纤维素外切酶基因和编码的蛋白及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种纤维素外切酶基因，所述纤维素外切酶基因核苷酸序列如SEQ ID No.1所示；编码氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的蛋白质，本发明专利技术的基因通过pET32载体在目标蛋白的N‑端融合了一个大小为17kDa左右的Trx片段，使其所表达的蛋白以可溶的形式增量表达出来，进一步通过纯化得到活性和纯度都较好的纯蛋白，而且该蛋白在pH4.0下充分显示出能将纤维素分解为葡萄糖的酶活性，也预示着它在制备将纤维素分解为葡萄糖的酶制剂中有更灵活的运用。

Cellulose Endonuclease Gene and Coded Protein and Its Application

The present invention relates to a cellulose exonuclease gene. The nucleotide sequence of the cellulose exonuclease gene is shown as SEQ ID No.1, and the amino acid sequence is shown as SEQ ID NO.2. The gene of the present invention fuses a Trx fragment about 17 kDa in the N terminal of the target protein by pET32 vector, so that the expressed protein can be expressed in soluble form. Pure protein with good activity and purity was obtained by further purification, and the protein fully showed the activity of enzymes which could decompose cellulose into glucose at pH 4.0, which also indicated that it had more flexible application in the preparation of enzymes which could decompose cellulose into glucose.

【技术实现步骤摘要】
纤维素外切酶基因和编码的蛋白及其应用
本专利技术属于生物基因工程
，涉及纤维素外切酶基因和编码的蛋白及其应用。
技术介绍
纤维素是自然界中最丰富的天然有机物，占植物界碳含量的50％以上，堪称为世界上总量最大的可再生资源。地球每年都会产生大量的植物纤维素，我国仅农作物秸秆年产量就高达6×108～7×108吨，但这些宝贵的纤维素资源并没有被有效地利用，只有少部分用于造纸、纺织或用作粗饲料、薪柴等，大部分以堆积、烧荒等形式直接倾入环境，造成极大的污染和浪费。如果未被水解为葡萄糖，纤维素是难以得到充分利用的。虽然以酸或高温处理能降解纤维素，但在这种极端条件下由于原料成分的复杂性将产生很多难以接受的副产物并使葡萄糖受到破坏，所以合理地开发与利用纤维素资源对人类生存环境和可持续发展有着举足轻重的影响。利用微生物及其产生的纤维素酶(cellulase)来分解纤维素是一种有效且无污染的方法。纤维素酶是降解纤维素的高活性生物催化剂，广泛用于饲料、环保、食品、酿酒、纺织、造纸等领域。纤维素酶属于糖苷水解酶类，是专门催化水解纤维素链中β-1，4-糖苷键的一类酶的总称，是一种高活性生物催化剂，能够分解本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.纤维素外切酶基因，其特征在于：所述纤维素外切酶基因核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。

【技术特征摘要】
1.纤维素外切酶基因，其特征在于：所述纤维素外切酶基因核苷酸序列如SEQIDNo.1所示。2.一种如权利要求1所述的纤维素外切酶基因编码的蛋白质，其特征在于：所述蛋白质的氨基酸序列如SEQIDNO.2所示。3.一种重组载体，由空载体和插入该空载体的目的基因组成，其特征在于，所述目的基因为权利要求1所述的纤维素外切酶基因。4.根据权利要求3所述的重组载体，其特征在于，所述空载体为pET32载体。5.一种重组菌，其特征在于：所述重组菌为权利要求3所述的载体转化的重组菌。6.根据权利要求2所述蛋白质的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：1)将权利要求1所述的基因重组构建到载体中；再转化到大肠...

【专利技术属性】
技术研发人员：李洪波，胡兴，王晓红，米丹，张赛名，
申请(专利权)人：怀化学院，
类型：发明
国别省市：湖南,43