状，将浓缩后的膏状物料置于60℃真空干燥箱内干燥，干燥24小时，得到甘草总黄酮提取物，提取物收率6.06%，总黄酮纯度82.4%。实施例三准确称取干燥粉碎过30目筛网的甘草粉末20g，按照料液体积比1:25g/ml加入70%的乙醇溶液，混匀，辅助超声浸提3次，超声提取温度50℃、时间30min，将浸提后的料液合并、过滤。滤液在40℃下减压浓缩得浓缩浸膏，按照料液体积比1:30g/ml向浸膏中加入80℃热水，搅拌120min，按溶液与萃取溶剂体积比依次加入1:15石油醚、1:25乙酸乙酯，搅拌120min，静置60min，分离有机层和水层，水层重复萃取1次，收集有机层；合并有机层，加入浓度6%碳酸钠水溶液，有机层与碳酸钠水溶液的料液体积比为1:5，搅拌120min，静置60min，去除有机层，水层滴加浓盐酸，调节pH值至6。水溶液中加入体积比为1:10的乙酸乙酯，搅拌60min，静置30分钟，去除水层。有机层50℃浓缩至呈膏状，将浓缩后的膏状物料置于60℃真空干燥箱内干燥，干燥32小时，得到甘草总黄酮提取物，提取物收率5.98%，总黄酮纯度82.7%。实施例四准确称取干燥粉碎过30目筛网的甘草粉末20g，按照料液体积比1:20g/ml加入60%的乙醇溶液，混匀，辅助超声浸提2次，超声提取温度40℃、时间40min，将浸提后的料液合并、过滤。滤液在40℃下减压浓缩得浓缩浸膏，按照料液体积比1:20g/ml向浸膏中加入60℃热水，搅拌12本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种甘草总黄酮提取物的制备方法，其特征在于包括以下步骤：(1)将甘草于40℃烘干、采用万能粉碎机将其粉碎，过30目筛网；(2)向甘草粉末中加入乙醇溶液，混匀，辅助超声浸提；(3)将浸提后的料液合并、过滤，滤液减压浓缩至浓稠呈膏状得浓缩浸膏；(4)向浓缩浸膏中加入热水，搅拌溶解得提取物溶液；(5)加石油醚、乙酸乙酯萃取，静置分离有机层和水层，水层重复萃取1次，收集有机层；(6)将有机层合并，加入碳酸钠水溶液萃取，静置去除有机层，用浓盐酸调节溶液pH值；(7)加入乙酸乙酯萃取，搅拌60min，静置30min，去除水层；(8)将有机层浓缩呈膏状，用真空干燥箱烘干制得甘草总黄酮提取物。

【技术特征摘要】
1.一种甘草总黄酮提取物的制备方法，其特征在于包括以下步骤：(1)将甘草于40℃烘干、采用万能粉碎机将其粉碎，过30目筛网；(2)向甘草粉末中加入乙醇溶液，混匀，辅助超声浸提；(3)将浸提后的料液合并、过滤，滤液减压浓缩至浓稠呈膏状得浓缩浸膏；(4)向浓缩浸膏中加入热水，搅拌溶解得提取物溶液；(5)加石油醚、乙酸乙酯萃取，静置分离有机层和水层，水层重复萃取1次，收集有机层；(6)将有机层合并，加入碳酸钠水溶液萃取，静置去除有机层，用浓盐酸调节溶液pH值；(7)加入乙酸乙酯萃取，搅拌60min，静置30min，去除水层；(8)将有机层浓缩呈膏状，用真空干燥箱烘干制得甘草总黄酮提取物。2.如权利要求1所述的一种甘草总黄酮提取物的制备方法，其特征在于，所述步骤（2）中甘草粉末与乙醇溶液的料液体积比为1:10~1:25g/ml。3.如权利要求1所述的一种甘草总黄酮提取物的制备方法，其特征在于，所述步骤（2）中乙醇溶液的浓度为40%~80%。4.如权利要求1所述的一种甘草总黄酮提取物的制备方法，其特征在于，所述步骤（2）中采用超声辅助乙醇溶液进行提取，其超声温度为30~60℃，超声时间30~60min。5.如权利要求1所述的一种甘草总黄酮提取物的制备方法，其特征在于，所述步骤（...

【专利技术属性】
技术研发人员：李春泉，陈德宾，肖佳标，林泳冰，杨璇，
申请(专利权)人：汕头市汇群大健康科技研究院有限公司，广东汇群中药饮片股份有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44