一种提高蛹虫草菌丝体中虫草酸含量的方法技术

本发明专利技术属于蛹虫草栽培技术领域，具体涉及一种提高蛹虫草菌丝体中虫草酸含量的方法。本发明专利技术所述提高蛹虫草菌丝体中虫草酸含量的方法，利用萝卜、甘蔗、山楂作为培养原料的营养物质，并添加鸡蛋清，能够有效对蛹虫草发酵过程中虫草酸的进行诱导；并通过添加月桂酰基谷氨酸钠作为诱导剂，有效提高了菌丝体胞内虫草酸的含量；同时在菌丝体发酵过程中辅以特定光暗比的光照诱导，进一步利用物理诱导方式增强了蛹虫草菌丝体中虫草酸的积累，有效提高了菌丝体胞内虫草酸的含量。

【技术实现步骤摘要】
一种提高蛹虫草菌丝体中虫草酸含量的方法
本专利技术属于蛹虫草栽培
，具体涉及一种提高蛹虫草菌丝体中虫草酸含量的方法。
技术介绍
蛹虫草(Cordycepsmilitaris(L.)Link)又名北冬虫夏草，隶属于真菌门(Eumycota)、子囊菌门(Ascomycota)、子囊菌亚门(Ascomycotinia)、粪壳菌纲(Sordariomycetes)、肉座菌亚纲(Hypocreomycetidae)、肉座菌目(Hypocreales)、虫草科(Cordycipitaceae)、虫草属(Cordyceps)的模式种。蛹虫草通常与冬虫夏草具有相似的生物活性成分，主要包括虫草素、虫草酸、虫草多糖、麦角甾醇、氨基酸、核苷类物质等，蛹虫草的功效也与冬虫夏草相似，是冬虫夏草的良好代用品，且虫草素含量也高于冬虫夏草。踊虫草是一种天然资源，呈现出世界性分布，但数量很少，多数依靠人工栽种培植。虫草酸是蛹虫草的主要活性成分之一，虫草酸含量的高低被认为是衡量虫草质量的主要标准之一，一般认为虫草酸含量高的虫草的药用价值高。试验测定，冬虫夏草含虫草酸成分约为7％，而蛹虫草中的虫草酸活性成分含量要明显高于冬虫夏草，使其应用价值得到人们的广泛关注。药理学研究表明，虫草酸具有促进人体新陈代谢、改善人体微循环系统、明显降低血脂、抑制细菌、增强对疾病的抵抗力等作用，以及镇咳、祛痰、平喘的功效；虫草酸可用于预防与治疗脑血栓、脑出血、心肌梗塞、长期衰竭、抗肝组织纤维化、抗脂质过氧化等症，同时由于虫草的增强免疫功能使肝脏的解毒作用增强，从而能够有效保护肝细胞。目前，由于对蛹虫草虫草酸等活性成分的需求增长迅速，野生蛹虫草资源被疯狂采摘而日益稀少昂贵，而通过化学合成其活性成分的途径工艺复杂且产量极低，严重制约其广泛的药源应用。研究发现，通过液体发酵生产技术制得的虫草酸，与从蛹虫草子实体、菌丝体中直接提取得到的虫草酸等活性成分在生化结构、生理作用上基本是相同的，而且具有培养周期短、生产流程易控制、活性物质易于提取等优点，虫草酸等活性物质的提取含量及效率都要远高于利用人工栽培虫草进行生产和提取。但是目前的蛹虫草及虫草酸等活性成分的生产仍是以传统的固体栽培为主，液体培养研究和应用由于发展时间短，许多发酵技术和工艺仍不成熟，整体产量和发酵水平较低，限制了其工业化生产的发展。因此，如何通过液体发酵手段有效提高蛹虫草菌丝体中虫草酸的含量，具有积极的意义。
技术实现思路
