铜绿假单胞菌噬菌体尾丝蛋白用于制备细菌检测试剂的用途制造技术

本发明专利技术涉及铜绿假单胞菌噬菌体尾丝蛋白用于制备细菌检测试剂的用途，属于微生物检测技术领域。一株铜绿假单胞菌噬菌体，保藏号为CGMCC No.15569。所述的铜绿假单胞菌噬菌体尾丝蛋白P069用于制备细菌检测试剂的用途。本发明专利技术的有益效果在于：提供了一种能特异性识别铜绿假单胞菌的尾丝蛋白P069，将其作为分子识别试剂，特异性地捕获铜绿假单胞菌，再结合其他分析技术，针对铜绿假单胞菌全细胞进行检测；该分子识别试剂具有检测快速、方便、准确、特异、灵敏、稳定的优点，有望应用于铜绿假单胞菌的现场检测和快速筛查，能够为临床诊断、食品安全和环境检测等领域检测铜绿假单胞菌提供有力的技术支持平台。

Application of Pseudomonas aeruginosa Phage Tail Filament Protein in Preparing Bacterial Detection Reagent

The invention relates to the use of Pseudomonas aeruginosa bacteriophage tail filament protein for preparing bacterial detection reagent, belonging to the technical field of microbial detection. A Pseudomonas aeruginosa bacteriophage, preservation number CGMCC No. 15569. The Pseudomonas aeruginosa phage tail filament protein P069 is used for preparing bacterial detection reagent. The beneficial effect of the present invention is to provide a tail filament protein P069 which can specifically recognize Pseudomonas aeruginosa, and use it as a molecular recognition reagent to specifically capture Pseudomonas aeruginosa, and combine other analytical techniques to detect Pseudomonas aeruginosa whole cell. The molecular recognition reagent has the advantages of fast, convenient, accurate, specific, sensitive and stable detection. It is expected to be used in the field detection and rapid screening of Pseudomonas aeruginosa, and provide a powerful technical support platform for the detection of Pseudomonas aeruginosa in clinical diagnosis, food safety and environmental testing.

【技术实现步骤摘要】
铜绿假单胞菌噬菌体尾丝蛋白用于制备细菌检测试剂的用途
本专利技术涉及铜绿假单胞菌噬菌体尾丝蛋白用于制备细菌检测试剂的用途，属于微生物检测
，尤指以铜绿假单胞菌噬菌体尾丝蛋白P069作为铜绿假单胞菌的分子识别试剂，将其应用到铜绿假单胞菌的检测的技术。
技术介绍
铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa)是一种发酵型革兰阴性致病菌，是三大条件致病菌之一，在肺囊性纤维化病人中致死率相当高，是医院院内感染和新生儿重症监护感染的主要原因。因此，建立快速、方便、灵敏的铜绿假单胞菌检测方法，对于人体健康、疾病治疗有着重要意义。铜绿假单胞菌的现有检测方法中，主要包括传统培养、聚合酶链式反应(PCR)、免疫分析等方法。作为“金标准”的传统培养方法准确、灵敏，但耗时、费力；基于致病菌遗传物质的PCR方法能显著地缩短地检测时间，灵敏度高，但PCR需要熟练的操作技巧和核酸提取步骤，并且在苛刻的环境条件下，酶的活性会被抑制；免疫分析方法基于致病菌的抗原成份与抗体结合，具有快速、高特异性等特点，但抗体存在批次差异和交叉免疫原性。因此，寻找快速、特异、批次稳定、鉴别铜绿假单胞菌检测方法迫在眉本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一株铜绿假单胞菌噬菌体，其特征在于：该铜绿假单胞菌噬菌体，菌株名为PAP1，保藏号为CGMCC No.15569，分类命名为铜绿假单胞菌烈性噬菌体；该铜绿假单胞菌噬菌体于2018年7月30日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。

【技术特征摘要】
1.一株铜绿假单胞菌噬菌体，其特征在于：该铜绿假单胞菌噬菌体，菌株名为PAP1，保藏号为CGMCCNo.15569，分类命名为铜绿假单胞菌烈性噬菌体；该铜绿假单胞菌噬菌体于2018年7月30日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。2.权利要求1所述的铜绿假单胞菌噬菌体用于制备细菌检测试剂的用途。3.铜绿假单胞菌噬菌体尾丝蛋白P069，其特征在于：来源于铜绿假单胞菌噬菌体CGMCCNo.15569，其核酸序列如序列SEQIDNo：1所示。4.根据权利要求3所述的铜绿假单胞菌噬菌体的尾丝蛋白P069，其特征在于：其氨基酸序列如序列SEQIDNo：2所示。5.根据权利要求3或4所述的铜绿假单胞菌噬菌体的尾丝蛋白P069用于制备细菌检测试剂的用途。6.一种检测铜绿假单胞菌的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)将铜绿假单胞菌菌悬液标准品用捕获缓冲液稀释制成铜绿假单胞菌菌液，把铜绿假单胞菌尾丝蛋白P069作为特异性分子捕获试剂，当P069特异性捕获铜绿假单胞菌后，用洗涤液清洗，再利用单位点识别生物发光法或双位点识别夹心荧光法，记录光信号，以发光强度对铜绿假单胞菌浓度作图，绘制工作曲线；(2)利用铜绿假单胞菌尾丝蛋白P069特异性地捕获向待测样品中的铜绿假单胞菌，用洗涤液清洗，再结合单位点识别生物发光法或双位点识别夹心荧光法，记录光信号，根据发光强度和步骤(1)绘制的工作曲线求得待测样品中铜绿假单胞菌的浓度。7.根据权利要求6所述的一种检测铜绿假单胞菌的方法，其特征在于：所述方法为单位点识别生物发光法。8.根据...

【专利技术属性】
技术研发人员：付志锋，何勇，卢曙光，
申请(专利权)人：西南大学，
类型：发明
国别省市：重庆,50