病原体检测方法技术

本发明专利技术提供了一种体外检测生物样品中以霉菌硫醇形式存在的分枝杆菌特异性代谢物的方法，包括以下步骤：通过将生物样品与酶溶液混合来制备反应混合物，所述酶溶液含有反应缓冲液、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)和甲醛依赖性霉菌硫醇脱氢酶(FD‑MDH)；通过FD‑MDH与如果存在于生物样品中的霉菌硫醇形式的预定量的分枝杆菌特异性代谢物的相互作用，允许在反应混合物中还原NAD以产生NADH；和检测样品中的还原型NAD(NADH)，表明生物样品中存在霉菌硫醇，并因此表明生物样品来源中的分枝杆菌感染。

【技术实现步骤摘要】
病原体检测方法
本专利技术涉及用于检测生物样品中的分枝杆菌(Mycobacterium)特异性代谢物的方法和试剂盒。
技术介绍
与结核分枝杆菌(Mycobacteriumtuberculosis)相关的分枝杆菌疾病特别是肺结核(“TB”)每年导致超过一百万人死亡；死亡率与HIV感染的情况特别相关。对分枝杆菌感染的早期检测和阳性识别是治疗该疾病的关键组成部分，由于分枝杆菌可以通过气溶胶滴传播，因此在活动性感染的情况下具有高的传播率。此外，目前已知结核分枝杆菌的多重耐药性菌株，包括多重耐药性(MDR)菌株，需要及时识别以确保进行正确的治疗过程。诊断分枝杆菌感染的常用方法是通过直接显微镜和培养检测痰中的耐酸细菌。尽管使用抗酸染色液(Ziehl-Neelsen)(ZN)染色的显微镜检测TB快速且便宜，但是当正确完成时，与痰培养相比，仅能检测所有具有肺结核的成人的60-70％。然而实际上，这些数字要低得多。培养目前被列为诊断TB的“黄金标准”，目前在所有发展中国家都被推荐用于此目的。但是，培养也具有局限性，主要是诊断的时间，即2-8周。用于基因分型分析痰中细菌含量的分子生物学技术涉及繁琐的样品本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种体外检测生物样品中以霉菌硫醇形式存在的分枝杆菌特异性代谢物的方法，包括以下步骤：‑通过将生物样品与酶溶液混合来制备反应混合物，所述酶溶液含有反应缓冲液、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)和甲醛依赖性霉菌硫醇脱氢酶(FD‑MDH)；‑通过FD‑MDH与如果存在于生物样品中的霉菌硫醇形式的预定量的分枝杆菌特异性代谢物的相互作用，允许在反应混合物中还原NAD以产生NADH；和‑检测样品中的还原型NAD(NADH)，表明生物样品中存在霉菌硫醇，并因此表明生物样品来源中的分枝杆菌感染。

【技术特征摘要】
2017.06.15 NL 20190741.一种体外检测生物样品中以霉菌硫醇形式存在的分枝杆菌特异性代谢物的方法，包括以下步骤：-通过将生物样品与酶溶液混合来制备反应混合物，所述酶溶液含有反应缓冲液、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)和甲醛依赖性霉菌硫醇脱氢酶(FD-MDH)；-通过FD-MDH与如果存在于生物样品中的霉菌硫醇形式的预定量的分枝杆菌特异性代谢物的相互作用，允许在反应混合物中还原NAD以产生NADH；和-检测样品中的还原型NAD(NADH)，表明生物样品中存在霉菌硫醇，并因此表明生物样品来源中的分枝杆菌感染。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述霉菌硫醇由结核分枝杆菌产生。3.根据权利要求1或2...

【专利技术属性】
技术研发人员：C·J·F·陶特，D·T·洛茨，
申请(专利权)人：西北大学，
类型：发明
国别省市：南非,ZA