赤芝孢子油和/或含有赤芝孢子油的药物组合物的新用途制造技术

本发明专利技术公开了赤芝孢子油和/或含有赤芝孢子油的药物组合物在制备具有预防主动脉瓣膜病致心肌纤维化功效的功能性食品和药品中的应用，本发明专利技术首次公开了赤芝孢子油和/或含有赤芝孢子油的药物组合物在预防主动脉瓣膜病致心肌纤维化方面的新用途，为预防主动脉瓣膜病致心肌纤维化提供了一种新的方法，采用本发明专利技术中的优选方法制备的赤芝孢子油及由该赤芝孢子油制成的药物，可以有效预防纤维化、具有抗心室重构、抗心衰的效果。

【技术实现步骤摘要】
赤芝孢子油和/或含有赤芝孢子油的药物组合物的新用途
本专利技术属于灵芝孢子油
，具体涉及赤芝孢子油和/或含有赤芝孢子油的药物组合物在制备具有预防主动脉瓣膜病致心肌纤维化功效的功能性食品和药品中的应用。
技术介绍
心肌纤维化由高血压、动脉粥样硬化、瓣膜病、高血脂、房颤等疾病诱发，疾病机制涉及肌成纤维细胞活化、胶原浓度升高、胞外基质过量沉积、糖脂代谢异常等。心肌纤维化最终转归为心脏重构、收缩舒张功能障碍和心衰。作为一种进展性的疾病，早期预防具有重要意义，但是目前心肌纤维化无可靠的预防方法。在心肌纤维化预防药物的创新研发上，基于其诱因多样、机制复杂，需要我们首先针对特定诱因，精准评价药物作用的机制。本专利技术的药物是针对预防“主动脉瓣膜病致心肌纤维化”，并从多重机制上证明了药物的预防效果。主动脉瓣膜病变发生后，心脏因滞留过量血液而过负荷，最终发展为心肌纤维化。主动脉瓣膜病变是仅次于高血压和冠心病的第三常见的心血管疾病。美国统计的主动脉瓣膜病在老年人中的发病率高达2.5％，我国根据部分地区推测的发病率则高于美国。由于我国将进入老龄化社会，预计各类心血管疾病发病率将持续增加，成为我国的重大公共卫生问题，因此早期预防策略的创新发展具有重大意义。灵芝有效成分的获取可通过水提法、醇提法、超临界二氧化碳萃取法等，获取的有效成分包括灵芝多糖、灵芝三萜/甾醇、脂肪酸。有研究表明灵芝提取物可治疗心肌纤维化，但是未见灵芝提取物(特别是油性成分)在预防心肌纤维化上，尤其是“主动脉瓣膜病致心肌纤维化”的应用。目前录入药典的灵芝品种为赤芝和紫芝，对两种品系的差异性分析中，有研究表明赤芝比紫芝在降低甘油三酯方面更有优势，由于我国高血脂的患病率不断增加，因此使用赤芝更具有有临床应用价值。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供赤芝孢子油和/或含有赤芝孢子油的药物组合物在制备具有预防主动脉瓣膜病致心肌纤维化功效的功能性食品和药品中的应用。本专利技术的上述目的是通过以下技术方案来实现的：赤芝孢子油和/或含有赤芝孢子油的药物组合物在制备具有预防主动脉瓣膜病致心肌纤维化功效的功能性食品和药品中的应用。作为本专利技术的一种优选的技术方案，本专利技术所述的赤芝孢子油通过以下方法制备获得：(1)选取赤芝孢子粉，进行超声，将超声后的灵芝孢子粉采用液氮冷冻多次后复温，然后加入中性蛋白酶酶解，酶解后再经包括灭酶、中和、过滤和烘干处理，得预处理赤芝孢子粉；(2)将预处理赤芝孢子粉采用二氧化碳进行超临界萃取，得赤芝孢子油。在该赤芝孢子油的制备方法中：优选的，步骤(1)中将超声后的灵芝孢子粉采用液氮冷冻2～4次后，在28～32℃复温。更佳的，步骤(1)中将超声后的灵芝孢子粉采用液氮冷冻3次后，在30℃复温。优选的，步骤(1)中中性蛋白酶的加入量为1800～2200U/g，酶解时温度为48～52℃，酶解时间为50～70min，pH值为7.2～7.6。更佳的，步骤(1)中中性蛋白酶的加入量为2000U/g，酶解时温度为50℃，酶解时间为60min，pH值为7.4.步骤(1)中中和采用氢氧化钾，烘干温度为45～55℃，烘干时间为8～12h。更佳的，步骤(1)中中和采用氢氧化钾，烘干温度为50℃，烘干时间为10h。优选的，步骤(2)采用二氧化碳进行超临界萃取时，萃取压力为14～16Mpa，温度为38～42℃，时间为1.5～2.5h；分离压力为5～7Mpa，温度为28～32℃。更佳的，步骤(2)采用二氧化碳进行超临界萃取时，萃取压力为15Mpa、温度为40℃、时间2h；分离压力为6Mpa，温度30℃。优选的，通过采用二氧化碳进行超临界萃取，获得的是含有赤芝孢子油的提取物，在该提取物中，赤芝孢子油的质量百分含量为24～30％。本专利技术获得的赤芝孢子油中包括灵芝总三萜和脂肪酸，所述灵芝总三萜占赤芝孢子油总质量的17～19％，所述脂肪酸占赤芝孢子油总质量的73～75％，所述脂肪酸包括油酸、棕榈酸和亚油酸，其中油酸、棕榈酸和亚油酸占脂肪酸总质量的60～63％、15～16％和12～14％。更佳的，步骤(2)中所述赤芝孢子油占提取物总质量的27％，所述赤芝孢子油中包括灵芝总三萜和脂肪酸，所述灵芝总三萜占赤芝孢子油总质量的18.7％，所述脂肪酸占赤芝孢子油总质量的73～75％，所述的脂肪酸包括油酸、棕榈酸和亚油酸，其中油酸、棕榈酸和亚油酸占脂肪酸总质量分别为61.5％、15.6％和13.3％。本专利技术中的含有赤芝孢子油的药物组合物，是具有预防主动脉瓣膜病致心肌纤维化功效的药物组合物，优选的，本专利技术所述含有赤芝孢子油的药物组合物包括赤芝孢子油和辅料。优选的，所述辅料为药学领域所采用的常规辅料。优选的，本专利技术所述含有赤芝孢子油的药物组合物的剂型为乳剂或软胶囊剂。本专利技术具有如下优点：本专利技术首次公开了赤芝孢子油和/或含有赤芝孢子油的药物组合物在预防“主动脉瓣膜病致心肌纤维化”方面的新用途，为预防“主动脉瓣膜病致心肌纤维化”提供了一种新的方法，采用本专利技术中的优选方法制备的赤芝孢子油及由该赤芝孢子油制成的药物，可以有效预防“主动脉瓣膜病致心肌纤维化”、具有抗心室重构、抗心衰的效果。附图说明图1是实施例2中抗纤维化药物和赤芝孢子油给药时间表；图2是实施例2中小鼠左心室横切面Masson三色染色结果；图3是实施例2中各组小鼠超声检测结果；图4是实施例2中赤芝孢子油预防显著降低血清中胞外基质的含量；图5是实施例2中各组小鼠心脏组织超氧化物歧化酶SOD、MDA和GSH检测结果。具体实施方式以下对本专利技术的优选实施例进行说明，应当理解，此处所描述的优选实施例仅用于说明和解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。实施例1本实施例提供的赤芝孢子油的提取方法，包括以下步骤：(1)取市售赤芝孢子粉1000克，进行超声，把超声后的灵芝孢子粉混合后采用液氮冷冻3次，30℃复温，随后中性蛋白酶酶50℃，pH7.4，1小时酶解，酶解后酸性灭活酶后使用氢氧化钾中和。(2)孢子粉过滤、50℃10小时烘干后，置于萃取釜中，使用二氧化碳超临界萃取，设定条件为：①萃取压力为15Mpa、温度为40℃、时间2小时；②分离压力为6Mpa，温度30℃；③CO2速度为20L/h。采用GC-MS方法测定赤芝孢子油，赤芝孢子油占提取物总质量的质量百分含量为27％，赤芝孢子油中包括灵芝总三萜和脂肪酸，灵芝总三萜占赤芝孢子油总质量的18.7％，脂肪酸占赤芝孢子油总质量的74％，脂肪酸包括油酸、棕榈酸和亚油酸，其中油酸、棕榈酸和亚油酸占脂肪酸总质量分别为61.5％、15.6％和13.3％。实施例2以下通过实验来验证赤芝孢子油在预防“主动脉瓣膜病致心肌纤维化”方面的功效。1、实验动物48只4周龄断奶后C57小鼠饲养于广东实验动物监测所SPF级设施，设施内恒温恒湿，动物每天给予12小时光照，自动采食饮水。实验于AAALAC认证的设施内开展。2、实验材料(1)赤芝孢子油：按实施例1制备，4℃保存备用。(2)超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)检测试剂盒：购自南京建成生物工程研究所；(3)HA和LN检测试剂盒：购自上海海研医学生物技术有限公司；(4)其他常规耗材：异氟烷、4-0带线缝合针、2-0带线缝合针、苏木素、乙醇、二甲苯等。3、实验方法(1)“主动脉瓣本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.赤芝孢子油和/或含有赤芝孢子油的药物组合物在制备具有预防主动脉瓣膜病致心肌纤维化功效的功能性食品和药品中的应用。

