The present invention relates to a combination of a polypeptide having galactosidase activity and a polypeptide having beta galactosidase activity for use in animal feed, for example. The present invention further relates to polypeptides with beta galactosidase activity, polypeptides with galactosidase activity and polynucleotides encoding these polypeptides. The invention also relates to nucleic acid constructs, vectors and host cells containing these polynucleotides, together with methods for producing and using these polypeptides.
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】包含具有半乳聚糖酶活性的多肽和具有β-半乳糖苷酶活性的多肽的组合物对序列表的引用本申请包含处于计算机可读形式的序列表，将其通过引用并入本文。专利技术背景
本专利技术涉及包含具有半乳聚糖酶活性的多肽和具有β-半乳糖苷酶活性的多肽的组合物，用于在例如动物饲料中使用。本专利技术进一步涉及具有β-半乳糖苷酶活性的多肽、具有半乳聚糖酶活性的多肽以及编码这些多肽的多核苷酸。本专利技术还涉及包含这些多核苷酸的核酸构建体、载体以及宿主细胞连同产生和使用这些多肽的方法。
技术介绍
大豆是一种原产于东亚的豆科植物物种，并且是全球第二大饲料作物，也是动物饲料中应用的最大蛋白质来源。可以加工(脱脂)大豆以产生豆粕(SBM)，并且SBM是用于动物饲料的重要且廉价的高质量蛋白质来源。其他常见类型的豆科植物是鹰嘴豆、羽扇豆、扁豆、花生、菜豆或豌豆，它们也可以加工并用作动物饲料。豆科植物(如大豆)含有大量的半乳聚糖多糖，它们需要通过酶降解以释放其中的糖，从而释放其中的能量。然而，有很少有效地降解半乳聚糖多糖的解决方案，因此豆科植物中的能量不能被动物适当地利用。高达70％的农民支出来自动物饲料的成...
【技术保护点】
1.一种组合物，该组合物包含一种或多种具有半乳聚糖酶活性的GH53多肽和一种或多种具有β‑半乳糖苷酶活性的GH35多肽。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.05.24 EP 16170963.91.一种组合物，该组合物包含一种或多种具有半乳聚糖酶活性的GH53多肽和一种或多种具有β-半乳糖苷酶活性的GH35多肽。2.如权利要求1所述的组合物，其中该GH53多肽包含基序GV[T/M]PD[W/M]VQ[I/V]GNE(SEQIDNO:65)和/或基序WADP[A/G]xQxKPxAW(SEQIDNO:66)。3.如权利要求1至2中任一项所述的组合物，其中该GH53多肽获得自或可获得自分类科类芽孢杆菌科。4.如权利要求1至3中任一项所述的组合物，其中该GH53多肽选自下组，该组由以下组成：(a)与SEQIDNO:3的多肽具有至少80％序列同一性的多肽；(b)与SEQIDNO:7的多肽具有至少80％序列同一性的多肽；(c)与SEQIDNO:11的多肽具有至少80％序列同一性的多肽；(d)与SEQIDNO:15的多肽具有至少80％序列同一性的多肽；(e)与SEQIDNO:19的多肽具有至少80％序列同一性的多肽；(f)与SEQIDNO:23的多肽具有至少80％序列同一性的多肽；(g)与SEQIDNO:27的多肽具有至少80％序列同一性的多肽；(h)与SEQIDNO:31的多肽具有至少80％序列同一性的多肽；(i)与SEQIDNO:35的多肽具有至少80％序列同一性的多肽；(j)与SEQIDNO:39的多肽具有至少80％序列同一性的多肽；(k)SEQIDNO:3、SEQIDNO:7、SEQIDNO:11、SEQIDNO:15、SEQIDNO:19、SEQIDNO:23、SEQIDNO:27、SEQIDNO:31、SEQIDNO:35或SEQIDNO:39的变体，其中该变体具有半乳聚糖酶活性并且在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个位置中包含一个或多个氨基酸取代和/或一个或多个氨基酸缺失和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合；(l)包含(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)、(g)、(h)、(i)、(j)或(k)的多肽以及N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签的多肽；(m)包含(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)、(g)、(h)、(i)、(j)或(k)的多肽以及1与10个氨基酸之间的N-末端和/或C-末端延伸的多肽；以及(n)(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)、(g)、(h)、(i)、(j)、(k)或(l)的多肽的具有半乳聚糖酶活性并且具有该成熟多肽长度的至少90％的片段。