CD47阻断治疗中的巨噬细胞刺激制造技术

阻断CD47/SIRPa途径消耗癌细胞。当巨噬细胞刺激剂与CD47阻断药物组合使用时，这种抗癌活性得到增强。当CD47阻断药物是SIRPaFc时，这种抗癌联合疗法特别有效。

Macrophage stimulation in CD47 blocking therapy

Blocking CD47/SIRPa pathway consumes cancer cells. When macrophage stimulants were combined with CD47 blockers, the anticancer activity was enhanced. When the CD47 blocker is SIRPaFc, this combination therapy is particularly effective.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】CD47阻断治疗中的巨噬细胞刺激本申请要求2016年4月15提交的美国临时申请62/322,934在35USC119(e)款下的权益，在此通过引用将其并入。
本专利技术涉及使用阻断CD47/SIRPa相互作用的药物的方法。更具体地，本专利技术涉及当接受SIRPαFc药物的癌症患者也被治疗以刺激巨噬细胞群体时产生的改善。
技术介绍
通过与癌细胞抗原结合的抗体，以及通过Fc受体与该抗体的Fc部分结合的巨噬细胞的募集和活化，靶向癌细胞。癌细胞上的CD47与巨噬细胞上的SIRPa之间的结合传递了“不要吃我”的信号，该信号使许多肿瘤细胞逃脱巨噬细胞的检测和破坏。已经表明抑制CD47/SIRPa相互作用(SIRPαFc)将允许巨噬细胞“看到”并破坏靶CD47+癌细胞。在WO2010/130053中描述了使用基于SIRPα的药剂通过SIRPαFc治疗癌症。(SIRPa和SIRPα在本文中可互换使用，作为SIRPalpha的等同术语。同样，SIRPaFc和SIRPαFc在本文中可互换使用)。在WO2014/094122中，我们描述了抑制CD47和SIRPa之间相互作用的药物。该SIRPαFc药物是人SIRPa的一种形式，其结合了与特别有用形式的基于IgG1的Fc区连接的细胞外结构域的特定区域。在这种形式中，SIRPaFc药物对存在CD47+表型的癌细胞的存活率显示出显著影响。特别是在急性髓性白血病(AML)细胞和许多其他类型的癌症中可以看到这种效果。在Stanford的WO2013/109752中描述了具有显著改变的一级结构和增强的CD47结合亲和力的可溶形式的SIRP。在MerckGMBH的WO2016/024021中描述了包含肿瘤抗原结合位点的另一种类似形式的SIRPaFc药物。其他SIRPαFc药物已在文献中描述，这些包括各种CD47抗体(参见例如Stanford的US8562997和InhibRx的WO2014/123580)，每种抗体包含不同的抗原结合位点，但都具有与内源性SIRPa竞争结合CD47的能力，从而允许吞噬作用，并最终增加CD47+癌细胞耗竭的速率。这些药物虽然具有SIRPαFc效应，但在体内显示出与基于SIRPaFc的药物所显示的活性完全不同的活性。例如，后者显示出对红细胞的可忽略的结合，而CD47抗体中的相反特性产生了需要适应施用后药物“下沉”的策略。还提出了其他试剂用于阻断CD47/SIRPa轴。这些包括CD47Fc蛋白(参见ViralLogic的WO2010/083253)和SIRPa抗体，如UHN的WO2013/056352、Stanford的WO2016/022971、Eberhard的US6913894和其他地方所述。这些药物发挥作用的机制尚不完全清楚。据信，直接从CD47信号传导的抑制实现了益处。然而，巨噬细胞也可能以某种方式合作以促进癌细胞耗竭。CD47阻断方法在癌症治疗方面显示出巨大的希望。提供改善这些药物作用的方法和手段，特别是改善SIRPαFc药物的作用将是有用的。
技术实现思路
已经确定当接受者与一种或多种作为巨噬细胞刺激剂的药剂组合治疗时，SIRPαFc药物的抗癌作用增强。在实施方案中，如此刺激的内源性巨噬细胞是肿瘤相关巨噬细胞(TAM)。因此，在一个方面，提供了用于在有此需要的受试者中消耗CD47+疾病细胞的方法，包括向受试者施用(1)SIRPaFc作为CD47阻断药物，和(2)有效激活内源性巨噬细胞的巨噬细胞刺激剂，从而增强SIRPaFc药物的抗癌活性。在某些方面，巨噬细胞刺激剂是支持或有利于巨噬细胞形成或积累的巨噬细胞刺激剂，在Fc受体类型的情况下巨噬细胞是CD64+。在其他方面，巨噬细胞刺激剂是支持形成具有M1型或M2c型的巨噬细胞的巨噬细胞刺激剂。在其他方面，巨噬细胞刺激剂是使M0、M2a和M2b型巨噬细胞极化成M1和/或M2c巨噬细胞的巨噬细胞刺激剂。在相关方面，提供了SIRPαFc药物与巨噬细胞刺激剂组合的用途，所述巨噬细胞刺激剂有效调节内源性巨噬细胞(包括TAMS)的活性和/或表型，从而消耗有此需要的受试者中的CD47+疾病细胞。另一方面，提供了用于在有此需要的受试者中消耗CD47+疾病细胞的药物组合，该组合包含SIRPαFc药物与巨噬细胞刺激剂的组合。在实施方案中，所述组合作为离散和单独配制的化合物的物理组合提供(例如试剂盒)，并提供教导其在本文所述的治疗方法中使用的说明书。