The invention discloses a composite siRNA nanocarrier, including an exosome lipid membrane derived from autologous tumor cells and a cationic serum albumin encapsulated in the exosome lipid membrane containing siRNA. The invention also discloses the preparation method and application of the composite siRNA nanocarrier. The invention has the advantages of high transfection, specific targeting of cancer metastasis tissue, good biocompatibility, excellent stability and no immunogenicity.
【技术实现步骤摘要】
复合siRNA纳米载体及其制备方法和应用
本专利技术涉及生物医学领域。更具体地说，本专利技术涉及一种复合siRNA纳米载体及其制备方法和应用。
技术介绍
RNA干扰是指由于目标mRNA降解或翻译抑制所引起的转录后基因沉默。siRNA可以通过RNA干扰，高效、特异地阻断体内同源基因表达，促使同源mRNA降解，诱使细胞表现出特定基因缺失的表型并且沉默某一癌基因即RNAi法，这在几乎所有肿瘤模型中都已证明具有很好的抑癌作用。但裸siRNA在生物体内容易被核酶(RNase)降解、半衰期短、转染效率低，因而如何高效地把这种特异性沉默的siRNA在不损伤其他正常组织及siRNA的前提下导入到靶器官中去，成为肿瘤基因治疗的关键。外泌体(exosome)是由大多数生物细胞分泌的一种生物纳米粒子，直径约30至100nm，具有典型的脂质双分子层膜结构。外泌体具有类似于病毒的转染机制，在体内具有较高的转染效率，且它不仅具有细胞间信息传递的作用还能被开发运用于各类物质(包括siRNA)的细胞间传输。与传统的药物载体相比，外泌体作为一种新型的，天然药物载体，显示诸如生物相容性好、生物可降解...
【技术保护点】
1.复合siRNA纳米载体，其特征在于，包括自体肿瘤细胞来源的外泌体脂质膜和包裹于外泌体脂质膜内的载有siRNA的阳离子化血清白蛋白。
【技术特征摘要】
1.复合siRNA纳米载体，其特征在于，包括自体肿瘤细胞来源的外泌体脂质膜和包裹于外泌体脂质膜内的载有siRNA的阳离子化血清白蛋白。2.如权利要求1所述的复合siRNA纳米载体，其特征在于，提取自体肿瘤细胞来源的外泌体的方法为：建立肿瘤原位模型，切取肿瘤细胞进行原代培养，再用差速离心法、超滤离心法、磁珠免疫法、PEG-base沉淀法、试剂盒提取法其中之一提取外泌体。3.如权利要求2所述的复合siRNA纳米载体，其特征在于，分离自体肿瘤细胞来源的外泌体脂质膜的方法为：先将自体肿瘤细胞来源的外泌体反复冻融，再采用超声粉碎法或蔗糖梯度离心法分离出外泌体脂质膜。4.如权利要求1所述的复合siRNA纳米载体，其特征在于，阳离子化血清白蛋白的制备过程为：称取血清白蛋白溶解于超纯水中，加入乙胺或乙二胺，再用稀盐酸调节pH，将碳二亚胺盐酸盐加入到血清白蛋白与乙胺或乙二胺的混合溶液中，随后加入N-羟基硫代琥珀酰亚胺进行反应，接着加入醋酸-醋酸钠缓冲液终止反应，最后用透析袋透析，并将透析液冷冻干燥。5.如权利要求4所述的复合siRNA纳米载体，其特征在于，载有siRNA的阳离子化血清白蛋白的制备过程为：将阳离子化血清白蛋白...
【专利技术属性】
技术研发人员：朱红艳，赵刘婉，韩伟莉，
申请(专利权)人：南通大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32
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