The invention provides a porcine circovirus type 3 strain PCV3*LY and its application. The virus was the first porcine circovirus type 3 rescued by infectious cloning technology at home and abroad. After inoculation of PK15 cells cultured on adherent monolayer pig kidney cells, D glucosamine was cultured and then cultured. The cell culture was harvested as the next round of inoculation, and a series of cell culture adapted strains were sequenced successively. In the process of adaptation, obvious cytopathic changes can be observed after 15 generations. Indirect immunofluorescence showed that the cells could support the effective replication of porcine circovirus type 3. Virus titer lgTCID50 = 10
【技术实现步骤摘要】
一种猪圆环病毒3型毒株及其制备方法和应用
本专利技术属于生物
，具体涉及一种猪圆环病毒3型毒株、其制备方法及应用。
技术介绍
猪圆环病毒(Porcinecircovirus，PCV)属于圆环病毒科(Circoviridae)圆环病毒属(Circovirus)成员。猪圆环病毒颗粒为二十面体对称、无囊膜包裹的、单股环状DNA病毒。在电镜下，猪圆环病毒是一种无囊膜的呈二十面体对称的圆形小颗粒病毒，直径17nm，具有单股环状的DNA基因组。猪圆环病毒对氯仿、碘酒、酒精等有机溶剂不敏感，可在70℃稳定存活15分钟，但对苯酚、季胺类化合物、氢氧化钠和氧化剂等试剂较敏感。2016年前根据致病性、抗原性和核酸序列的差异，将PCV分为PCV1和PCV2。PCV1于1974年由德国学者Tischer等首次从污染的猪肾传代细胞系PK15分离获得，通过人工感染猪试验证实，该病毒没有引起显著临床症状和病理变。PCV2于1998年首次报道，发现其是断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的主要病原。PMWS在临床上以断奶仔猪呼吸急促、腹泻、贫血、间质性肺炎和进行性消瘦以及明显的淋巴结病变为...
【技术保护点】
1.一种猪圆环病毒3型毒株，其特征在于，其含有包括如SEQ ID NO.1所示的碱基序列。
【技术特征摘要】
1.一种猪圆环病毒3型毒株，其特征在于，其含有包括如SEQIDNO.1所示的碱基序列。2.一种包含有如SEQIDNO.1所示的碱基序列的重组质粒。3.如权利要求2所述的重组质粒，其特征在于，所述重组质粒的原始载体为质粒pBluescriptIISK载体，其碱基序列如SEQIDNO.2所示。4.如权利要求2所述的重组质粒，其特征在于，所述重组质粒适于在单层猪肾细胞PK15细胞中生长。5.一种猪圆环病毒3型毒株的制备方法，其特征在于，其包括如下步骤：S1、将权利要求2所述的重组质粒，转染单层猪肾细胞PK15细胞中培养，之后消化；S2、加含有10％小牛血清的DMEM培养基培养，待细胞接近长成单层时，弃去细胞培养液；S3、加入适量D-氨基葡萄糖溶液，作用后，弃去D-氨基葡萄糖；S4、用适量的灭菌PBS轻轻洗细胞3次，然后再加入含2％血清的DMEM维持液继续培养96小时...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘爵，姜海军，王丹，韦莉，王菁，朱珊珊，全荣，侯磊，褚军，李子璇，郭雨欣，奚衍洋，宋慧琦，袁枫，
申请(专利权)人：北京市农林科学院，
类型：发明
国别省市：北京,11
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