间充质干细胞制剂致敏性的评价方法和应用技术

本发明专利技术提供了一种间充质干细胞制剂致敏性的评价方法和应用，涉及生物技术领域。该间充质干细胞制剂致敏性的评价方法包括使用所述间充质干细胞制剂免疫动物，免疫动物分为低剂量组和高剂量组；然后按照免疫后的动物的症状将所述间充质干细胞制剂的致敏性划分为预设的等级；该方法还提供了低剂量和高剂量下的合理的药物用量，避免了由于给药量不合理导致的评价结果不准确的问题，缓解了现有技术中缺乏一种有效地对间充质干细胞制剂的致敏性的评价方法。

【技术实现步骤摘要】
间充质干细胞制剂致敏性的评价方法和应用
本专利技术涉及生物
，尤其是涉及一种间充质干细胞制剂致敏性的评价方法和应用。
技术介绍
间充质干细胞来源于发育早期的中胚层和外胚层，属于多能干细胞，因其具有多向分化潜能、造血支持和促进干细胞植入、免疫调控和自我复制等特点而日益受到人们的关注。间充质干细胞在体内或体外特定的诱导条件下，可分化为脂肪、骨、软骨、神经、内皮等多种组织细胞，连续传代培养和冷冻保存后仍具有多向分化潜能，可作为理想的种子细胞用于衰老和病变引起的组织器官损伤修复。美国临床试验数据库ClinicalTrials数据显示，目前与间充质干细胞相关的临床试验已涉及300多种疾病，单是在美国开展的与间充质干细胞相关的临床试验就达到了650多件，主要的疾病包括骨损伤、神经退行性疾病、糖尿病、心肌缺血、重症肌无力和肝损伤等。干细胞制剂制备所用的培养基成分除了要遵循《干细胞制剂质量控制及临床前研究指导原则》所制定的“应有足够的纯度并符合无菌、无致病微生物及内毒素的质量标准，残留的培养基对受者应无不良影响”的标准外，还要保证其“干性”、增殖及分化能力。但是干细胞作为特殊的药物，在临床前的安全性评价，特别是致敏性方面的评价缺乏评价指标和相应的技术手段。有鉴于此，特提出本专利技术。
技术实现思路
本专利技术的第一目的在于提供一种间充质干细胞制剂致敏性的评价方法，缓解了现有技术中缺乏一种有效地对间充质干细胞制剂的致敏性的评价方法。本专利技术的第二目的在于提供间充质干细胞制剂致敏性的评价方法在制备包含间充质干细胞的药物中的应用。为解决上述技术问题，本专利技术特采用如下技术方案：本专利技术提供了一种间充质干细胞制剂致敏性的评价方法，包括使用所述间充质干细胞制剂免疫动物，然后按照免疫后的动物的症状将所述间充质干细胞制剂的致敏性划分为预设的等级；所述经间充质干细胞制剂免疫的动物包括低剂量组和高剂量组；所述间充质干细胞制剂免疫动物包括诱导阶段和激发阶段；所述低剂量组在致敏阶段和激发阶段的给药剂量分别独立的为所述动物的等效临床给药剂量的0.2～0.3倍，给药浓度为所述动物的等效临床给药浓度的0.8～1.2倍；所述高剂量组在致敏阶段的给药剂量为所述动物的等效临床给药剂量的0.8～1.2倍，给药浓度为所述动物的等效临床给药浓度的4～4.5倍；所述高剂量组在激发阶段的给药剂量为所述动物的等效临床给药剂量的0.8～1.2倍，给药浓度为所述动物的等效临床给药浓度的3～3.5倍。优选地，所述预设的等级包括过敏反应阴性、过敏反应弱阳性、过敏反应阳性、过敏反应强阳性和过敏反应极强阳性；其中，所述过敏反应阴性为所述动物无不良症状；所述过敏反应弱阳性包括如下症状：不安宁、竖毛、发抖和搔鼻中的一种或多种；所述过敏反应阳性包括如下症状：喷嚏、咳嗽、呼吸急促、排尿、排粪、流泪中的一种或多种；所述过敏反应强阳性包括如下症状：呼吸困难、哮鸣音、紫癜、步态不稳、跳跃、喘息、痉挛、旋转和潮式呼吸中的一种或多种；所述过敏反应极强阳性包括如下症状：死亡。