The invention provides primers and methods for detecting the transcriptional level of OBP gene in Lotus straightbreast beetle. The primer sequence is shown in SEQ ID NO.1 2. The invention establishes a fluorescence quantitative PCR method for detecting the expression level of OBP gene after the female and male of Lotus straightbreast beetle feeding on different CO2 concentration cultured Lotus straightbreast beetle, and carries out transcription sequencing, and the fluorescence quantitative expression trend and transduction of OBP gene. The trend of expression of transcripts was compared, which laid a foundation for the study of defense mechanism and transcription level of OBP gene in Lotus straightbreast jumper under environmental stress.
【技术实现步骤摘要】
检测莲草直胸跳甲OBP基因转录水平的引物及方法
本专利技术涉及检测莲草直胸跳甲OBP基因转录水平的引物及方法,属于生物
技术介绍
莲草直胸跳甲属鞘翅目,叶甲科,是空心莲子草的主要生防天敌之一。GeorgeVogt于1962年首次发现了莲草直胸跳甲对空心莲子草有很好的控制作用。其后,莲草直胸跳甲在美国、澳大利亚等地被广泛应用于空心莲子草的控制,并取得了较好的防治效果。我国于1986年从美国引进莲草直胸跳甲,并应用于空心莲子草的生物防治,在四川、浙江、福建、广西等地取得一定的成功。昆虫经过长期的进化,演化出复杂、灵敏且具有选择性的化学感受机制。昆虫依靠化学感受来完成与外界化学信息的交流,通过识别这些信息来指导昆虫的取食、交配、雌性产卵以及躲避天敌等行为,昆虫对信息化合物的识别通常是通过昆虫的化学感器。Vogt等首次在多音天蚕蛾的雄虫触角中发现了气味结合蛋白,这个结合蛋白可以与雌蛾性信息素特异结合,被称为性信息素结合蛋白PBPs。Breer发现在其触角中也具备可以结合普通气味的蛋白分子,称为普通气味结合蛋白(Generalodorantbindingprote ...
【技术保护点】
1.一种检测莲草直胸跳甲OBP基因转录水平的荧光定量PCR引物,其特征在于:包括符合荧光定量PCR反应特点的上下游引物:OBP‑F:5`‑GCGAGCTTAAAGTGTACGGTTAT‑3`,OBP‑R:5`‑GAATGCACGAGTCATCAGAAGAA‑3`。
【技术特征摘要】
1.一种检测莲草直胸跳甲OBP基因转录水平的荧光定量PCR引物,其特征在于:包括符合荧光定量PCR反应特点的上下游引物:OBP-F:5`-GCGAGCTTAAAGTGTACGGTTAT-3`,OBP-R:5`-GAATGCACGAGTCATCAGAAGAA-3`。2.一种采用权利要求1所述引物检测莲草直胸跳甲OBP基因转录水平的荧光定量PCR方法,其特征在于:按如下步骤:(1)cDNA第一链合成:提取样本的总RNA并纯化,采用反转录试剂盒得到以提取的RNA为模板反转录得到的cDNA;(2)以下述引物进行常规PCR检测该基因的荧光定量上下游引物:OBP-F:5`-GCGAGCTTAAAGTGTACGGTTAT-3`OBP-R:5`-GAATGCACGAGTCATCAGAAGAA-3`以及作为内参基因的上下游引物:Tubulin-F:5`-AGATGTCCGCCACCTTCA-3`Tubulin-R:5`-GCCTCT...
【专利技术属性】
技术研发人员:郑丽祯,傅建炜,何肖云,史梦竹,李建宇,林凌鸿,王秋月,
申请(专利权)人:福建省农业科学院植物保护研究所,
类型:发明
国别省市:福建,35
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