经体外培养的人源性肿瘤异种移植模型的建立方法技术

本发明专利技术涉及一种人源性异种移植模型研究领域，尤指经体外培养的人源性肿瘤异种移植模型的建立方法，建立方法包括以下步骤：1）收集肿瘤组织标本；2）将肿瘤组织置于培养液中；3）完成低温运输及处理准备；4）在无菌操作台内将肿瘤组织切成米粒大小；5）肿瘤组织清洗，然后置于48孔板中培养；6）通过原位末端标记法检测组织凋亡情况；7）选取免疫缺陷型NCG小鼠经麻醉与皮肤处理；8）将培养的肿瘤组织植入小鼠肾包膜内；9）经过3个月后完成建模；本发明专利技术为异种移植模型选择肿瘤组织块进行建模，有利于保留原发肿瘤的组织病理及遗传学特性；且获取的肿瘤组织先进行体外培养，有利于肿瘤分型和临床实践；添加PD98059和人工基质胶可以大幅度减少组织凋亡，有利于提高移植成功率。

【技术实现步骤摘要】
经体外培养的人源性肿瘤异种移植模型的建立方法
本专利技术涉及一种人源性异种移植模型研究领域，尤指经体外培养的人源性肿瘤异种移植模型的建立方法。
技术介绍
癌症属于世界范围内的重大公共卫生问题，其发病率和死亡率逐年增加，同时癌症病发是现今导致死亡的主要原因(SiegelRLetal.,2017)；因此在目前状况基础上，建立能够高度模拟人体内肿瘤发生发展的模型是肿瘤研究的关键一步；当前通过小鼠体内模型研究以模拟人体内肿瘤发生发展模型，而目前应用较多的小鼠体内模型包括基因工程小鼠、化学诱导模型及人源性异种移植模型，其中人源性异种移植模型(英文：patient-derivedxenografts,缩写PDX)是基于将患者的新鲜肿瘤细胞或组织通过注射、外科操作等接种到免疫缺陷小鼠体内，更能保留原发肿瘤的组织病理及遗传学特性，也从而成为肿瘤病理研究和药物筛选的重要工具(SausvilleEAetal.,2006)。根据移植部位的不同，PDX模型主要分为皮下移植、原位移植、肾包膜下移植，皮下移植一般位于小鼠双侧腹股沟或腋窝处，容易观察和定期测量肿瘤大小，但该部位缺乏血供及肿瘤-宿主间的相互作用，并本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.经体外培养的人源性肿瘤异种移植模型的建立方法，其特征在于，所述的建立方法包括以下步骤：1）收集经手术切除的肿瘤组织标本；2）将所述肿瘤组织暂时置于预冷的含抗生素的培养液中储存；3）然后于2h内完成低温运输并准备进一步处理；4）在无菌操作台内，将从步骤2）的培养液中取得的肿瘤组织切成米粒大小；5）所述肿瘤组织经含抗生素的PBS清洗，然后置于48孔板中培养；随后在48孔板中加入培养基，再添加调节激酶抑制剂PD98059；6）所述肿瘤组织通过原位末端标记法，检测组织凋亡情况；7）选取免疫缺陷型NCG(NOD‑Prkdcem26Cd52Il2rgem26Cd22/Nju)小鼠经腹腔麻醉、消毒背部皮...

【技术特征摘要】
1.经体外培养的人源性肿瘤异种移植模型的建立方法，其特征在于，所述的建立方法包括以下步骤：1）收集经手术切除的肿瘤组织标本；2）将所述肿瘤组织暂时置于预冷的含抗生素的培养液中储存；3）然后于2h内完成低温运输并准备进一步处理；4）在无菌操作台内，将从步骤2）的培养液中取得的肿瘤组织切成米粒大小；5）所述肿瘤组织经含抗生素的PBS清洗，然后置于48孔板中培养；随后在48孔板中加入培养基，再添加调节激酶抑制剂PD98059；6）所述肿瘤组织通过原位末端标记法，检测组织凋亡情况；7）选取免疫缺陷型NCG(NOD-Prkdcem26Cd52Il2rgem26Cd22/Nju)小鼠经腹腔麻醉、消毒背部皮肤处理，然后自肋脊角逐层切开暴露肾脏，揭开肾包膜；8）将培养的肿瘤组织用毛细玻璃管轻轻植入小鼠肾包膜内，缝合肌肉及皮肤；9）经过3个月后完成建模，得到所述人源性肿瘤异种移植模型。2....

【专利技术属性】
技术研发人员：黄朝峰，赵擎宇，刘忠华，尹萌，陈焕鹏，李永超，
申请(专利权)人：广州长峰生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44