一种微米管传感器及其制备方法与应用技术

本发明专利技术涉及miRNAs检测分析技术领域，尤其涉及一种微米管传感器及其制备方法与应用。本发明专利技术提供了一种微米管传感器及用于检测单碱基突变的miRNA的探针组，本发明专利技术还提供了检测单碱基突变的方法，该方法基于目标分子催化hairpin探针自组装，形成双链结构，通过toehold取代微米管上杂交的BHQ3，从而使微米管端头光波导由淬灭转而恢复，并且在竞争探针的作用下，对近似miRNA进行区分的一种方法。随着反应循环进行，低浓度的目标分子就可产生高的信号，而被抑制的单碱基变异的非目标分子产生极低的信号，从而实现在血清环境中检测的目标。

A Microtube Sensor and Its Preparation Method and Application

The invention relates to the field of detection and analysis technology of microRNAs, in particular to a microtube sensor, a preparation method and application thereof. The invention provides a microtube sensor and a probe group for detecting single base mutation of microRNA. The invention also provides a method for detecting single base mutation. The method is based on self-assembly of hairpin probe catalyzed by target molecule to form a double-chain structure. The BHQ3 hybridized on microtube is replaced by toehold, so that the optical waveguide at the end of microtube can be recovered from quenching and competition. A method of differentiating approximate microRNAs by probes. As the reaction cycle proceeds, the target molecule with low concentration can produce high signal, while the non-target molecule with inhibited single base mutation can produce very low signal, thus achieving the target of detection in serum environment.

【技术实现步骤摘要】
一种微米管传感器及其制备方法与应用
本专利技术涉及miRNAs检测分析
，尤其涉及一种微米管传感器及其制备方法与应用。
技术介绍
MicroRNAs(miRNAs)是一类由18-24个碱基组成的非编码单链小分子RNA，在转录后水平对基因表达发挥负调控作用，参与细胞生长、发育、凋亡等重要生物过程。最近的一些医学研究表明，miRNA的表达水平，或增大或减少，都在某种程度上与人类重大疾病如癌症等有着密不可分的联系。这使得miRNA可以作为肿瘤标记物来早期地监控癌症的发生。单碱基突变是指DNA或RNA中的一种核酸被另外一种核酸替换的变异，也包括单碱基对的插入和缺失。单碱基突变检测对许多疾病的早期诊断及预防都有重要意义。目前发展出了许多检测单碱基突变的方法，比如纳米孔测序法，酶标记法，微阵列芯片技术，实时荧光定量PCR法，电化学方法，比色分析法等。这些方法都具有一定的局限性，比如无法区分序列差异很小的miRNA，操作复杂，重复性低，消耗大量原料，检测灵敏度低，价格昂贵等缺点，限制了其在临床诊断方面的潜在应用。荧光检测方法，由于其灵敏度高、重复性好、安全无毒等优点吸引越来越多的目光。然而目本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种微米管传感器，其为修饰淬灭基团的聚二乙炔微米管；所述淬灭基团通过两条互补的ssDNA修饰在所述聚二乙炔微米管上。

【技术特征摘要】
1.一种微米管传感器，其为修饰淬灭基团的聚二乙炔微米管；所述淬灭基团通过两条互补的ssDNA修饰在所述聚二乙炔微米管上。2.根据权利要求1所述的微米管传感器，其特征在于，所述淬灭基团为BHQ3；所述互补ssDNA的序列分别如SEQIDNO:1、SEQIDNO:2所示。3.权利要求1或2所述微米管传感器的制备方法，包括：将聚二乙炔微米管与乙二醇二缩水甘油醚反应，获得环氧修饰的聚二乙炔微米管；将环氧修饰的聚二乙炔微米管与5’端修饰氨基的ssDNA1反应，获得ssDNA1修饰的微米管；将ssDNA1修饰的微米管与3’端修饰淬灭基团的ssDNA2反应，获得微米管传感器。4.一种探针组，其包括发夹探针H1和发夹探针H2；所述发夹探针H1自5’端至3’端依次为：H1-1序列、H1-2序列、H1-3序列、H1-4序列；所述H1-1序列与目标序列互补；所述H1-2序列不与目标序列一致或互补，为探针的环结构；所述H1-3序列与H1-1互补，形成探针的茎结构；所述H1-4序列与ssDNA2序列一致；所述发夹探针H2自5’端至3’端依次为：H2-1序列、H2-2序列、H2-3序列、H2-4序列；所述H2-1序列为粘性末端序列；所述H2-2序列与H1-2序列互补；所述H2-3序列与H1-3一致，为探针的环结构；所述H2-4序列与H2-2互补，形成探针的茎结构。5.根据权利要求4所述的探针组，其还包括至少一对竞争探针：发夹探针H1’及发夹探针H2’；所述发夹探针H1’自5’端至3’端依次为：H1’-1序列、H1’-2序列、H1’-3序列；所述H1’-1序列与非目标序列互补；所述H1’-2列不与非目标序列一致或互补，为探针的环结构；所述H1’-3序列与H1’-1互补，形成探针的茎结构；所述发夹探针H2’自5’端至3’端依次为：H2’-1序列、H2’-2序列、H2’-3序列、H2’-4序列；所述H2’-1序列为粘性末端序列；所述H2’-2...

【专利技术属性】
技术研发人员：邹纲，刘福宁，
申请(专利权)人：中国科学技术大学，
类型：发明
国别省市：安徽,34