The present invention relates to a method for secreting and expressing hypersensitive proteins using Bacillus brevis. The method comprises the following steps: (1) inserting the coding gene of the hypersensitive protein into the plasmid hosted by Bacillus brevis; (2) transferring the plasmid inserted with the hypersensitive protein into the host of Bacillus brevis; (3) fermenting and culturing the Bacillus brevis; (4) isolating and extracting the supersensitive protein. Sensitive protein.
【技术实现步骤摘要】
使用短短芽孢杆菌分泌表达超敏蛋白的方法
本专利技术属于生物
，具体而言，涉及一种使用短短芽孢杆菌分泌表达超敏蛋白的方法。
技术介绍
化肥和农药是提高作物产量和防治病虫害的主选产品，但同时产生了环境、能源以及成本等方面的问题，成为现在困扰世界各国的经济与社会发展的重大，严重制约着农业的可持续性发展。而利用来自微生物或真菌的蛋白质制备的生物制品(包括生物肥料和生物农药)是当代作物优质、高效和无公害生产的主要措施。近年来，国内外在此方面已开展了大量的科学研究。早期的微生物蛋白主要是来自苏云金芽孢杆菌的杀虫晶体蛋白(ICP),新型微生物蛋白主要是蛋白激发子类物质，目前研究报道的具有代表性的新型微生物蛋白主要有过敏蛋白(Harpin)、隐地蛋白(Cryptogein)和激活蛋白(Activator)，这些蛋白质不直接杀灭害虫和病原物，也不直接提供营养物质，而是在促进植物生长发育和对营养物质的吸收、增强植物的广谱抗病性(包括对多种细菌、真菌和病毒的抗性)、增强植物的驱虫性、增强植物的抗逆性(植物对干旱、严寒、盐碱等不良环境的耐受性)、延长作物产品的储存时间、对盆花和苗木...
【技术保护点】
1.一种使用短短芽孢杆菌(Brevibacillus choshinensis)作为宿主菌，发酵培养生产超敏蛋白的方法，所述的方法包括如下步骤，(1)将所述超敏蛋白的编码基因插入到以短短芽孢杆菌为宿主的质粒中，(2)将插入了所述超敏蛋白的质粒转入短短芽孢杆菌宿主中，(3)发酵培养所述短短芽孢杆菌，(4)自发酵液中分离浓缩所述超敏蛋白。
【技术特征摘要】
1.一种使用短短芽孢杆菌(Brevibacilluschoshinensis)作为宿主菌，发酵培养生产超敏蛋白的方法，所述的方法包括如下步骤，(1)将所述超敏蛋白的编码基因插入到以短短芽孢杆菌为宿主的质粒中，(2)将插入了所述超敏蛋白的质粒转入短短芽孢杆菌宿主中，(3)发酵培养所述短短芽孢杆菌，(4)自发酵液中分离浓缩所述超敏蛋白。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述的超敏蛋白为来源于菌株Erwiniaamylovora的GeneBank编号为M92994.3的harpinEa蛋白；步骤(1)所述的质粒为pNC-hisT质粒。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)所述的将质粒转入短短芽孢杆菌宿主中的方法为电击转化方法。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)所述的发酵培养的培养条件为：T2培养基、温度30～33℃、转速120～200rpm、发酵培养时间24～60h，优选的，所述发酵培养条件是：T2培养基、...
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