祖师麻甲素在制备防治肠道菌群失调相关制剂中的应用制造技术

本发明专利技术公开了祖师麻甲素在制备防治肠道菌群失调相关制剂中的应用，首次发现祖师麻甲素能够有效改善炎性肠病的症状，首次发现祖师麻甲素能够有效维护主体肠道菌群的平衡，有助于肠道内优势菌群结构恢复和菌群多样化，首次发现祖师麻甲素能够有效改善肠道菌群的代谢情况，促进具有保护肠粘膜完整性功能的短链脂肪酸的产生，本发明专利技术提供的具有防治肠道菌群失调相关疾病的药物组合物，可以方便和药物载体制备成多种剂型，临床上服用方便，并且使用安全，长期服用无毒副作用。

Application of Zushima A in the preparation of preparations related to the prevention and treatment of intestinal flora imbalance

The invention discloses the application of Zushima A in the preparation of preparations related to the prevention and control of intestinal flora imbalance. For the first time, it is found that Zushima A can effectively improve the symptoms of inflammatory bowel disease, and it is found for the first time that Zushima A can effectively maintain the balance of the main intestinal flora, help to restore the dominant flora structure and diversify the flora in the intestine. It is also found for the first time that Zushima A can effectively improve the intestine The metabolic condition of the bacterial flora promotes the production of short chain fatty acids with the function of protecting intestinal mucosal integrity. The medicine composition provided by the invention for preventing and treating intestinal flora disorders related diseases can be conveniently prepared into various dosage forms with drug carriers, which is convenient to take clinically, safe to use and has no toxic side effects for a long time.

