一种基于检测HIV基因的荧光探针制造技术

本发明专利技术涉及一种基于检测HIV基因的荧光探针。该探针包含两种核酸链：一种是与目标物HIV‑DNA互补结合链(cDNA)；另一种是荧光探针的合成链(P)。聚AT的双链DNA(dsDNA)中包含富G序列，富G序列在K

【技术实现步骤摘要】
一种基于检测HIV基因的荧光探针
本专利技术涉及一种基于检测HIV基因的荧光探针，属于分子检测领域。
技术介绍
人类免疫缺陷病毒(HIV)感染并破坏宿主的免疫系统时，免疫系统的功能会逐渐丧失并伴随着许多疾病的发生，严重时还会导致死亡。因此，精确的检测HIV基因对于感染者的及早发现与及时治疗具有重要的意义。目前，HIV基因的检测方法层出不穷，但还存在一些不足之处，例如，比色法灵敏度较低。电化学法重现性、选择性差，，其应用受到限制。传统荧光法一般需要将探针链两端标记，或者利用荧光共振能量转移(FRET)机理使染料基团发生荧光淬灭。该方法实验体系复杂，费用昂贵。后来，Werner等人发现当AgNCs在接近富含鸟嘌呤(G-rich)的DNA序列时，两者会相互作用，AgNCs较弱的荧光会出现明显增强[Yeh,H.C.；Sharma,J.；Han,J.J.；Martinez,J.S.；Werner,J.H.NanoLett.2010,10,3106-3110]。这个重要的发现被不断改进，并得到了广泛的应用。然而，该方法一般需要较长的合成时间且需要暗室操作，使其应用受到了严重的限制。本方案发展了一本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于检测HIV基因的荧光探针，其特征在于以下合成步骤：(1)将0.5μM含有聚AT的dsDNA和1μM cDNA加入到10mM的MOPS缓冲液中(150mM NaCl，pH 7.5)。(2)将混合溶液在90℃恒温水浴锅中加热约10分钟，然后缓慢冷却至室温。(3)在杂交产物中混入500μM CuSO4和2mM L‑抗坏血酸(AA)，继而在25℃水浴锅中孵育5分钟即可形成。

【技术特征摘要】
1.一种基于检测HIV基因的荧光探针，其特征在于以下合成步骤：(1)将0.5μM含有聚AT的dsDNA和1μMcDNA加入到10mM的MOPS缓冲液中(150mMNaCl，pH7.5)。(2)将混合溶液在90℃恒温水浴锅中加热约10分钟，然后缓慢冷却至室温。(3)在杂交产物中混入500μMCuSO4和2mML-抗坏血酸(AA)，继而在25℃水浴锅中孵育5分钟即可形成。2.根据权利要求1所述的一种基于检测HIV基因的荧光探针，其特征在于：所有的检测实验在10mM的MOPS缓冲液中进行(150mMNaCl，pH7.5)。3.根据权利要求1所述的一种基于检测HIV基因的荧光探针，其特征在于检测方法为：在最佳优化条件...

【专利技术属性】
技术研发人员：蔡昌群，杨军玉，龚行，韩云鹏，
申请(专利权)人：湘潭大学，
类型：发明
国别省市：湖南,43