【技术特征摘要】
1.赤芝孢子油和/或含有赤芝孢子油的药物组合物在制备具有预防主动脉瓣膜病致心肌纤维化功效的功能性食品和药品中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征是：所述的赤芝孢子油通过以下方法制备获得：(1)选取赤芝孢子粉，进行超声，将超声后的灵芝孢子粉采用液氮冷冻多次后复温，然后加入中性蛋白酶酶解，酶解后再经包括灭酶、中和、过滤和烘干处理，得到预处理赤芝孢子粉；(2)将预处理赤芝孢子粉采用二氧化碳进行超临界萃取，得到赤芝孢子油。3.根据权利要求2所述的应用，其特征是：步骤(1)中将超声后的灵芝孢子粉采用液氮冷冻2～4次后，在28～32℃复温。4.根据权利要求2所述的应用，其特征是：步骤(1)中的中性蛋白酶的加入量为1800～2200U/g，酶解时温度为48～52℃，酶解时间为50～70min，pH值为7.2～7.6。5.根据权利要求2所述的应用，其特征是：步骤(1)中的中和采用...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨丰华，黄韧，谭伟江，王静，李想，黎冰林，唐林志，郑双，陈丽君，任学聪，张梦雅，叶永才，
申请(专利权)人：广东省实验动物监测所，广东仁源生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44