一种从美藤果壳提取黄酮的方法技术

本发明专利技术公开了一种从美藤果壳提取黄酮的方法，先取美藤果壳烘干、粉碎，再将粉碎后的美藤果壳与水混匀，并加入复合酶进行水解，然后酶解液内加入乙醇，超声处理，过滤后减压蒸馏，将得到粗提物通过大孔树脂层析，收集洗脱液，浓缩后真空干燥，得到黄酮提取物。本发明专利技术利用大量废弃的美藤果壳作为原料提取分离黄酮，原料易得，提升了美藤果的附加值。

A Method for Extracting Flavonoids from the Shell of Meitong

The invention discloses a method for extracting flavonoids from the shell of Meitong vine. First, the shell of Meitong vine is dried and crushed, then the crushed shell of Meitong vine is mixed with water, and hydrolyzed by adding complex enzymes. Then, ethanol is added into the hydrolysate, ultrasound is processed, filtered and vacuum distillation is carried out. The crude extract is obtained through macroporous resin chromatography, eluent is collected, concentrated and vacuum drying to obtain flavonoids. Extract. The invention extracts and separates flavonoids by using a large number of abandoned melon shell as raw material, which is easy to obtain and enhances the added value of the melon fruit.

【技术实现步骤摘要】
一种从美藤果壳提取黄酮的方法
本专利技术属于植物提取
，具体涉及一种从美藤果壳提取黄酮的方法。
技术介绍
美藤果又名南美油藤，生长于南美洲安第斯山脉地区热带雨林。现在我国云南普洱和西双版纳等地广泛种植。美藤果果仁营养丰富，富含不饱和脂肪酸、蛋白质、维生素及矿物质，能够促进骨骼生长及神经系统发育，预防心血管疾病，防癌等方面具有重要功能作用。2013年1月正式公告批准美藤果油为国家新资源食品。现阶段主要是利用果仁提炼美藤果油及加工相关终端产品，脱壳生产后留下的美藤果外壳含有丰富的多酚及黄酮等活性成分。这些副产物的丢弃一方面污染了环境，另一方面浪费了其中的大量资源。因此，研究一种从果壳兼具高提取率及高纯度的提取方法，加强美藤果壳的综合利用，变废为宝，提高其附加值具有很大经济价值。对果壳中总黄酮提取方法有超声波辅助提取法（CN104857031B一种刺头复叶耳蕨总黄酮提取物的制备方法）、乙醇浸提法（CN105560330A一种火龙果皮总黄酮的提取方法）、逆流提取法（CN101669980B从淫羊藿中提取分离淫羊藿苷及总黄酮的方法）。超声波辅助提取法因为其提取率高、用时短是目前使用较多的一种提取黄酮的方法，但是由于提取过程中掺杂了多糖、蛋白等大分子，使其提取纯度较低；乙醇浸提法虽然方法简单，对设备要求低，但是提取率低、纯度低；逆流提取法耗时较长，并且对设备要求高。另外，现有的纯化方法多为聚酰胺纯化法，纯化后黄酮产品纯度低，洗脱麻烦，对黄酮类成分的不可逆吸附值高。
技术实现思路
为了解决目前美藤果壳资源大量浪费的现象，更好的开发和利用美藤果壳资源，本专利技术的提出了一种高效、节能的从美藤果壳中提取黄酮的方法。为实现上述目的，本专利技术提供了一种从美藤果壳提取黄酮的方法，所述方法包括以下步骤：步骤1，取美藤果壳烘干、粉碎；步骤2，将粉碎后的美藤果壳与水混匀，并加入复合酶进行水解；步骤3，向步骤2的酶解液内加入乙醇，超声处理，过滤后减压蒸馏，得粗提物；步骤4，将粗提物通过大孔树脂层析，收集洗脱液，浓缩后真空干燥，得到黄酮提取物。进一步地，步骤2中美藤果壳与水按重量比1：10混匀。进一步地，步骤2中复合酶是纤维素酶和果胶酶按重量比1:1-3:1混合得到，加酶量为美藤果壳粉重量的0.2-1.2%，酶解温度为40℃-50℃。进一步地，步骤3中酶解液和乙醇的体积比为1：1，超声处理的温度为40-70℃，超声功率为100-300W，超声处理时间为40min。进一步地，步骤4中大孔树脂层析的吸附剂为AB-8型大孔吸附树脂，上样液体浓度为0.5-2.0mg/mL，上样速率为1.0-5.0BV/h。有益效果：1、本专利技术利用大量废弃的美藤果壳作为原料提取分离黄酮，原料易得，提升了美藤果的附加值。2、本专利技术选用复合酶（纤维素酶-果胶酶）充分破坏了以纤维素和果胶为主的细胞壁结构，使细胞内的黄酮类物质充分地释放出来。酶法-超声辅助技术结合，加快了美藤果壳中总黄酮的浸出，反应条件温和，提高了生产效率；AB-8型大孔树脂层析，提高了黄酮的纯度产品品质佳。