The invention relates to the technical field of cell separation and culture, in particular to a blood-derived endometrial cell separation and culture method. The method includes: separating blood clots and endometrial tissues by blood filtration, and culturing endometrial cells directly with filtrate; centrifuging the filtrate residue once or more after digestion with collagenase until there is no obvious turbidity in the supernatant, discarding the supernatant, and culturing the precipitation obtained by centrifugation to obtain endometrial cells. The method provided by the invention combines the menstrual cup as a female daily necessities with medical research, simplifies the process of endometrial cell culture, and can obtain the biological samples of endometrial cells more conveniently, so as to better carry out clinical research and application.
【技术实现步骤摘要】
经血源子宫内膜细胞分离培养方法
本专利技术涉及细胞分离培养
,具体而言,涉及一种经血源子宫内膜细胞分离培养方法。
技术介绍
子宫内膜作为性激素作用的靶器官,通过子宫内膜细胞进行体外培养,观察子宫内膜对激素、各类药物细胞因子的作用,在妇产科疾病的研究中占有重要的地位。目前供临床研究所用的子宫内膜原代细胞的培养多来源于诊断性刮宫的内膜标本。此项手术操作需要有资质的妇科医生、在医院手术室进行并留取。步骤如下:1.月经干净后一周内来医院,预约手术;2.到手术室操作,刮取内膜组织;3.组织放冰桶送实验室;4.组织剪碎后消化;5.离心、培养、传代。从上述步骤能够推断,通过诊刮手术刮取内膜的过程存在以下缺点:1.程序繁杂:需要来医院两次以上,需医生手术操作,对医护人员数量、资质均有要求;2.有创伤、有风险:手术增加患者的痛苦、恐惧与损伤,存在各种术中术后并发症的风险,如宫颈的损伤、子宫穿孔、感染、内膜损伤的修复、增加阴道出血量等;3.组织标本混杂成分增加:由于诊刮手术者和患者内膜厚度的个体差异导致诊刮刮取的内膜厚度无法形成同一性,在内膜组织中既有功能层内膜、也有基底层内膜、甚至还有子宫肌层的非内膜组织,为研究增加了人为的混杂因素;4.患者依从性、操作可重复性差:由于以上原因无法多次刮取取得更多的内膜组织。因而,若能够提供一种创伤小、操作简便、分离纯度高的子宫内膜细胞分离培养方法将大大降低子宫内膜细胞的获取难度。有鉴于此,特提出本专利技术。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种经血源子宫内膜细胞分离培养方法,该方法易于操作,将作为女性废弃的月经血用来疾病和自身内环 ...
【技术保护点】
1.一种经血源子宫内膜细胞分离培养方法,其特征在于,包括:将经血过滤以分离出血块及内膜组织,滤液直接进行细胞培养得到子宫内膜细胞;所得滤渣用胶原酶消化后离心一次或多次直至上清无明显浑浊,弃去上清,对离心所得沉淀进行培养得到子宫内膜细胞。
【技术特征摘要】
1.一种经血源子宫内膜细胞分离培养方法,其特征在于,包括:将经血过滤以分离出血块及内膜组织,滤液直接进行细胞培养得到子宫内膜细胞;所得滤渣用胶原酶消化后离心一次或多次直至上清无明显浑浊,弃去上清,对离心所得沉淀进行培养得到子宫内膜细胞。2.根据权利要求1所述的经血源子宫内膜细胞分离培养方法,其特征在于,所述经血使用月经杯收集得到。3.根据权利要求1所述的经血源子宫内膜细胞分离培养方法,其特征在于,将经血过滤之前经过稀释,经血与稀释液的体积比为1:(0.5~1.5)。4.根据权利要求3所述的经血源子宫内膜细胞分离培养方法,其特征在于,所述过滤具体为用90~110μm的滤网过滤。5.根据权利要求3所述的经血源子宫内膜细胞分离培养方法,其特征在于,所述稀释液的成分包含0.8~1.2%青霉素和链霉素。6.根据权利要求1所述的经血源子宫内膜细胞分离培养方法,其特征在...
【专利技术属性】
技术研发人员:舒珊,
申请(专利权)人:中国医学科学院北京协和医院,
类型:发明
国别省市:北京,11
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