【技术实现步骤摘要】
基于数字LAMP技术检测猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的引物及其试剂盒与方法
本专利技术涉及一种猪传染性胸膜肺炎放线杆菌测试装备，具体涉及一种基于数字LAMP技术检测猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的试剂盒，属于分子生物学
技术介绍
猪传染性胸膜肺炎是由胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacilluspleuropneumoniae，APP)引起的以急性出血性纤维素性胸膜肺炎和慢性纤维素性坏死性胸膜肺炎为特征的猪的一种高度传染性呼吸道疾病。急性型呈现高死亡率，慢性发病时，死亡率较低，但猪生长缓慢，饲料转化率低。猪传染性胸膜肺炎是一种世界性疾病，广泛分布于英国、德国、瑞士、丹麦、澳大利亚、加拿大、墨西哥、阿根廷、瑞典、波兰、日本、美国、中国等全世界所有养猪国家，给集约化养猪业造成巨大的经济损失，特别是近十几年来本病的流行呈上升趋势，是国际公认的危害现代养猪业的五大疾病之一。我国于1987年首次发现本病，此后流行蔓延开来，危害日趋严重。目前，实验室常用的检测猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的方法有细菌分离、血清学诊断技术(琼脂扩散试验、协同凝集试验、补体结合试验、荧光抗体技术、酶联...
【技术保护点】
1.一种基于数字LAMP技术检测猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的引物，包括内引物FIP和BIP，外引物F3和B3，环引物LF和LB，其核苷酸序列分别如下所示：外引物F3：GGTAATGATACGGTTAATGGCG外引物B3：CTTCAAGCGACACAAGAGATA内引物FIP：ACGATATCCTGTCCGTGTCCTGGTAATGGCGATGACACC内引物BIP：TGGTGAGCACTCAGGTGGACTCTCCTCCGTGCTTCT环引物LF：GCCACCTCTTAGAATATCATTACCT环引物LB：AGATGGTTGAGTCGATGGC。
【技术特征摘要】
1.一种基于数字LAMP技术检测猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的引物，包括内引物FIP和BIP，外引物F3和B3，环引物LF和LB，其核苷酸序列分别如下所示：外引物F3：GGTAATGATACGGTTAATGGCG外引物B3：CTTCAAGCGACACAAGAGATA内引物FIP：ACGATATCCTGTCCGTGTCCTGGTAATGGCGATGACACC内引物BIP：TGGTGAGCACTCAGGTGGACTCTCCTCCGTGCTTCT环引物LF：GCCACCTCTTAGAATATCATTACCT环引物LB：AGATGGTTGAGTCGATGGC。2.如权利要求1所述的基于数字LAMP技术检测猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的引物，其特征在于：扩增反应时，内引物FIP和BIP，环引物LF和LB和外引物F3和B3的摩尔比为8：4：1。3.一种基于数字LAMP技术检测猪猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的试剂盒，其特征在于，试剂盒包含权利要求1或2中所述的引物。4.如权利要求3所述的基于数字LAMP技术检测猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的试剂盒，其特征在于，还包括以下成分的部分或者全部：(1)2×ddLAMPSupermix；(2)无RNA酶的超纯水；(3)阳性对照和阴性对照；(4)细菌总DNA提取试剂。5.如权利要求4所述的基于数字LAMP技术检测猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的试剂盒，其特征在于：所述2×ddLAMPSupermix包含以下试剂：内引物FIP和BIP各160μmol/L，外引物F3和B3各80μmol/L，环引物LF和LB各160μmol/L，1×TE，50mmol/LTris-HCl(pH8.8)，250mmol/LKCl，200mmol/LMgSO4，250mmol/L(NH4)2SO4，2.8％Tween-20，7.14mol/L甜菜碱，10mmol/LdNTP，Bst大片断DNA聚合酶160U，20×EvaGreen，RNaseCocktail。6.如权利要求4所述的基于数字LAMP...
【专利技术属性】
技术研发人员：李丽丽，孟赫诚，刘雨琦，石磊，温雯，
申请(专利权)人：暨南大学，华南理工大学，
类型：发明
国别省市：广东,44
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