一种编码β-葡萄糖苷酶基因及其表达载体和蛋白制造技术

本发明专利技术涉及一种编码β‑葡萄糖苷酶基因，至少含有下列核苷酸序列之一的DNA片：1)序列表中SEQ ID NO.1的核苷酸序列；2)与SEQ ID NO.1所示核苷酸序列具有90％以上同源性、且编码相同生物学功能蛋白质的核苷酸序列；或3)与SEQ ID NO.1所示核苷酸序列杂交且编码相同生物学功能蛋白质的核苷酸序列。按照本发明专利技术所述的基因序列进一步构建重组载体在大肠杆菌可实现了β‑葡萄糖苷酶的可溶性表达，并简单的通过亲和纯化，即可得到纯度高于95％且浓度较高的保持天然构象的活性蛋白。这有利于产业化生产β‑葡萄糖苷酶。

【技术实现步骤摘要】
一种编码β-葡萄糖苷酶基因及其表达载体和蛋白
本专利技术属于生物分子克隆
，涉及一种编码β-葡萄糖苷酶基因及其表达载体和蛋白。
技术介绍
β-葡萄糖苷酶(β-D-Glucosidase，EC3.2.1.21)，又称β-D-葡萄糖苷葡萄糖水解酶，别名龙胆二糖酶、纤维二糖酶(cellobias，CB或β-G)和苦杏仁苷酶。它属于纤维素酶类，是纤维素分解酶系中的重要组成成分，能够水解结合于末端非还原性的β-D-葡萄糖键，同时释放出β-D-葡萄糖和相应的配基。β-葡萄糖苷酶还具有转糖苷活力，目的即通过具有转苷活力的葡萄糖苷酶合成功能性低聚葡聚糖、低聚麦芽寡糖、低聚纤维寡糖等可以作为益生元的功能性糖类。因此，该蛋白在食品、饲养和保健品行业等方面都具有重要应用价值。β-葡萄糖苷酶能够水解纤维二糖产生两分子的葡萄糖,是纤维素酶的限速酶,但其含量少、活力低,成为纤维素酶解的瓶颈。目前，已发现的β-葡萄糖苷酶大部分来自可培养微生物。然而,自然界中,超过99％的微生物不能进行纯培养,严重限制了微生物资源的开发和利用。而且产β-葡萄糖苷酶的微生物主要包括曲霉、木霉、酵母和细菌,但产量低,不易大规模生本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种编码β‑葡萄糖苷酶基因，其特征在于，所述基因至少含有下列核苷酸序列之一的DNA片段：1)序列表中SEQ ID NO.1的核苷酸序列；2)与SEQ ID NO.1所示核苷酸序列具有90％以上同源性、且编码相同生物学功能蛋白质的核苷酸序列；3)与SEQ ID NO.1所示核苷酸序列杂交且编码相同生物学功能蛋白质的核苷酸序列。

【技术特征摘要】
1.一种编码β-葡萄糖苷酶基因，其特征在于，所述基因至少含有下列核苷酸序列之一的DNA片段：1)序列表中SEQIDNO.1的核苷酸序列；2)与SEQIDNO.1所示核苷酸序列具有90％以上同源性、且编码相同生物学功能蛋白质的核苷酸序列；3)与SEQIDNO.1所示核苷酸序列杂交且编码相同生物学功能蛋白质的核苷酸序列。2.根据权利要求1所述的基因编码得到的β-葡萄糖苷酶。3.根据权利要求2所述的β-葡萄糖苷酶，其特征在于：所述β-葡萄糖苷酶为如下(1)或(2)的蛋白：(1)蛋白的氨基酸序列如序列表中SEQIDNO.2所示；(2)序列表中SEQIDNO.2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代、缺失和/或添加且具有β-葡萄糖苷酶活性的由SEQIDNO.2衍生的蛋白质。4.含有权利要求1所述基因的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌。5.根据权利要求4所述的重组载体，由空载体和插入该空载体的目的基因组成，其特征在于，所述目的基因为权利要求1所述的基因。6.根据...

【专利技术属性】
技术研发人员：李洪波，吴贤文，董海丽，胡兴，
申请(专利权)人：怀化学院，
类型：发明
国别省市：湖南,43