用于确定流式细胞仪中的流体流的液滴延迟的方法和系统技术方案

提供用于确定流式细胞仪中的流体流的液滴延迟的方法和系统。根据某些实施方案的方法的方面包括：捕获所述流体流的图像以获得成像的流体流；识别所述成像的流体流中的分离点处的扰动；以及基于所识别的扰动来计算所述流体流的液滴延迟。还提供用于实施所述方法的系统，所述系统具有：成像传感器，所述成像传感器用于捕获所述流体流的一个或多个图像；以及处理器，所述处理器被配置成识别成像的流体流中的分离点处的扰动并且使用所述成像的流体流来计算液滴延迟。还描述非暂时性计算机可读存储介质。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于确定流式细胞仪中的流体流的液滴延迟的方法和系统相关申请的交叉引用依照35U.S.C.§119(e)，本申请要求2016年10月3日提交的美国临时专利申请第62/403,553号的申请日期的优先权；所述申请的公开内容以引用方式并入本文中。
技术介绍
使用流式细胞仪来分析流体样本中的微粒(诸如血液样本的细胞或任何其它类型的生物或化学样本中的相关微粒)并对所述微粒进行分选。在流动池内，在含微粒的流周围形成液体鞘以对流体流给予基本上均一的速率。流体流经由喷嘴离开流动池，所述喷嘴的喷嘴直径适合于所要的液流系统和分选速率。流动池以水动力使流内的微粒(例如细胞)聚集以通过照射源(例如，激光束)的中心。流体流中的相关微粒通过照射源的交叉点通常被称作审查点。在相关微粒(例如细胞)移动通过审查点时，来自照射源(例如激光器)的光会散射。所述光还可能会激发细胞流中具有荧光性质的组分，诸如已添加到流体样本并附着到某些相关细胞的荧光标记物。在通过静电方法对细胞进行分选的流式细胞仪中，所要细胞包含在带电小滴内。为了对小滴充电，流动池包括充电元件。由于细胞流在基本上向下的垂直方向上离开流动池，因此所述小滴在形成之后也在该方向上传播。当通过审查激光检测到目标微粒时，对含有目标微粒的小滴施加电荷。液滴延迟值是检测到目标微粒的激光审查点与小滴从连续的流体流分离的点之间的时间距离。在分离点以上，流体流是连续且连接的；在分离点以下，流体流是分离的，为离散小滴。一般来说，液滴延迟是细胞分选器在用审查激光检测到目标微粒之后对小滴施加电荷之前将要等待的时间量(按液滴当量计)。流体流中存在的微粒的大小的可变性或流式细胞仪部件的漂移可能会影响对流体流中的液滴是否含有相关微粒的可预测性。对含有微粒的小滴的不准确预测(例如，对错的小滴施加电荷)可能会不利于定性分析，导致不精确的细胞分选、对已分选样本的污染以及生物样本的数量损失。
技术实现思路
本公开的方面包括用于确定流式细胞仪中的流体流的液滴延迟的方法。根据某些实施方案的方法包括：捕获所述流体流的图像以获得成像的流体流；识别所述成像的流体流中的分离点处的扰动；以及基于所识别的扰动来计算所述流体流的液滴延迟。在一些实施方案中，所述扰动是所述流体流在所述分离点处展开。在其它实施方案中，所述扰动是所述流体流在所述分离点处偏转。在实施方案中，方法包括：捕获检测场中的所述流体流的一个或多个图像；以及识别所述检测场中的所述流体流中的扰动。在一些实施方案中，所述检测场包括在流体流分离点上游以及在激光照射点下游的所述流体流。根据一些实施方案，方法还包括确定产生最大振幅的所识别的扰动的液滴延迟。可以跨越一系列液滴延迟来设定所述流式细胞仪的液滴延迟，并且在每个液滴延迟时使所述分离点处的扰动视觉化以识别产生所述最大振幅的所识别的扰动的液滴延迟。在一些实施方案中，所述扰动是所述流体流在所述分离点处展开，并且所述方法包括跨越一系列液滴延迟来设定所述流式细胞仪以及识别产生所述流体流在所述分离点处的最大量的展开的液滴延迟。在其它实施方案中，所述扰动是所述流体流的偏转(即，偏离轨道)，并且所述方法包括跨越一系列液滴延迟来设定所述流式细胞仪以及识别产生相对于所述流体流的纵轴线的最大量的偏转的液滴延迟。为了确定产生最大振幅的所识别的扰动的液滴延迟，还可以应用相位掩模，诸如具有1/32液滴当量增量的相位掩模。根据本公开的某些实施方案，计算液滴延迟包括：确定产生最大振幅的所识别的扰动的液滴延迟；以及将预定的液滴当量加到产生最大振幅的所识别的扰动的所确定的液滴延迟。所得的液滴延迟将是用于特定流条件的最佳液滴延迟。举例来说，所述液滴当量可以是1/32液滴当量至1液滴当量，诸如1/2液滴当量。在某些情况中，无液滴当量加到产生最大振幅的所识别的扰动的液滴延迟。在一些实施方案中，所述预定的液滴当量是一半液滴。在其它实施方案中，计算所述流体流的液滴延迟包括在应用预定偏移时确定产生最大振幅的所识别的扰动的液滴延迟。举例来说，可以通过应用一半液滴当量偏移并且接着确定产生最大振幅的所识别的扰动的液滴延迟来计算液滴延迟。在某些实施方案中，所述方法减少在流式细胞仪的设置期间或在不同样本的分析之间对用户输入或人工调整的需要。在一些实施方案中，相关方法可以使流式细胞仪部分地或完全地自动化，使得流式细胞仪的参数(诸如液滴延迟的计算)是处理器控制的。