为此，本专利技术所要解决的技术问题在于提供一种提高蛹虫草菌丝体中虫草酸含量的方法，以解决现有技术中虫草酸液体发酵工艺存在着整体产量和发酵水平较低的问题。为解决上述技术问题，本专利技术所述的一种提高蛹虫草菌丝体中虫草酸含量的方法，包括在菌株活化培养基中进行菌种活化、在种子液培养基中进行种子液培养、以及在菌丝体发酵培养基中进行发酵罐菌丝体培养的步骤；所述菌丝体培养的步骤包括在菌丝体发酵培养过程中进行光照诱导培养的步骤，控制光周期光暗比为L2-6：D18-22，控制光照强度均为1000-3000lx。优选的，所述提高蛹虫草菌丝体中虫草酸含量的方法，所述菌丝体培养的步骤中，控制光照强度以200-300lx/天的幅度增加。优选的，所述提高蛹虫草菌丝体中虫草酸含量的方法，所述菌丝体发酵培养基包括如下质量含量的组分：萝卜2-4％、甘蔗2-5％、豆粕粉1-3％、蛋白胨2-4％、乳木果油0.8-2％、山楂1-2％、鸡蛋清1-3％、MgSO40.05-0.08％、KH2PO40.04-0.06％，自然pH。更优的，所述提高蛹虫草菌丝体中虫草酸含量的方法，所述菌丝体发酵培养基还包括0.01-0.02％的月桂酰基谷氨酸钠。具体的，所述山楂为以山楂味原料，经去核、破碎、加水制浆、加入果胶酶解处理后所得的山楂酶解物。优选的，所述菌丝体培养步骤的发酵条件包括：控制发酵温度为20-25℃，搅拌转速150-180rpm，通风量0.8-1.2m3/h。优选的，所述种子液培养基包括如下质量含量的组分：葡萄糖0.5-1％、酵母提取物0.2-0.4％、萝卜0.8-1.5％、鸡蛋清0.5-1％、MgSO40.01-0.03％、KH2PO40.01-0.03％，自然pH。优选的，所述种子液培养步骤的条件包括：控制培养温度22-28℃，搅拌转速120-150rpm。优选的，菌株活化培养基包括如下质量含量的组分：马铃薯5-10％、葡萄糖2-4％、萝卜0.5-1％、鸡蛋清0.3-0.5％、自然pH。优选的，所述菌种活化步骤的条件包括：于20-30℃、转速120-180rpm进行避光培养2-3天。本专利技术所述提高蛹虫草菌丝体中虫草酸含量的方法，利用萝卜、甘蔗、山楂作为培养原料的营养物质，并添加鸡蛋清，能够有效对蛹虫草发酵过程中虫草酸的进行诱导；并通过添加月桂酰基谷氨酸钠作为诱导剂，有效提高了菌丝体胞内虫草酸的含量；同时在菌丝体发酵过程中辅以特定光暗比的光照诱导，进一步利用物理诱导方式增强了蛹虫草菌丝体中虫草酸的积累，有效提高了菌丝体胞内虫草酸的含量。具体实施方式在本专利技术下述实施例中，选用的培育蛹虫草的菌株为现有技术常规已知菌株即可，本专利技术方案通过对各级发酵培养基的筛选，有助于提高虫草酸的含量。下述实施例选用的所述蛹虫草菌株具体为蛹虫草(Cordycepsmilitaris)菌株“大孢子头北虫草09-888”(购自于辽宁锦州市亚泰微生物研究所)。实施例1本实施例所述的提高蛹虫草菌丝体中虫草酸含量的方法，包括在菌株活化培养基中进行菌种活化、在种子液培养基中进行种子液培养、以及在菌丝体发酵培养基中进行发酵罐菌丝体培养的步骤。本实施例所述菌株活化培养基包括如下质量含量的组分：按照马铃薯5％、葡萄糖4％、萝卜0.5％、鸡蛋清0.5％的比例取上述组分；分别取马铃薯50g和萝卜5g进行混合制浆、并加入葡萄糖40g、鸡蛋清5g混匀，加水定容至1L，自然pH，121℃灭菌20min后，分装于试管中，将蛹虫草菌种在无菌条件下接入试管，于20℃、转速180rpm进行避光活化培养2-3天。