5.如权利要求4所述的组合物，其中该GH53多肽包含SEQIDNO:2的氨基酸1至316、SEQIDNO:3的氨基酸1至316、SEQIDNO:4的氨基酸1至324、SEQIDNO:6的氨基酸1至318、SEQIDNO:7的氨基酸1至318、SEQIDNO:8的氨基酸1至326、SEQIDNO:10的氨基酸1至316、SEQIDNO:11的氨基酸1至316、SEQIDNO:12的氨基酸1至324、SEQIDNO:14的氨基酸1至316、SEQIDNO:15的氨基酸1至316、SEQIDNO:16的氨基酸1至324、SEQIDNO:18的氨基酸1至316、SEQIDNO:19的氨基酸1至316、SEQIDNO:20的氨基酸1至324、SEQIDNO:22的氨基酸1至316、SEQIDNO:23的氨基酸1至316、SEQIDNO:24的氨基酸1至324、SEQIDNO:26的氨基酸1至516、SEQIDNO:27的氨基酸1至516、SEQIDNO:28的氨基酸1至524、SEQIDNO:30的氨基酸1至317、SEQIDNO:31的氨基酸1至317、SEQIDNO:32的氨基酸1至325、SEQIDNO:34的氨基酸1至316、SEQIDNO:35的氨基酸1至316、SEQIDNO:36的氨基酸1至324、SEQIDNO:38的氨基酸1至316、SEQIDNO:39的氨基酸1至316或SEQIDNO:40的氨基酸1至324或由其组成。6.如权利要求1至5中任一项所述的组合物，其中该GH35多肽选自下组，该组由以下组成：(a)与SEQIDNO:43的多肽具有至少80％序列同一性的多肽；(b)与SEQIDNO:46的多肽具有至少80％序列同一性的多肽；(c)与SEQIDNO:49的多肽具有至少80％序列同一性的多肽；(d)与SEQIDNO:52的多肽具有至少80％序列同一性的多肽；(e)与SEQIDNO:55的多肽具有至少80％序列同一性的多肽；(f)与SEQIDNO:58的多肽具有至少80％序列同一性的多肽；(g)与SEQIDNO:61的多肽具有至少80％序列同一性的多肽；(h)与SEQIDNO:70的多肽具有至少80％序列同一性的多肽；(i)与SEQIDNO:73的多肽具有至少80％序列同一性的多肽；(j)与SEQIDNO:76的多肽具有至少80％序列同一性的多肽；(k)与SEQIDNO:79的多肽具有至少80％序列同一性的多肽；(l)SEQIDNO:43、SEQIDNO:46、SEQIDNO:49、SEQIDNO:52、SEQIDNO:55、SEQIDNO:58、SEQIDNO:61、SEQIDNO:70、SEQIDNO:73、SEQIDNO:76或SEQIDNO:79的变体，其中该变体具有β-半乳糖苷酶活性并且在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个位置中包含一个或多个氨基酸取代和/或一个或多个氨基酸缺失和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合；(m)包含(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)、(g)、(h)、(i)、(j)、(k)或(l)的多肽以及N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签的多肽；(n)包含(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)、(g)、(h)、(i)、(j)、(k)或(l)的多肽以及1与10个氨基酸之间的N-末端和/或C-末端延伸的多肽；以及(o)(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)、(g)、(h)、(i)、(j)、(k)或(l)的多肽的具有半乳聚糖酶活性并且具有该成熟多肽长度的至少90％的片段。7.