一种丛枝菌根真菌的简易保存方法技术

本发明专利技术提供了一种丛枝菌根真菌的简易保存方法，属于微生物保存技术领域。本发明专利技术提供的丛枝菌根真菌保存方法，包括以下步骤：1)采用湿筛倾析法和蔗糖离心法从盆栽扩繁菌剂中分离得到丛枝菌根真菌孢子，制得丛枝菌根真菌孢子悬浮液；2)以甘油、甘油和生理盐水、海藻糖和蔗糖作为冷冻保护剂，分别与上述孢子悬浮液混合；3)将混合液装入10ml离心管中，再将离心管装入自封袋中并利用硅胶进行干燥；4)然后将离心管置于‑20℃下预冻，最后置于‑80℃下进行保存。本发明专利技术方法操作简单，成本低廉，菌种活性保存效果较好，能成功地与寄主植物根系建立菌根共生体。

A Simple Method for Preservation of Arbuscular Mycorrhizal Fungi

The invention provides a simple preservation method of arbuscular mycorrhizal fungi, which belongs to the technical field of microbial preservation. The preservation method of the arbuscular mycorrhizal fungi provided by the invention comprises the following steps: 1) the arbuscular mycorrhizal fungi spores are separated from the potted propagating agent by wet sieve tilting method and sucrose centrifugation method, and the arbuscular mycorrhizal fungi spore suspension is prepared; 2) glycerol, glycerol and physiological saline, trehalose and sucrose are used as cryoprotectants to mix with the above-mentioned spore suspension separately; 3) The liquid is packed in 10 ml centrifugal tube, then the centrifugal tube is packed in self-sealing bag and dried by silica gel. 4) Then the centrifugal tube is pre-frozen at 20 C and stored at 80 C. The method has the advantages of simple operation, low cost, good preservation effect of bacterial activity, and can successfully establish mycorrhizal symbiosis with the root system of host plant.

【技术实现步骤摘要】
一种丛枝菌根真菌的简易保存方法
本专利技术涉及微生物领域方面，具体涉及一种丛枝菌根真菌的简易保存方法。
技术介绍
丛枝菌根真菌(arbuscularmycorrhizafungi，AMF)通过侵染根系皮层细胞形成大量的丛枝结构，与植物根系形成互惠共生体。它能通过庞大的菌丝网络系统帮助寄主植物吸收各种营养元素，显著改善植物营养状况，提高植物的抗逆性，促进植物生长。然而，与其它菌根真菌不同，AMF是活体营养微生物，只能通过与寄主植物根系建立共生关系才能获得供其生长发育的营养物质，完成其生活史，因此，AMF的保存方法具有特殊性。目前，AMF最普遍的保存方法主要是活体盆栽保存法，因其能长期保持AMF的生物活性，但该法费时、费力，需要较大的空间和温室条件，且还存在杂菌污染的风险，故不能被多数人使用。也有机构将AMF菌剂放置在4℃冰箱中保藏，但这种方法需要专门的设备，会占用大量空间，成本较高，且菌种活力下降较快，保存效果不佳。
技术实现思路
本专利技术是针对上述存在的技术问题提供一种丛枝菌根真菌的一种简易保存方法。本专利技术的目的可以通过以下技术方案实现：一种丛枝菌根真菌的保存方法，该方法包括如下步本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种丛枝菌根真菌的保存方法，其特征在于：该方法包括如下步骤：(1)制备丛枝菌根真菌孢子悬浮液；(2)配制冷冻保护液，灭菌后将冷冻保护液与上述孢子悬浮液均匀混合；(3)将混合液装入离心管中，再将离心管装入自封袋中并利用硅胶进行干燥；(4)将离心管置于‑20℃下预冻，最后置于‑80℃下进行保存，使用时在水浴锅中进行解冻。

【技术特征摘要】
1.一种丛枝菌根真菌的保存方法，其特征在于：该方法包括如下步骤：(1)制备丛枝菌根真菌孢子悬浮液；(2)配制冷冻保护液，灭菌后将冷冻保护液与上述孢子悬浮液均匀混合；(3)将混合液装入离心管中，再将离心管装入自封袋中并利用硅胶进行干燥；(4)将离心管置于-20℃下预冻，最后置于-80℃下进行保存，使用时在水浴锅中进行解冻。2.如权利要求1所述的丛枝菌根真菌保存方法，其特征在于：步骤(1)中所述的丛枝菌根真菌孢子悬浮液是通过以下步骤制备：S1：将丛枝菌根真菌进行盆栽培养，3个月后收获地下部分，置于阴凉处自然风干，得到丛枝菌根真菌扩繁菌剂；S2：采用湿筛倾析法和蔗糖离心法从盆栽扩繁菌剂中分离得到丛枝菌根真菌孢子悬浮液。3.如权利要求1所述的丛枝菌根真菌保存方法，其特征在于：步骤(1)中所述的丛枝菌根真菌孢子悬浮液的浓度为30～200个/ml。4.如权利要求1所述的丛枝菌根真菌保存方法，其特征在于：步骤(2)中所述的冷冻保护液为甘油的水溶液、甘油的水溶液和生理盐水的混合溶液、海藻糖溶液或蔗糖...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙锦，孔镭，刘铭铭，王战，宫筱雯，张晓琳，杨雅兰，
申请(专利权)人：南京农业大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32