本实施例所述种子液培养基包括如下质量含量的组分：按照葡萄糖0.5％、酵母提取物0.4％、萝卜0.8％、鸡蛋清1％、MgSO40.01％、KH2PO40.03％的比例取上述组分；取选定量的萝卜加水进行制浆，并加入选定量的所述葡萄糖、酵母提取物、鸡蛋清、MgSO4和KH2PO4混匀，加水定容至5L，自然pH，分装于500mL三角瓶内，每瓶装液量100mL，封口后于121℃灭菌20min，取出培养基自然冷却至室温。无菌条件下，将所述活化培养后的菌液按照5％的接种量接种至所述液体培养基中，于22℃，控制搅拌转速150rpm，摇瓶培养2-3天。本实施例所述菌丝体发酵培养基包括如下质量含量的组分：萝卜2％、甘蔗5％、豆粕粉1％、蛋白胨4％、乳木果油0.8％、山楂2％、鸡蛋清1％、MgSO40.08％、KH2PO40.04％的比例取上述组分；取选定量的萝卜、甘蔗和山楂加水进行混合制浆，加入所述豆粕粉、蛋白胨、乳木果油、鸡蛋清、MgSO4、KH2PO4混匀，加水定容至5L，装入发酵罐，于121℃灭菌20min，取出培养基自然冷却至室温。无菌条件下，按照10％的接种量接入上述种子液培养基，控制发本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种提高蛹虫草菌丝体中虫草酸含量的方法，其特征在于，包括在菌株活化培养基中进行菌种活化、在种子液培养基中进行种子液培养、以及在菌丝体发酵培养基中进行发酵罐菌丝体培养的步骤；所述菌丝体培养的步骤包括在菌丝体发酵培养过程中进行光照诱导培养的步骤，控制光周期光暗比为L2‑6：D18‑22，控制光照强度均为1000‑3000lx。

【技术特征摘要】
1.一种提高蛹虫草菌丝体中虫草酸含量的方法，其特征在于，包括在菌株活化培养基中进行菌种活化、在种子液培养基中进行种子液培养、以及在菌丝体发酵培养基中进行发酵罐菌丝体培养的步骤；所述菌丝体培养的步骤包括在菌丝体发酵培养过程中进行光照诱导培养的步骤，控制光周期光暗比为L2-6：D18-22，控制光照强度均为1000-3000lx。2.根据权利要求1所述提高蛹虫草菌丝体中虫草酸含量的方法，其特征在于，所述菌丝体培养的步骤中，控制光照强度以200-300lx/天的幅度增加。3.根据权利要求1或2所述提高蛹虫草菌丝体中虫草酸含量的方法，其特征在于，所述菌丝体发酵培养基包括如下质量含量的组分：萝卜2-4％、甘蔗2-5％、豆粕粉1-3％、蛋白胨2-4％、乳木果油0.8-2％、山楂1-2％、鸡蛋清1-3％、MgSO40.05-0.08％、KH2PO40.04-0.06％，自然pH。4.根据权利要求3所述提高蛹虫草菌丝体中虫草酸含量的方法，其特征在于，所述菌丝体发酵培养基还包括0.01-0.02％的月桂酰基谷氨酸钠。5.根据权利要求3或4所述提高蛹虫草菌丝体中虫草酸含量的方法，其特征在于，所述山楂为以山楂为原料，经去核、破碎、加水制浆、加入果...

【专利技术属性】
技术研发人员：邵颖，陈安徽，刘辉，秦杰，巫永华，刘威，张建，
申请(专利权)人：徐州工程学院，
类型：发明
国别省市：江苏,32