如权利要求6所述的组合物，其中该GH35多肽包含SEQIDNO:42的氨基酸1至985、SEQIDNO:43的氨基酸1至985、SEQIDNO:45的氨基酸1至1015、SEQIDNO:46的氨基酸1至1015、SEQIDNO:48的氨基酸1至998、SEQIDNO:49的氨基酸1至998、SEQIDNO:51的氨基酸1至983、SEQIDNO:52的氨基酸1至983、SEQIDNO:54的氨基酸1至998、SEQIDNO:55的氨基酸1至998、SEQIDNO:57的氨基酸1至1007、SEQIDNO:58的氨基酸1至1007、SEQIDNO:60的氨基酸1至988、SEQIDNO:61的氨基酸1至988、SEQIDNO:69的氨基酸1至962、SEQIDNO:70的氨基酸1至962、SEQIDNO:72的氨基酸1至1000、SEQIDNO:73的氨基酸1至1000、SEQIDNO:75的氨基酸1至1000、SEQIDNO:76的氨基酸1至1000、SEQIDNO:78的氨基酸1至994和SEQIDNO:79的氨基酸1至994或由其组成。8.如权利要求1至7中任一项所述的组合物，其中当在反应条件每kg豆粕20mg半乳聚糖酶和20mgβ-半乳糖苷酶、在10％w/v0.1M柠檬酸-磷酸盐缓冲液pH6.5中、在40℃下孵育2小时下进行时，该组合物释放至少12g半乳糖/kg豆粕。9.一种颗粒，该颗粒包含如权利要求1至8中任一项所述的组合物。10.一种动物饲料添加剂，该动物饲料添加剂包含(a)如权利要求1至8中任一项所述的组合物或如权利要求9所述的颗粒，以及(b)选自由以下组成的列表的一种或多种组分：一种或多种维生素；一种或多种矿物质；一种或多种氨基酸；一种或多种植生素；一种或多种益生元；一种或多种有机酸；以及一种或多种其他饲料成分。11.一种动物饲料，该动物饲料包含植物基材料和如权利要求1至8中任一项所述的组合物、如权利要求9所述的颗粒或如权利要求10所述的动物饲料添加剂。12.一种颗粒状动物饲料，该颗粒状动物饲料包含植物基材料和如权利要求1至8中任一项所述的组合物、如权利要求9所述的颗粒或如权利要求10所述的动物饲料添加剂。13.一种液体配制品，该液体配制品包含如权利要求1至8中任一项所述的组合物。14.一种从植物基材料中释放半乳糖的方法，该方法包括用如权利要求1至8中任一项所述的组合物、如权利要求9所述的颗粒、如权利要求10所述的动物饲料添加剂或如权利要求13所述的液体配制品处理该植物基材料。15.一种改善动物的一个或多个性能参数的方法，该方法包括向一只或多只动物施用如权利要求1至8中任一项所述的组合物、如权利要求9所述的颗粒、如权利要求10所述的动物饲料添加剂、如权利要求11所述的动物饲料、如权利要求12所述的颗粒状动物饲料或如权利要求13所述的液体配制品。16.如权利要求1至8中任一项所述的组合物、如权利要求9所述的颗粒、如权利要求10所述的动物饲料添加剂或如权利要求13所述的液体配制品在以下中的用途：在动物饲料中；在动物饲料添加剂中；在用于在动物饲料中使用的组合物的制备中；用于改善动物饲料的营养价值；用于提高动物饲料的消化率；用于改善动物中的一个或多个性能参数；和/或用于从分类亚纲蔷薇分支的植物基材料中释放半乳糖。17.一种具有半乳聚糖酶活性的分离的多肽，该分离的多肽选自下组，该组由以下组成：(a)与SEQIDNO:3的多肽具有至少82％序列同一性的多肽；(b)与SEQIDNO:7的多肽具有至少83％序列同一性的多肽；(c)与SEQIDNO:11的多肽具有至少99.0％序列同一性的多肽；(d)与SEQIDNO:15的多肽具有至少96.4％序列同一性的多肽；(e)与SEQIDNO:19的多肽具有至少84％序列同一性的多肽；(f)与SEQIDNO:23的多肽具有至少96.4％序列同一性的多肽；(g)与SEQIDNO:27的多肽具有至少86％序列同一性的多肽；(h)与SEQIDNO:31的多肽具有至少99.3％序列同一性的多肽；(i)与SEQIDNO:35的多肽具有至少99.3％序列同一性的多肽；(j)与SEQIDNO:39的多肽具有至少83％序列同一性的多肽；(k)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQIDNO:1的成熟多肽编码序列具有至少82％序列同一性；(l)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQIDNO:5的成熟多肽编码序列具有至少83％序列同一性；(m)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQIDNO:9的成熟多肽编码序列具有至少99.0％序列同一性；(n)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQIDNO:13的成熟多肽编码序列具有至少96.4％序列同一性；(o)由以下多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQIDNO...
【专利技术属性】
技术研发人员：L·卡斯滕森，N·斯波茨博格，M·耶蒙森，J·萨洛蒙，K·B·R·M·克罗，
申请(专利权)人：诺维信公司，
类型：发明
国别省市：丹麦,DK
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