一种香蕉离体茎尖超低温保存方法技术

本发明专利技术属于香蕉低温保存技术领域，公开了一种香蕉离体茎尖超低温保存方法，将3.0～6.0cm高香蕉苗，在含0.4mol/L蔗糖培养基中预培养2d；室温条件下，剥取带1～2个叶原基的茎尖；茎尖经装载液装载后，用玻璃化溶液处理，在铝箔条上做成小滴；液氮中保存至少1h，用1.2mol/L蔗糖培养液化冻和洗涤，每次洗涤10min；将经上述处理的茎尖转到含0.3mol/L蔗糖MS培养基，暗室培养2d，转移到含0.5mg/L 6‑BA的MS培养基中，培养30～35d，将恢复正常生长的种源接种到新的恢复生长培养基中进行增殖快繁，得丛生芽，生根培养基中培养。在液氮中长期保存，为香蕉种质的安全保存提供有效途径。

【技术实现步骤摘要】
一种香蕉离体茎尖超低温保存方法
本专利技术属于香蕉低温保存
，尤其涉及一种香蕉离体茎尖超低温保存方法。
技术介绍
香蕉是芭蕉科芭蕉属植物，热带地区广泛种植。香蕉味香、富含营养，植株为大型草本，从根状茎发出，由叶鞘下部形成高3～6公尺(10～20尺)的假杆；叶长圆形至椭圆形，有的长达3～3.5公尺(10～11.5尺)，宽65公分(26寸)，10～20枚簇生茎顶。穗状花序下垂，由假杆顶端抽出，花多数，淡黄色；果序弯垂，结果10～20串，约50～150个。植株结果后枯死，由根状茎长出的吸根继续繁殖，每一根株可活多年。原产亚洲东南部，台湾、海南、广东、广西等均有栽培。目前我国香蕉资源保存主要采取田间保存结合离体试管苗保存，人力、物力和财力耗费比较大。而且田间保存易受到自然灾害、病虫害、混杂等影响；试管苗保存需要不断继代，易发生污染丢失和种质退化现象。超低温保存可以实现对香蕉种质的长期保存且遗传稳定性较高，是香蕉种质保存较为理想的途径。综上所述，现有技术存在的问题是：目前我国香蕉资源保存主要采取田间保存结合离体试管苗保存，人力、物力和财力耗费比较大。而且田间保存易受到自然灾害、病虫害、混本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种香蕉离体茎尖超低温保存方法，其特征在于，所述的香蕉离体茎尖超低温保存方法包括：步骤一：将3.0～6.0cm高的香蕉苗，在含0.4mol/L蔗糖培养基中预培养2d；步骤二：在室温条件下，剥取带1～2个叶原基的茎尖；步骤三：将茎尖经装载液装载30～60min后，利用玻璃化溶液PVS2于0℃下处理50min；步骤四：将茎尖转入至滴有PVS2液滴的0.5cm宽,2cm长的铝箔条上，然后在液氮中蘸一下后，迅速装入盛满液氮的冷冻管中，然后浸入液氮保存；步骤五：在液氮中保存至少1h后，在1.2mol/L蔗糖培养液中化冻；步骤六：利用1.2mol/L蔗糖培养液洗涤2次，每次10min；步骤七：将经过处...

【技术特征摘要】
1.一种香蕉离体茎尖超低温保存方法，其特征在于，所述的香蕉离体茎尖超低温保存方法包括：步骤一：将3.0～6.0cm高的香蕉苗，在含0.4mol/L蔗糖培养基中预培养2d；步骤二：在室温条件下，剥取带1～2个叶原基的茎尖；步骤三：将茎尖经装载液装载30～60min后，利用玻璃化溶液PVS2于0℃下处理50min；步骤四：将茎尖转入至滴有PVS2液滴的0.5cm宽,2cm长的铝箔条上，然后在液氮中蘸一下后，迅速装入盛满液氮的冷冻管中，然后浸入液氮保存；步骤五：在液氮中保存至少1h后，在1.2mol/L蔗糖培养液中化冻；步骤六：利用1.2mol/L蔗糖培养液洗涤2次，每次10min；步骤七：将经过处理的茎尖，转入到含0.3mol/L蔗糖的MS培养基，暗室培养2d，转移到含0.5mg/L6-BA的MS培养基中，恢复培养30～35d，将恢复正常生长的种源接种到新的恢复生长培养基中进行增殖快繁...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈晓玲，李俊慧，卢新雄，辛霞，张金梅，尹广鵾，何娟娟，
申请(专利权)人：中国农业科学院作物科学研究所，
类型：发明
国别省市：北京,11