The invention discloses an efficient hydrophobic interaction chromatographic medium with biamine as a ligand. The structure of the medium is as follows:
【技术实现步骤摘要】
一种以卞胺为配基的高效疏水相互作用色谱介质及其制备方法与应用
本专利技术属于液相色谱
，具体涉及一种以卞胺为配基的高效疏水相互作用色谱介质及其制备方法，和其用于分离天然蛋白的应用。
技术介绍
天然蛋白是在自然界中存在的，不经过人工任何修饰或加工直接从天然材料中可以获得的一类蛋白。其生物安全性高，广泛地用于医药、食品等领域。例如，卵清蛋白是一种天然糖蛋白，含有386个氨基酸，相对分子质量为45KDa，其等电点为4.5。卵清蛋白无论从分子结构还是生物学功能上都与人血白蛋白非常类似，是人血白蛋白的潜在替代品。具有广泛的应用，可以经过酶水解加工成低分子活性肽具有强抗氧化活性、血管舒张活性等活性；与三价铁离子结合可作为天然载体用于开发成复合补铁剂。此外，细胞色素C（Cyt-c）也是从天然材料中提取的一种天然蛋白，临床上用于各种组织缺氧急救的辅助治疗，如一氧化碳中毒、催眠药中毒、氰化物中毒、新生儿窒息、严重休克期缺氧、脑血管意外、脑震荡后遗症、麻醉及肺部疾病引起的呼吸困难和各种心脏疾患引起的心肌缺氧的治疗。与卵清白蛋白不同，分子量较小约为13KDa，等电点10.6左右。...
【技术保护点】
1.一种以卞胺为配基的高效疏水相互作用色谱介质，其特征在于：所述高效疏水相互作用色谱介质的结构式如下：
【技术特征摘要】
1.一种以卞胺为配基的高效疏水相互作用色谱介质，其特征在于：所述高效疏水相互作用色谱介质的结构式如下：。2.权利要求1所述高效疏水相互作用色谱介质的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：（1）硅胶活化；（2）制备环氧化硅胶：按照1g：50mL将步骤（1）得到的活化硅胶加入无水甲苯中，超声处理3-5min，然后在搅拌条件下向其中缓慢加入硅烷偶联剂，所述活化硅胶和硅烷偶联剂的质量体积比为1g:1mL~1g:2mL，升温至90-120℃，回流并搅拌9-12h，然后用甲醇、水、甲醇洗涤抽滤，重复洗涤抽滤5次，真空干燥，即得到环氧硅胶；（3）环氧开环制备高效疏水相互作用色谱介质：按照体积比1:200，将苄胺加入干燥的1，4-二氧六环溶液中，超声处理3-5min，向其中加入环氧硅胶，所述环氧化硅胶和卞胺的质量比为1:2~1:4，超声处理3-5min，然后在80℃下回流并搅拌7h，然后用甲醇、水、甲醇洗涤抽滤，重复洗涤抽滤5次，真空干燥，即可。3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：步骤（1）所述硅胶活化的步骤具体如下：按照质量体积比1g:10mL~1g:20mL将未活化的硅胶加入质量浓度为20%的盐酸溶液中，在120℃下回流并搅拌2-6h，用蒸馏水洗涤抽滤至中性，在100~150℃真空干燥箱中干燥12~24h，即得到活化硅胶。4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：所述未活化的硅胶孔径为80~200Å、粒径为5~10μm的球状硅胶。5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：步骤（2）所述硅烷偶联剂为γ-缩水甘油醚氧丙基三甲氧基硅烷。6.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：步骤（2）和步骤（3）中真空干燥的条件均为：在60℃下真空干燥12h。7.权利要求1所述高效疏水相互作用色谱介质的应用，其特征在于：所述应用为将所述高效...
【专利技术属性】
技术研发人员：王骊丽，王志颖，李维敏，任怡，王思尧，张念喆，
申请(专利权)人：西北大学，
类型：发明
国别省市：陕西,61
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