在实施方案中，巨噬细胞刺激剂选自干扰素-γ(IFNγ)，干扰素α如干扰素-α2a(IFNα-2a)脂多糖(LPS)和白细胞介素如白细胞介素1β，白细胞介素4和白细胞介素10(IL-10)，集落刺激因子如M-CSF和GM-CSF，转化生长因子β(TGFβ)，Toll样受体(TLR)配体，热聚集的人γ球蛋白(HAGG)，以及其任何两种或多种的混合物。现在参考附图更详细地描述本专利技术的这些和其他方面，其中：附图说明图1显示SIRPaFc(SEQIDNO：3，TTI-621)通过体外人PBMC产生的6种不同巨噬细胞亚群增加肿瘤细胞的吞噬作用；图2A显示了在体外由人PBMC产生的6种不同巨噬细胞亚群中FcγRs(CD16、CD32、CD64)的相对表达。图2B显示6种不同巨噬细胞亚群的CD64水平与SIRPaFc的吞噬活性之间的相关性；图3A-3C显示M0、M2a和M2b巨噬细胞对SIRPaFc(SEQIDNO：3)的吞噬反应通过细胞因子和Toll样受体激动剂的再极化进一步增加；图4显示了用细胞因子和Toll样受体激动剂再极化后M0、M2a和M2b巨噬细胞的FcγR表达的变化。最值得注意的是CD64表达的变化；和图5A-5C显示用SIRPaFc(SEQIDNO：3)与干扰素γ组合治疗的小鼠中的肿瘤生长。具体实施方式本专利技术提供了一种用于治疗具有癌细胞和具有CD47+表型的肿瘤的受试者的改进方法。在该方法中，受试者接受SIRPaFc和巨噬细胞刺激剂的组合。结合起来，该组合的抗癌作用优于单独任一种药剂的作用。特别是当药物是具有SEQIDNO：3的SIRPaFc药物时，认为导致该改善。因此，在本专利技术中，治疗方法结合了SIRPaFc药物和巨噬细胞刺激剂。具有SIRPαFc活性的药物是当CD47与巨噬细胞呈递的SIRPa相互作用时干扰信号传递的药剂。该性质存在于各种形式的SIRPaFc药物中。SIRPαFc药物基于人SIRPa的细胞外区域。它们至少包含足以赋予有效的CD47结合亲和力和特异性的细胞外区域的区域。一些SIRPaFc药物在文献中有描述，包括Novartis的WO2010/070047和Stanford的WO2013/109752中提到的那些，以及延龄草疗法公司(TrilliumTherapeutics)的WO2014/094122，它们全部通过引用整体并入本文。在SIRPaFc药物中，SIRPa的CD47结合区与抗体恒定结构域(Fc)偶联，以形成SIRPaFc融合体。更具体地，药物合适地包含人SIRPα蛋白的细胞外部分，其形式为直接或间接与抗体或Fc(可结晶的片段)恒定区融合。除非另有说明，否则如本文所用的术语“人SIRPα”是指野生型、内源性、成熟形式的人SIRPα。在人类中，SIRPα本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于在有需要的受试者中消耗CD47+疾病细胞的方法，包括给所述受试者施用SIRPαFc药物和巨噬细胞刺激剂。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.04.15 US 62/322,9341.一种用于在有需要的受试者中消耗CD47+疾病细胞的方法，包括给所述受试者施用SIRPαFc药物和巨噬细胞刺激剂。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述巨噬细胞刺激剂促进形成是M1或M2c的巨噬细胞的形成。3.根据权利要求1所述的方法，其中所述巨噬细胞刺激剂是TLR激动剂。4.根据权利要求3所述的方法，其中所述TLR激动剂选自脂多糖(LPS)、雷西莫特和poly(I：C)。5.根据权利要求3所述的方法，其中所述TLR激动剂是poly(I：C)。6.根据权利要求1所述的方法，其中所述巨噬细胞刺激剂包括选自巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、热聚合γ球蛋白(HAGG)、肿瘤坏死因子α(TNFα)和转化生长因子β(TGFβ)的至少一种蛋白质。7.根据权利要求1所述的方法，其中所述巨噬细胞刺激剂包括选自干扰素γ和干扰素α的干扰素。8.根据权利要求1所述的方法，其中所述巨噬细胞刺激剂包括选自IL-1β、IL-4和IL-10以及它们的混合物的白细胞介素。9.根据权利要求1所述的方法，其中在施用所述SIRPαFc药物之前施用所述巨噬细胞刺激剂，从而当暴露于所述SIRPαFc药物时使内源性巨噬细胞激活或极化。10.根据权利要求1-9所述的方法，其中所述SIRPαFc药物包括基于IgG1的Fc。11.根据权利要求1-9所述的方法，其中所述SIRPαFc药物包括基于IgG4的Fc。12.根据权利要求10所述的方法，其中所述SIRPαFc药物包括SEQIDNO：3的氨基酸序列。13.根据权利要求11所述的方法，其中所述SIRPαFc药物包括SEQIDNO：8的氨基酸序列。14.根据权利要求1-9所述的方法，其中所述SIRPαFc药物包括SIRPα的CD47结合区，其包含选自以下的一个或多个氨基酸取代：L4V/I、V6I/L、A21V、V27I/L、131T/S/F、E47V/L、K53R、E54Q、H56P/R、S66T/G、K68R、V92I、F94V/L、V63I、和F103V。15.在组合中，有效用于消耗CD47+疾病细胞的SIRPαF...

【专利技术属性】
技术研发人员：G·H·Y·林，N·N·威勒，L·D·S·约翰逊，M·M·翁，R·A·优格，
申请(专利权)人：延龄草疗法有限公司，
类型：发明
国别省市：加拿大,CA