在某些实施方案中，所述方法包括在没有任何人类输入的情况下确定流式细胞仪的液滴延迟。举例来说，方法可以包括在缺少校准微粒(例如，荧光珠)的情况下确定流体流的液滴延迟。可以响应于所确定的液滴延迟来调整流式细胞仪的参数，诸如改变对流体流施加电荷的定时、调整充电脉冲的持续时间、电荷的电压或改变流体流的流率。本公开的方面还包括用于确定流式细胞仪中的流体流的液滴延迟的系统。根据某些实施方案的系统包括：成像传感器，所述成像传感器被配置成捕获流体流的一个或多个图像；以及处理器，所述处理器具有可操作地耦接至所述处理器的存储器，其中所述存储器包括用于识别所述成像的流体流中的分离点处的扰动以及用于基于所识别的扰动来计算所述流体流的液滴延迟的指令。举例来说，所述存储器可以包括用于识别所述流体流在所述分离点处的展开或所述流体流在所述分离点处的偏转的指令。在实施方案中，所述系统被配置成捕获检测场中的所述流体流的一个或多个图像以及识别所述检测场中的所述流体流中的扰动。在一些情况中，所述检测场包括在流体流分离点上游以及在激光照射点下游的所述流体流。本公开的方面还包括一种用于确定流式细胞仪中的流体流的液滴延迟的非暂时性计算机可读存储介质。根据某些实施方案的非暂时性计算机可读存储介质包括存储于其上的指令，所述指令具有：用于用图像传感器捕获流体流的图像的算法；用于识别成像的流体流中的分离点处的扰动的算法；以及用于基于所识别的扰动来计算所述流体流的液滴延迟的算法。所述非暂时性计算机可读存储介质还可以包括用于确定产生最大振幅的所识别扰动的液滴延迟的算法。在这些实施方案中，所述计算机可读存储介质包括用于跨越一系列液滴延迟来设定流式细胞仪的算法以及用于确定产生该最大振幅的所识别的扰动的液滴延迟的算法。举例来说，所述计算机可读存储介质可以包括确定产生所述流体流在分离点处的最大量的展开的液滴延迟的算法或确定产生相对于所述流体流的纵轴线的最大量的偏转的液滴延迟的算法。附图说明在结合附图阅读时，从以下详细描述中可以最好地理解本专利技术。图式中包括以下图：图1绘示根据某些实施方案的用于确定流式细胞仪中的流体流的液滴延迟的流程图。具体实施方式本公开的方面包括用于确定流式细胞仪中的流体流的液滴延迟的方法和系统。根据某些实施方案的方法包括：捕获所述流体流的图像以获得成像的流体流；识别所述成像的流体流中的分离点处的扰动；以及基于所识别的扰动来计算所述流体流的液滴延迟。还提供用于实施所述方法的系统，所述系统具有：成像传感器，所述成像传感器用于捕获所述流体流的一个或多个图像；以及处理器，所述处理器被配置成识别所述成像的流体流中的分离点处的扰动并且使用所述成像的流体流来计算液滴延迟。还描述非暂时性计算机可读存储介质。在更详细地描述本专利技术之前，应理解，本专利技术不限于所描述的特定实施方案，因为这些东本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种确定流式细胞仪中的流体流的液滴延迟的方法，所述方法包括：捕获所述流体流的图像以获得成像的流体流；识别所述成像的流体流中的分离点处的扰动；基于所识别的扰动来计算所述流体流的所述液滴延迟。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.10.03 US 62/403,5531.一种确定流式细胞仪中的流体流的液滴延迟的方法，所述方法包括：捕获所述流体流的图像以获得成像的流体流；识别所述成像的流体流中的分离点处的扰动；基于所识别的扰动来计算所述流体流的所述液滴延迟。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述扰动是所述流体流的展开或所述流体流的偏转。3.根据权利要求1-2中任一项所述的方法，其中计算所述流体流的所述液滴延迟包括：确定在最大振幅的所述扰动时的所述液滴延迟；以及将预定的液滴当量加到在所述最大振幅的所述扰动时的所述液滴延迟，其中在所述最大振幅的扰动时的所述液滴延迟加上预定的液滴当量提供最佳的液滴延迟。4.根据权利要求3所述的方法，其中所述预定的液滴当量是一半液滴当量。5.根据权利要求3-4中任一项所述的方法，其中确定在所述最大振幅的所述扰动时的所述液滴延迟包括应用相位掩模。6.根据权利要求5所述的方法，其中所述相位掩模包括1/32液滴当量增量。7.根据权利要求6所述的方法，其中确定在所述最大振幅的所述扰动时的所述液滴延迟包括应用8/32液滴当量相位掩模。8.根据权利要求3-4中任一项所述的方法，其中计算所述流体流的所述液滴延迟包括：在应用一半液滴当量偏移相位掩模时确定在最大振幅的所述扰动时的所述液滴延迟；以及将预定的液滴当量加到在所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：皮尔斯·O·诺顿，
申请(专利权)人：贝克顿·迪金森公司，
类型：发明
国别省市：美国,US