优选地，所述评价方法还包括设置阴性对照组和阳性对照组。优选地，所述动物包括小鼠、大鼠、豚鼠、兔、犬、小型猪、猴、雪貂、土拨鼠和裸鼹鼠中的一种或者多种；优选地，所述动物包括小鼠、大鼠和豚鼠中的一种或者多种。优选地，所述人间充质干细胞制剂免疫的动物为豚鼠。优选地，所述低剂量组在致敏阶段和激发阶段的给药剂量分别独立的为1×106～2×106cells/kg；给药浓度分别独立的为6×105～7×105cells/mL；优选地，所述低剂量组在致敏阶段和激发阶段的给药剂量分别独立的为1.3×106cells/kg，给药浓度分别独立的为6.5×105cells/mL。优选地，所述高剂量组在致敏阶段和激发阶段的给药剂量分别独立的为4.5×106～5.5×106cells/kg；给药浓度分别独立的为1.5×106～3×106cells/mL；优选地，所述高剂量组在致敏阶段的给药剂量为5.2×106，给药浓度为2.6×106；优选地，所述高剂量组在激发阶段的给药剂量为5.2×106，给药浓度为2×106。优选地，设置阴性对照组和阳性对照组；所述阴性对照组包括经生理盐水免疫的豚鼠；所述阳性对照组包括经卵清白蛋白溶液免疫的豚鼠；优选地，致敏阶段腹腔给药，激发阶段静脉给药；优选地，自腹腔给药致敏3次，隔日一次；末次致敏后第14天和21天，分别于豚鼠静脉给药，对每组半数数量的动物进行激发。本专利技术还提供了上述间充质干细胞制剂致敏性的评价方法在制备包含间充质干细胞的药物中的应用；优选地，所述药物包括人脐带间充质干细胞。与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：专利技术提供了一种间充质干细胞制剂致敏性的评价方法，一方面该方法使用两种免疫剂量的间充质干细胞制剂分别免疫动物，以降低单一剂量免疫动物造成的由于剂量不合适而结果不准确的风险，同时还可以得出间充质干细胞制剂的致敏性与剂量的关系；另一方面，本专利技术提供了低剂量和高剂量下的合理的药物用量，避免了由于给药量不合理导致的评价结果不准确的问题。该评价方法能够提供间充质干细胞制剂的安全性资料，为临床安全用药提供参考。基于上述专利技术构思，本专利技术还提供了间充质干细胞制剂致敏性的评价方法在制备包含间充质干细胞的药物中的应用，以协助间充质干细胞作为活性成分或者辅助成分的药物的开发。具体实施方式下面将结合实施例对本专利技术的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。本专利技术中，如果没有特别的说明，本文所提到的所有实施方式以及优选实施方法可以相互组合形成新的技术方案。本专利技术中，如果没有特别的说明，本文所提到的所有技术特征以及优选特征可以相互组合形成新的技术方案。本专利技术中，如果没有特别的说明，百分数(％)或者份指的是相对于组合物的重量百分数或重量份。本专利技术中，如果没有特别的说明，所涉及的各组分或其优选组分可以相互组合形成新的技术方案。本专利技术中，除非有其他说明，数值范围“a～b”表示a到b之间的任意实数组合的缩略表示，其中a和b都是实数。例如数值范围“6～22”表示本文中已经全部列出了“6～22”之间的全部实数，“6～22”只是这些数值组合的缩略表示。本专利技术所公开的“范围”以下限和上限的形式，可以分别为一个或多个下限，和一个或多个上限。本专利技术中，除非另有说明，各个反应或操作步骤可以顺序进行，也可以按照顺序进行。