一种快速灵敏检测河豚毒素TTX的方法技术

本发明专利技术属于生物检测技术领域，为了解决现有测定方法存在的测定时间长、反应灵敏度低、选择性差、以及测定成本高昂等问题，提供了一种快速灵敏检测河豚毒素TTX的方法，将河豚毒素核酸适配体、小檗碱加入到磷酸缓冲溶液中，以小檗碱为荧光探针，河豚毒素核酸适配体为识别单元，加入待测物河豚毒素后诱导核酸适配体结构改变，核酸适配体与荧光探针小檗碱的结合受到影响，引起体系荧光信号改变，检测体系荧光强度值，计算获得待测物含量。简便、成本低、并且灵敏度高、选择性好，可用于实际生物样品的检测具有潜在的应用价值。

【技术实现步骤摘要】
一种快速灵敏检测河豚毒素TTX的方法
本专利技术属于生物检测
，具体涉及一种快速灵敏检测河豚毒素TTX的方法，利用小檗碱作为荧光探针检测TTX，在检测物TTX存在时诱导适配体结构的变化与荧光探针结合，实现荧光信号的变化。
技术介绍
河豚毒素(tetrodotoxin，TTX)是一种毒性很强的小分子生物碱。其分子式为C11H17O8N3，分子量为319，该物质化学性质稳定，对热、日光、酶类、盐类及酸稳定，易溶于稀醋酸中。TTX的化学结构式如图1所示，为氨基全氢喹唑啉型化合物，最早是从河豚鱼中分离得到，近年来还发现河豚毒素不仅存在于河豚属的鱼类，还存在于虾虎鱼、章鱼、海星、蟹类以及腹足类，甚至还有鲎等众多的海洋生物中。河豚毒素毒性极强，食用0.5mg就可致人死亡，TTX通过与钠离子通道受体结合，阻断电压依赖性钠通道，从而阻滞动作电位导致与之相关的生理活动障碍，使人感觉神经麻痹，四肢瘫痪，呼吸困难，最后因呼吸抑制而死亡。目前还没有有效的解毒药。介于河豚毒素的严重危害，且化学性质稳定一般的烹饪手段并不能降解，有必要建立一种简便、快速高效检测河豚毒素的方法。核酸适配体是指能够通过空间构型本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种快速灵敏检测河豚毒素TTX的方法，其特征在于：将河豚毒素核酸适配体、小檗碱加入到磷酸缓冲溶液中，以小檗碱为荧光探针，河豚毒素核酸适配体为识别单元，加入待测物河豚毒素后诱导核酸适配体结构改变，核酸适配体与荧光探针小檗碱的结合受到影响，引起体系荧光信号改变，检测体系荧光强度值，计算获得待测物含量。

【技术特征摘要】
1.一种快速灵敏检测河豚毒素TTX的方法，其特征在于：将河豚毒素核酸适配体、小檗碱加入到磷酸缓冲溶液中，以小檗碱为荧光探针，河豚毒素核酸适配体为识别单元，加入待测物河豚毒素后诱导核酸适配体结构改变，核酸适配体与荧光探针小檗碱的结合受到影响，引起体系荧光信号改变，检测体系荧光强度值，计算获得待测物含量。2.根据权利要求1所述的一种快速灵敏检测河豚毒素TTX的方法，其特征在于：所述河豚毒素核酸适配体为：TTX-aptamer：5’-tttttaaagtgtgcccacggagccgacagg-3’。3.根据权利要求1或2所述的一种快速灵敏检测河豚毒素TTX的方法，其特征在于：具体步骤如下：（1）制作标准曲线：将氯化镁溶液、核酸适配体、荧光探针小檗碱分别加入磷酸盐缓冲溶液中，控制体系pH值为7.5，氯化镁浓度为2.0～2.5mM，磷...

【专利技术属性】
技术研发人员：兰艺凤，卫艳丽，宋秀丽，董川，
申请(专利权)人：山西大学，
类型：发明
国别省市：山西,14