一种杏黄兜兰的无性繁殖方法技术

本发明专利技术属于植物组织培养技术领域，尤其是一种杏黄兜兰的无性繁殖方法。一种杏黄兜兰的无性繁殖方法，包括如下步骤：(1)外植体的获得和处理；(2)外植体采集；(3)外植体表面消毒；(4)诱导培养；(5)丛生芽诱导；(6)增殖培养；(7)壮苗生根培养；(8)试管苗移栽。与已有技术相比，本发明专利技术方法具有外植体取材简便、易得、量大、不破坏母株，组培流程简单可行，成苗周期短，产品一致性高，整体品质标准可控等优点，是实现杏黄兜兰商品化生产的一种简便、快速、有效的繁殖方法。

A Method of Asexual Propagation of Aristolochia apricota

The invention belongs to the technical field of plant tissue culture, in particular to the asexual propagation method of Aristolochia apricota. A method for asexual propagation of Aristolochia apricota includes the following steps: (1) acquisition and treatment of explants; (2) collection of explants; (3) surface disinfection of explants; (4) induction culture; (5) induction of cluster buds; (6) proliferation culture; (7) rooting culture of strong seedlings; (8) transplantation of test-tube seedlings. Compared with the existing technology, the method has the advantages of simple explant extraction, easy availability, large quantity, no damage to the mother plant, simple and feasible tissue culture process, short seedling growth period, high product consistency, controllable overall quality standards, etc., and is a simple, fast and effective reproduction method for realizing commercialized production of Aristolochia apricota.

【技术实现步骤摘要】
一种杏黄兜兰的无性繁殖方法
本专利技术属于植物组织培养
，尤其是一种杏黄兜兰的无性繁殖方法。
技术介绍
兜兰属隶属于兰科杓兰亚科(Cypripedioideae)，以花形奇特、花色丰富、艳丽，花期长著称，观赏价值和经济价值极高。杏黄兜兰是兜兰属中罕见的纯黄色花种类，是兜兰属最具观赏价值的种类之一，曾多次获国际金奖，和硬叶兜兰并称兜兰中的“金童玉女”。然而，由于巨大的市场价值，以及自然生境遭到破坏，近年来杏黄兜兰野生资源已经濒临灭绝，而市场的需求与日俱增，因此，杏黄兜兰的人工快速繁育及产业化栽培生产已经迫在眉睫。目前，兜兰属植物规模化生产发展较慢。究其原因，兜兰是一种原始的兰科植物，受其生物学特性的影响，兜兰尤其是原生种的组培苗增殖速度过慢，生长周期长，不易建立可控的组培技术体系，生产力低下。首先，无性繁殖困难，由于杏黄兜兰等大多数兜兰叶基生于短茎，外植体选择较难，外植体消毒十分困难，而且母株个体稀少，因此，多年来，常规的以茎尖作为外植体的无性繁殖成功率极低，且易浪费整株母株；再次，类似于其他兜兰生产，现有技术仍以有性繁殖手段繁育杏黄兜兰组培苗。然而，杏黄兜兰不仅种子萌发十分困难本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种杏黄兜兰的无性繁殖方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)外植体的获得和处理：在10月份时，选择生长旺盛的杏黄兜兰植株为母株，移入温室中培养，诱导走茎分蘖生长；移栽前用800倍的高锰酸钾溶液对杏黄兜兰母株整株浸泡消毒3min，将栽培基质装入栽培容器中；种植时根部深埋，露出茎基部；温室保持日温28℃，夜温18℃，湿度60‑65％，遮阴度50‑60％，隔7‑10d浇1次无菌水；(2)外植体采集：5‑6个月后，待杏黄兜兰植株分蘖生长出3‑5条走茎时即可作为外植体备用材料；从花盆里取出整株杏黄兜兰，选择长8‑10cm、直径3‑4mm的走茎10条，要求走茎生长健壮，苞片粉白色且紧密贴合茎段；将选好...

【技术特征摘要】
1.一种杏黄兜兰的无性繁殖方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)外植体的获得和处理：在10月份时，选择生长旺盛的杏黄兜兰植株为母株，移入温室中培养，诱导走茎分蘖生长；移栽前用800倍的高锰酸钾溶液对杏黄兜兰母株整株浸泡消毒3min，将栽培基质装入栽培容器中；种植时根部深埋，露出茎基部；温室保持日温28℃，夜温18℃，湿度60-65％，遮阴度50-60％，隔7-10d浇1次无菌水；(2)外植体采集：5-6个月后，待杏黄兜兰植株分蘖生长出3-5条走茎时即可作为外植体备用材料；从花盆里取出整株杏黄兜兰，选择长8-10cm、直径3-4mm的走茎10条，要求走茎生长健壮，苞片粉白色且紧密贴合茎段；将选好的走茎在流水下冲洗60min，之后取出，用软毛刷蘸取质量分数为0.1％的洗洁精溶液清洗5min，清理干净走茎表面污物后，选取顶端幼嫩的3-4个节段作为外植体；(3)外植体表面消毒：在超净工作台上，将选取好的外植体置入75％的酒精中浸泡30s，无菌水漂洗2-3次后取出，在无菌培养皿中，用无菌滤纸吸干走茎表面的水分，然后在走茎的单个节间上，用手术刀以“T”字形划割法，环切去除该节段上苞片的3/4，该条走茎的每个节间依次处理完成后，置入0.1％的升汞中消毒1min，用灭菌后的镊子取出，置入无菌水中漂洗3-4次，用无菌滤纸吸干走茎表面的水分，再用同样的环切方法去除节间上剩余的1/4苞片，环割时勿划伤节处具隐芽的区域，之后将外植体再次置入0.1％的升汞中消毒40s，取出后置入无菌水中漂洗3-4次；(4)诱导培养：在无菌培养皿上，用无菌滤纸吸干外植体表面的水分，切除走茎接触消毒液的一端4-5mm，然后将走茎切段，要求每段保留1个节，节上部保留1/3节段，下部保留2/3节段，将切割好的单个茎段下部1/2部分竖直插入诱导培养基表面，拧紧瓶盖，置入温度25℃培养室避光培养60d；(5)丛生芽诱导：待步骤(4)诱导的杏黄兜兰侧芽长至1-2cm长时，将侧芽切下，转接入丛生芽诱导培养基中，然后置入日温25℃，夜温15℃的培养室继续培养45d，每天光照12h，光照强度1000lx；(6)增殖培养：将步骤(5)诱导的杏黄兜兰丛生芽去除黄叶，清理干净根部附着的培养基，2-3株/丛转接入增殖培养基中，光照培养45d；培养温度25℃，每天光照12h，光照强度1000lx；(7)壮苗生根培养：将步骤(6)增殖的幼芽以2株/丛转接入壮苗生根培养基中光照培养90d；培养温度25℃，每天光照12h，...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈宝玲，龚建英，唐庆，王华新，林茂，陈尔，唐遒冥，孙利娜，苏莉花，龙定建，
申请(专利权)人：广西壮族自治区林业科学研究院，
类型：发明
国别省市：广西,45