优选地，本文中的反应方法是顺序进行的。本专利技术提供了一种间充质干细胞制剂致敏性的评价方法，该方法包括使用所述间充质干细胞制剂免疫动物，然后按照免疫后的动物的症状将所述间充质干细胞制剂的致敏性划分为预设的等级；所述经间充质干细胞制剂免疫的动物包括低剂量组和高剂量组；所述间充质干细胞制剂免疫动物包括诱导阶段和激发阶段。其中，所述低剂量组在致敏阶段和激发阶段的给药剂量分别独立的为临床给药剂量的0.2～0.3倍，例如可以为但不限于为0.21倍、0.22倍、0.2本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种间充质干细胞制剂致敏性的评价方法，其特征在于，包括使用所述间充质干细胞制剂免疫动物，然后按照免疫后的动物的症状将所述间充质干细胞制剂的致敏性划分为预设的等级；所述经间充质干细胞制剂免疫的动物包括低剂量组和高剂量组；所述间充质干细胞制剂免疫动物包括诱导阶段和激发阶段；其中，所述低剂量组在致敏阶段和激发阶段的给药剂量分别独立的为所述动物的等效临床给药剂量的0.2～0.3倍，给药浓度为所述动物的等效临床给药浓度的0.8～1.2倍；所述高剂量组在致敏阶段的给药剂量为所述动物的等效临床给药剂量的0.8～1.2倍，给药浓度为所述动物的等效临床给药浓度的4～4.5倍；所述高剂量组在激发阶段的给药剂量为所述动物的等效临床给药剂量的0.8～1.2倍，给药浓度为所述动物的等效临床给药浓度的3～3.5倍。

【技术特征摘要】
1.一种间充质干细胞制剂致敏性的评价方法，其特征在于，包括使用所述间充质干细胞制剂免疫动物，然后按照免疫后的动物的症状将所述间充质干细胞制剂的致敏性划分为预设的等级；所述经间充质干细胞制剂免疫的动物包括低剂量组和高剂量组；所述间充质干细胞制剂免疫动物包括诱导阶段和激发阶段；其中，所述低剂量组在致敏阶段和激发阶段的给药剂量分别独立的为所述动物的等效临床给药剂量的0.2～0.3倍，给药浓度为所述动物的等效临床给药浓度的0.8～1.2倍；所述高剂量组在致敏阶段的给药剂量为所述动物的等效临床给药剂量的0.8～1.2倍，给药浓度为所述动物的等效临床给药浓度的4～4.5倍；所述高剂量组在激发阶段的给药剂量为所述动物的等效临床给药剂量的0.8～1.2倍，给药浓度为所述动物的等效临床给药浓度的3～3.5倍。2.根据权利要求1所述的评价方法，其特征在于，所述预设的等级包括过敏反应阴性、过敏反应弱阳性、过敏反应阳性、过敏反应强阳性和过敏反应极强阳性；其中，所述过敏反应阴性为所述动物无不良症状；所述过敏反应弱阳性包括如下症状：不安宁、竖毛、发抖和搔鼻中的一种或多种；所述过敏反应阳性包括如下症状：喷嚏、咳嗽、呼吸急促、排尿、排粪、流泪中的一种或多种；所述过敏反应强阳性包括如下症状：呼吸困难、哮鸣音、紫癜、步态不稳、跳跃、喘息、痉挛、旋转和潮式呼吸中的一种或多种；所述过敏反应极强阳性包括如下症状：死亡。3.根据权利要求1所述的评价方法，其特征在于，所述评价方法还包括设置阴性对照组和阳性对照组。4.根据权利要求1-3中任一项所述的评价方法，其特征在于，所述动物包括小鼠、大鼠、豚鼠、兔、犬、小型猪、猴、雪貂、土...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐永胜，牟春琳，杨莹，李伟，
申请(专利权)人：天津长和生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：天津,12