【技术实现步骤摘要】
祖师麻甲素在制备防治肠道菌群失调相关制剂中的应用
本专利技术涉及祖师麻甲素在制药领域的用途，特别是祖师麻甲素在制备防治肠道菌群失调相关制剂中的应用。
技术介绍
炎性肠病为累及回肠、直肠、结肠的一种特发性肠道炎症性疾病。临床表现腹泻、腹痛，甚至可有血便，肠道菌群比例和功能严重失调。本病包括溃疡性结肠炎和克罗恩病。溃疡性结肠炎是结肠黏膜层和黏膜下层连续性炎症，疾病通常先累及直肠，逐渐向全结肠蔓延,克罗恩病可累及全消化道，为非连续性全层炎症，最常累及部位为末端回肠、结肠和肛周。炎性肠病的病程延长会增加结直肠癌的风险，严重影响病人的生活质量。目前炎性肠病一线治疗方法包括口服或直肠给予美沙拉嗪及前体药物柳氮磺砒啶和巴柳氮等，柳氮磺砒啶虽然为治疗溃疡性结肠炎的有效药物，但对克罗恩氏病的疗效存在争议，同时约20％的患者因磺胺类过敏或不能耐受而停用；美沙拉嗪治疗过程中也会发生白细胞下降、肝功能异常、皮疹及恶心、呕吐等胃肠道副作用，且停药后复发率高。其他治疗炎性肠病的传统药物皮质激素类、免疫抑制剂等具有严重的毒副作用，限制了它们的应用。肠道内存着在大量、并且种类众多的共生微生物群落,它们对宿主的生长发育、营养吸收以及免疫都有着重要的作用。肠道菌群按一定的比例互相制约、互相依存，形成生态平衡，一旦机体内外环境发生变化，如炎性肠病等情况下，会引起菌群失调，其正常生理组合被破坏，而产生病理性组合，引起临床症状就称为肠道菌群失调症。微生态制剂(如益生菌、益生元制剂等)可以增加肠道内有益菌的数量和活力，抑制致病菌的生长，帮助恢复正常的菌群平衡，是肠道菌群失调症的主要防治手段。然而，微生态制剂用于预防和治疗肠道菌群失调症有一定的不足和局限性，如微生态制剂的预防效果好于治疗，作用发挥较慢，故应长时间连续饲喂，才能达到预期效果；对储存条件要求较高，保质期相对较短，要保证细菌的活力，微生态制剂一般要求在低温、干燥处短期保存等。祖师麻甲素(Daphnetin)是从瑞香属植物长白瑞香(DaphneKoreanNakai)中提取出来的有效成分，又名瑞香素，化学名为7，8-二羟基香豆素(7，8-dithydroxycoumarin)，主要存在于瑞香科属植物中。瑞香素具有扩张冠状血管，增加冠脉血流量，减少心肌耗氧量，改善心肌代谢促进心功能恢复，扩张末梢血管以及抗动脉血栓形成和抑制血小板凝集作用，并有兴奋垂体-肾上腺皮质系统的抗炎作用。目前尚未有祖师麻甲素调控肠道菌群失调、改善炎性肠病的相关报道。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提供祖师麻甲素的一种新用途。为了解决上述技术问题，本专利技术公开祖师麻甲素在制备防治肠道菌群失调相关制剂中的应用。优选地，所述的肠道菌群失调包括炎性肠病、长期应用广谱抗生素导致的肠道菌群失调症。其中，所述的防治肠道菌群失调相关制剂包括药物、保健品或食品。进一步地，所述的防治肠道菌群失调的药物包含祖师麻甲素和药学上可接受的载体。所述祖师麻甲素和药学上可接受的载体可以制备成颗粒剂、片剂、胶囊剂或者口服液制剂。其中，在制备成片剂时，将祖师麻甲素添加载体乳糖或玉米淀粉，需要时加入润滑剂硬脂酸镁，混合均匀，然而压片制成片剂。在制备成颗粒剂时，将祖师麻甲素添加载体乳糖或玉米淀粉，制粒，整粒，干燥，制成颗粒剂。在制备成胶囊剂时，将祖师麻甲素添加载体乳糖或玉米淀粉，制粒，整粒，干燥，然后装胶囊制成胶囊剂。在制备成口服液制剂时，取祖师麻甲素加入单糖浆，分装，灭菌，即得口服液制剂。有益效果：本专利技术和现有技术相比具有以下优点：(1)实验结果表明，本专利技术首次发现祖师麻甲素能够有效改善炎性肠病的症状；(2)本专利技术首次发现祖师麻甲素能够有效维护主体肠道菌群的平衡，有助于肠道内优势菌群结构恢复和菌群多样化；(3)本专利技术首次发现祖师麻甲素能够有效改善肠道菌群的代谢情况，促进具有保护肠粘膜完整性功能的短链脂肪酸的产生；(4)本专利技术提供的具有防治肠道菌群失调相关疾病的复方组合物，可以方便和药物载体制备成多种剂型，临床上服用方便，并且使用安全，长期服用无毒副作用。附图说明下面结合附图和具体实施方式对本专利技术做更进一步的具体说明，本专利技术的上述和/或其他方面的优点将会变得更加清楚。图1a祖师麻甲素对DSS诱导的急性溃疡性结肠炎小鼠结肠长度的影响情况，其中，***P<0.005，###P<0.005；图1b祖师麻甲素对DSS诱导的急性溃疡性结肠炎小鼠结肠病理的影响情况；图2a祖师麻甲素对小鼠肠道菌群失调的影响情况(门水平)，其中，**P<0.01，#P<0.05；图2b祖师麻甲素对小鼠肠道菌群失调的影响情况(属水平)，其中，*P<0.05，#P<0.05，***P<0.005，###P<0.005；图3祖师麻甲素对小鼠肠道菌群代谢产物短链脂肪酸产生的影响，其中，*P<0.05，**P<0.01，##P<0.01。具体实施方式根据下述实施例，可以更好地理解本专利技术。1、实验材料1.1实验用药物及试剂：祖师麻甲素(Sigma-Aldrich)；葡聚糖硫酸钠盐(DSS,MW36000-50000,CAS:9011-18-1)，MPBiomedicals；无水乙醇(产品编号E111963，CAS:64-17-5)，上海阿拉丁生化科技股份有限公司。1.2实验用动物及饲养：BALB/c小鼠，4-6周龄，由南京大学模式动物所提供；全价营养颗粒饲料：由江苏省协同医药生物技术有限公司提供；饲养条件：室温20±2℃，湿度55-65％，明暗交替，光度适度，通风洁净良好。2、实验方法2.1DSS诱导小鼠肠道菌群失调的造模方法。小鼠分为五组，每组8只，分别为正常组，DSS诱导模型组，以及三种不同剂量(4、8、16mg/kg)祖师麻甲素治疗组。在小鼠的饮用水中添加3.5％的DSS，5天以后根据其症状(体重、稀便、血便等)判断造模是否成功。不同剂量祖师麻甲素采用灌胃给药，连续给药6天，收集小鼠粪便，随即处死小鼠，取结肠，测量不同组小鼠结肠长度的差别，结肠组织用4％多聚甲醛固定后，进行H&E染色，观察祖师麻甲素治疗对小鼠肠炎病理特征的改善情况。2.2祖师麻甲素对DSS诱导小鼠肠道菌群失调的治疗作用。根据Qiagen粪便DNA提取试剂盒操作程序分离纯化肠道菌DNA，采用PCR技术检测r16SDNA拷贝数。16SPCR引物由测序接头引物、Index和V3区引物组成。将纯化后的16SrRNA-V3区的PCR产物进行测序，测序平台为IlluminaMiseq。将测序数据上传至服务器端进行数据分析，预处理去除低质量序列，按照rRNA发现、聚类和鉴定步骤进行分析。计算每个样本的操作分类单元数量，绘制稀疏曲线(特定的分类单元代表某特定物种)；计算单个样本的Shannon指数(指数越大表示该样本中的物种越丰富)。在门、属等不同分类水平上统计样本的物种丰度，并行聚类分析。综合应用运算分类单位聚类分析、多样性分析和分类学分析等生物信息技术解析肠道菌群的结构、多样性和丰度，评价不同组别肠道菌群结构差异。2.3祖师麻甲素对DSS诱导小鼠肠道菌群代谢紊乱的影响。采用上述造模和给药的方法，收集小鼠的粪便。配制不同浓度的标准品溶本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.祖师麻甲素在制备防治肠道菌群失调相关制剂中的应用。

【技术特征摘要】
1.祖师麻甲素在制备防治肠道菌群失调相关制剂中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的肠道菌群失调包括炎性肠病、长期应用广谱抗生素导致的肠道菌群失调症。3.根据权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：史丽云，张薇，纪建建，葛啸垠，
申请(专利权)人：南京中医药大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32