The invention discloses a method for detecting arachidonic acid-like substances, including adding 300 water containing 0.005% BHT to 100 samples in volume fraction, adding 500 methyl tert-butyl ether, centrifuging, transferring the upper organic phase to retain the lower aqueous phase, adding 500 ethyl acetate to the lower aqueous phase, centrifuging, and obtaining the upper organic phase with the previous step. The upper organic phase was merged, and the merged upper organic phase was dried with nitrogen, then resolved with acetonitrile and isopropanol solution and tested on computer. The general internal standard selected by the invention is stable, the positive and negative ion modes can achieve accurate detection, the detection of arachidonic acid-like substances will not interfere, and the detection repeatability is good. The impurities in the detection method of the invention are obviously reduced, and the pollution to the instrument can be greatly reduced. The method of the invention is convenient and fast, the extraction time is short, the detection signal-to-noise ratio is significantly improved, and the sensitivity is greatly improved. High.
【技术实现步骤摘要】
一种类花生四烯酸类物质检测方法
本专利技术属于类花生四烯酸类物质检测
,具体涉及一种类花生四烯酸类物质检测方法。
技术介绍
由花生四烯酸通过环加氧酶(COX-2),脂氧合酶(LOX)和细胞色素P450酶等酶催化代谢生成的羟基二十碳四烯酸(HETEs),二羟基二十碳四烯酸(DiHETEs),环氧二十碳四烯酸(EETs),前列腺素(PGs)和血栓素(TX)等代谢物为二十烷酸类化合物的主要组成二十烷酸,这些内源的二十烷酸类物质在生物液体和组织中的含量很低。但是目前对这类物质存在前处理制备方法成本高、繁琐复杂、样本中含量低难检测等问题。因此如何开发一种低成本、方便、能够提高检测灵敏度、减低检测噪声的方法是现有技术有待解决的技术问题。
技术实现思路
本部分的目的在于概述本专利技术的实施例的一些方面以及简要介绍一些较佳实施例。在本部分以及本申请的说明书摘要和专利技术名称中可能会做些简化或省略以避免使本部分、说明书摘要和专利技术名称的目的模糊,而这种简化或省略不能用于限制本专利技术的范围。鉴于上述的技术缺陷,提出了本专利技术。因此,作为本专利技术其中一个方面,本专利技术克服现 ...
【技术保护点】
1.一种类花生四烯酸类物质检测方法,其特征在于:包括,以体积分数计,100份的样品中加入300份含0.005%BHT的水;加入500份的甲基叔丁基醚,离心,将上层有机相转移,保留下层水相;向所述下层水相中加入500份的乙酸乙酯,离心,将上层有机相与上一步骤得到的上层有机相合并;将合并的上层有机相用氮气吹干后,使用乙腈‑异丙醇溶液复溶,上机检测。
【技术特征摘要】
1.一种类花生四烯酸类物质检测方法,其特征在于:包括,以体积分数计,100份的样品中加入300份含0.005%BHT的水;加入500份的甲基叔丁基醚,离心,将上层有机相转移,保留下层水相;向所述下层水相中加入500份的乙酸乙酯,离心,将上层有机相与上一步骤得到的上层有机相合并;将合并的上层有机相用氮气吹干后,使用乙腈-异丙醇溶液复溶,上机检测。2.如权利要求1所述的类花生四烯酸类物质检测方法,其特征在于:所述加入500份的甲基叔丁基醚,离心,包括在4℃条件下10000rpm离心3min;向所述下层水相中加入500份的乙酸乙酯,离心,包括在4℃条件下10000rpm离心3min。3.如权利要求1或2所述的类花生四烯酸类物质检测方法,其特征在于:所述使用乙腈-异丙醇溶液复溶,其中,以体积比计,乙腈:异丙醇=1:1。4.如权利要求1或2所述的类花生四烯酸类物质检测方法,其特征在于:所述样品,包括血浆样品。5.如权利要求1或2所述的类花生四烯酸类物质检测方法,其特征在于:还包括,将2-氯苯丙氨酸代替溶剂作为内标,在检测过程中,通过2-氯苯丙氨酸峰面积和保留时间反映实际样本的采集情况。6.如权利要求5所述的类花生四烯酸类物质检测方法,其特征在于:所述2-氯苯丙氨酸浓度为1μg/mL。7.如权利要求1、2、6中任一所述的类花生四烯酸类物质检测方法,其特征在于:还包括,使用4,4’-亚甲基双(2-氯苯胺)、对茴香胺、L-酪氨酸甲酯、3-氯苯胺、2,4-二甲基喹啉、磺胺吡啶、阿特拉津、磺胺多辛、DL-亮氨酸、N-苯甲酰基-L-酪氨酸乙酯、6-苯基-2-硫脲嘧啶、N-(邻甲苯酰)甘氨酸、...
【专利技术属性】
技术研发人员:唐堂,王宏,郑彬,
申请(专利权)人:嘉兴迈维代谢生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:浙江,33
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