3、本提取工艺的提取物对胆固醇酯酶活性具有很好的抑制效果，可降低胆固醇浓度，因此可作为保健食品或药品原料，更好的开发和利用了美藤果壳资源。附图说明图1为实施例1中酶解时间对总黄酮得率的影响结果图。图2为实施例1中酶解pH值对总黄酮得率的影响结果图。图3为实施例1中超声时间对总黄酮提取率的影响结果图。具体实施方式实施例1从美藤果壳中提取黄酮的方法研究试验：(一)工艺参数的研究申请人经过多次研究，发现酶解过程中，酶解时间、酶解pH值；超声提取过程中超声时间及粗提物纯化过程中树脂类型影响黄酮纯度，因此申请人对此深入研究，确定最佳参数。以下实验中，总黄酮含量测定：利用紫外-可见分光光度法，以芦丁为标准品，采用Al(NO3)3显色法，根据标准曲线法测定各样品中总黄酮的含量。1、酶解时间对总黄酮得率的影响取美藤果壳烘干、粉碎；将粉碎后的美藤果壳按1:10的比例加水混匀；加入复合酶水解，复合酶纤维素酶和果胶酶的比例为2:1；加酶量为美藤果壳粉0.8%；酶解温度为45℃，pH4.0，酶解时间（0.5、1.0、1.5、2.0、2.5h）；酶解液内加入等体积乙醇，超声时间：40min；超声温度：50℃；超声功率：200W。得粗提物。酶解时间对总黄酮得率的影响如图1所示，随着酶解时间的增加，提取率先增加后降低。但酶解时间为1.5h时，总黄酮提取率最大，所以选用1.5h为最佳酶解时间。2、酶解pH值对总黄酮得率的影响取美藤果壳烘干、粉碎；将粉碎后的美藤果壳按1:10的比例加水混匀；加入复合酶水解，复合酶纤维素酶和果胶酶的比例为：2:1；加酶量为美藤果壳粉0.8%；酶解温度为45℃，酶解时间1.5h,PH值（3.5、4.0、4.5、5.0、5.5）,酶解时间2h；酶解液内加入等体积乙醇，超声时间：30min；超声温度：50℃；超声功率：200W。得粗提物。酶解pH对总黄酮得率的影响如图2所示，随着酶解pH的增加，提取率先增加后降低。但酶解pH为4.5时，总黄酮提取率最大，所以选用pH4.5为最佳酶解PH值。3、超声时间对总黄酮得率的影响取美藤果壳烘干、粉碎；将粉碎后的美藤果壳按1:10的比例加水混匀；加入复合酶水解，复合酶纤维素酶和果胶酶的比例为：2:1；加酶量为美藤果壳粉0.8%；酶解温度为45℃，酶解时间1.5h,PH值4.0,酶解时间2h；酶解液内加入等体积乙醇，超声时间（10、20、30、40、50min）；超声温度：50℃；超声功率：200W。得粗提物。超声时间对总黄酮得率的影响如图3所示，随着超声时间的增加，提取率增加。但当超声功率达到40min时，总黄酮得率最大，所以选用超声时间为40min。4、根据静态吸附率和解吸率选择大孔树脂取美藤果壳烘干、粉碎；将粉碎后的美藤果壳按1:10的比例加水混匀；加入复合酶水解，复合酶纤维素酶和果胶酶的比例为：2:1；加酶量为美藤果壳粉0.8%；酶解温度为45℃，酶解时间1.5h,PH值4.0,酶解时间2h；酶解液内加入等体积乙醇，超声时间（10、20、30、40、50min）；超声温度：50℃；超声功率：200W。得粗提物。取4种树脂（D101、HPD-450、AB-8、HPD-100），加入样品液吸附后，测吸附率；用90%的乙醇解吸，测解析率。选出吸附和解吸效果好的树脂。由表1可以得出，AB-8树脂和D101树脂对黄酮的吸附效果和解吸效果相对较好，但是AB-8树脂的吸附效果更优，综合考虑，本实验采用AB-8树脂作为纯化美藤果壳黄酮的树脂。表1四种树脂对黄酮的吸附、解吸结果实施例2一种从美藤果壳提取黄酮的方法，所述方法包括以下步骤：1）取美藤果壳烘干、粉碎；2）将粉碎后的美藤果壳按1:10的比例加水混匀，加入复合酶水解。3）酶解液内加入乙醇，超声处理40min，过滤后减压蒸馏得粗提物。4）将粗提物通过大孔树脂层析，收集洗脱液，浓缩真空干燥，得到纯化黄酮。所述步骤2中加入复合酶纤维素酶和果胶酶的比例为：1:1；加酶量为美藤果壳粉0.2%；酶解温度为40℃，酶解pH值4.5。所述步骤3酶解液内加入等体积乙醇，超声温度：40℃；超声功率：100W。所述步骤4粗提物通过大孔树脂本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种从美藤果壳提取黄酮的方法，包括以下步骤：步骤1，取美藤果壳烘干、粉碎；步骤2，将粉碎后的美藤果壳与水混匀，并加入复合酶进行水解；步骤3，向步骤2的酶解液内加入乙醇，超声处理，过滤后减压蒸馏，得粗提物；步骤4，将粗提物通过大孔树脂层析，收集洗脱液，浓缩后真空干燥，得到黄酮提取物。

【技术特征摘要】
1.一种从美藤果壳提取黄酮的方法，包括以下步骤：步骤1，取美藤果壳烘干、粉碎；步骤2，将粉碎后的美藤果壳与水混匀，并加入复合酶进行水解；步骤3，向步骤2的酶解液内加入乙醇，超声处理，过滤后减压蒸馏，得粗提物；步骤4，将粗提物通过大孔树脂层析，收集洗脱液，浓缩后真空干燥，得到黄酮提取物。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤2中美藤果壳与水按重量比1：10混匀。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤2中复合酶是纤维素酶和...

【专利技术属性】
技术研发人员：唐喆，苏建辉，董继红，仓辉，韩粉女，许琦，
申请(专利权)人：盐城工学院，
类型：发明
国别省市：江苏,32