一种免前处理自动化提取大体积全血DNA的方法技术

一种免前处理自动化提取大体积全血DNA的方法，其特征在于包括下列步骤：1、制备一种能够吸附白细胞的磁性微球A；使用活化剂将羧基磁性纳米微球活化，再用含3～10%质量体积百分比浓度的壳聚糖的10～50mmol/L pH7.0～8.0的磷酸钠或磷酸钾缓冲液（简称PB）交联，然后用封闭液封闭，最后，将微球悬浮于10～50mmol/L pH7.0～8.0的PB，即得磁性微球A；2、从大体积全血中提取DNA；1）使用红细胞裂解液裂解红细胞，其过程中同时用磁性微球A吸附白细胞；2）使用白细胞裂解液裂解吸附在磁性微球A上的白细胞，并将释放的DNA用磁性微球B提取出来；本发明专利技术的主要优点在于：克服了现有大体积全血技术必须先用手工操作进行前处理再进行自动化提取的弊端。

A Method for Automated Extraction of Large Volume Whole Blood DNA without Pretreatment

A method for automated extraction of large volume whole blood DNA without pretreatment is characterized by the following steps: 1. Preparation of a magnetic microsphere A capable of adsorbing white blood cells; activation of carboxyl magnetic nanospheres with activator, and cross-linking of 10-50 mmol/L chitosan with pH 7.0-8.0 or sodium phosphate buffer (PB) containing 3-10% mass fraction concentration, respectively. Finally, magnetic microsphere A was obtained by suspending the microspheres in PB with pH 7.0-8.0 of 10-50 mmol/L. 2. DNA was extracted from whole blood. 1) Red blood cell lysate was used to lyse red blood cells, and magnetic microsphere A was used to absorb white blood cells in the process. 2) White blood cell lysate was used to lyse white blood cells adsorbed on magnetic microsphere A, and the released DNA was used magnetic microspheres. B is extracted; the main advantage of the present invention is that it overcomes the disadvantage that the existing large volume whole blood technology must be handled before automatic extraction.

【技术实现步骤摘要】
一种免前处理自动化提取大体积全血DNA的方法
本专利技术涉及生物
，具体涉及一种免前处理可实现完整自动化提取大体积全血DNA的方法。
技术介绍
随着基因组测序技术快速进步，以及生物信息与大数据科学的交叉应用，使人们可以更准确地理解环境和人类遗传分子之间的相互作用，以期精确地描绘疾病发生的本质，从而改进目前对于疾病的诊查和治疗，推动了转化医学和以个体化医疗为基础的精准医疗的快速发展。生物样本库(Biobank)，尤其是DNA样本库是众多重要科研成果快速产业化、应用到临床，实现“转化医学”和“精准医疗”的重要保证。随着医院和第三方独立医学实验室等医疗机构建立DNA样本库的需求越来越广泛，1～10ml大体积全血DNA提取的工作量迅速增加，传统的手工操作已经不能满足建立DNA样本库的要求，采用自动化工作站进行大体积全血DNA的快速提取已经成为大势所趋。目前，市场上大体积全血DNA提取的主流技术主要有两类：离心柱法和磁性纳米微球法。不管是哪种技术，都需要在DNA提取之前，对大体积全血进行前处理，把血细胞或者白细胞分离出来，或者较新鲜的全血可以分离制备得到白膜，然后再用离心柱法或者磁性纳米本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种免前处理自动化提取大体积全血DNA的方法，其特征在于包括下列步骤：1）制备一种能够吸附白细胞的磁性微球A使用活化剂将羧基磁性纳米微球活化，再用含3～10%质量体积百分比浓度的壳聚糖的10～50mmol/L pH7.0～8.0的磷酸钠或磷酸钾缓冲液交联，然后用封闭液封闭，最后，将微球悬浮于10～50mmol/L pH7.0～8.0的缓冲液中，即得磁性微球A；2） 从大体积全血中提取DNA2.1）使用红细胞裂解液裂解红细胞，其过程中同时用磁性微球A吸附白细胞；2.2）使用白细胞裂解液裂解吸附在磁性微球A上的白细胞，并将释放的DNA用磁性微球B提取出来。

【技术特征摘要】
1.一种免前处理自动化提取大体积全血DNA的方法，其特征在于包括下列步骤：1）制备一种能够吸附白细胞的磁性微球A使用活化剂将羧基磁性纳米微球活化，再用含3～10%质量体积百分比浓度的壳聚糖的10～50mmol/LpH7.0～8.0的磷酸钠或磷酸钾缓冲液交联，然后用封闭液封闭，最后，将微球悬浮于10～50mmol/LpH7.0～8.0的缓冲液中，即得磁性微球A；2）从大体积全血中提取DNA2.1）使用红细胞裂解液裂解红细胞，其过程中同时用磁性微球A吸附白细胞；2.2）使用白细胞裂解液裂解吸附在磁性微球A上的白细胞，并将释放的DNA用磁性微球B提取出来。2.根据权利要求1所述的一种免前处理自动化提取大体积全血DNA的方法，其特征在于：所述羧基磁性纳米微球为表面修饰羧基的磁性微球B。3.根据权利要求1所述的一种免前处理...

【专利技术属性】
技术研发人员：董涛，梁经纶，王凌云，
申请(专利权)人：长春市志昂生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：吉林,22