一种基于SSR标记法的西葫芦杂交种子纯度鉴定方法技术

本申请公开一种基于SSR标记法的西葫芦杂交种子纯度鉴定方法，方法包括：以杂交西葫芦叶片单株的基因组DNA为模板，加入上游引物和下游引物，进行PCR扩增，得到扩增产物；将所述扩增产物进行凝胶电泳，EB染色后，置于凝胶成像系统内成像；根据成像结果统计带型；根据带型结果计算西葫芦杂交种子的纯度。由于分子标记技术直接从DNA水平揭示双亲的差异性，因此实验结果准确，可靠，而且可以在苗期甚至种子水平进行鉴定，因此大大缩短了实验周期。与传统方法相比，本申请基于SSR标记法的西葫芦杂交种子纯度鉴定方法可以准确鉴定杂交种纯度，不受环境影响；在苗期即可鉴定纯度，显著缩短鉴定周期。

【技术实现步骤摘要】
一种基于SSR标记法的西葫芦杂交种子纯度鉴定方法
本专利技术涉及生物标记
，特别涉及一种基于SSR标记法的西葫芦杂交种子纯度鉴定方法。
技术介绍
西葫芦是一种重要的瓜类蔬菜，不仅产量高，耐储运，而且还有很高的营养价值及保健功能，栽培面积仅次于黄瓜。西葫芦杂交种目前在中国市场占据一定份额，而种子纯度鉴定是商业化育种的必备环节。西葫芦杂交种主要利用通过人工去雄授粉制备，此过程难免造成自花授粉而产生伪杂种，因此，杂交种纯度鉴定尤其重要。传统的鉴定方式主要通过观察种子形态鉴定及植株田间表型等，但鉴定周期长，用地多，成本高且易受环境因素影响，准确性难以保证。
技术实现思路
本专利技术实施例提供一种基于SSR标记法的西葫芦杂交种子纯度鉴定方法，解决传统通过种子形态鉴定、田间表型鉴定等产生准确率低和周期长的问题。本申请实施例示出了一种基于SSR标记法的西葫芦杂交种子纯度鉴定方法，所述方法包括以下步骤：以杂交西葫芦叶片单株的基因组DNA为模板，加入上游引物和下游引物，进行PCR扩增，得到扩增产物；将所述扩增产物进行凝胶电泳，EB染色后，置于凝胶成像系统内成像；根据成像结果统计带型；根据带型结果计算本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于SSR标记法的西葫芦杂交种子纯度鉴定方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：以杂交西葫芦叶片单株的基因组DNA为模板，加入上游引物和下游引物，进行PCR扩增，得到扩增产物；将所述扩增产物进行凝胶电泳，EB染色后，置于凝胶成像系统内成像；根据成像结果统计带型；根据带型结果计算西葫芦杂交种子的纯度。

【技术特征摘要】
1.一种基于SSR标记法的西葫芦杂交种子纯度鉴定方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：以杂交西葫芦叶片单株的基因组DNA为模板，加入上游引物和下游引物，进行PCR扩增，得到扩增产物；将所述扩增产物进行凝胶电泳，EB染色后，置于凝胶成像系统内成像；根据成像结果统计带型；根据带型结果计算西葫芦杂交种子的纯度。2.根据权利要求1所述的一种基于SSR标记法的西葫芦杂交种子纯度鉴定方法，其特征在于，所述上游引物的核苷酸序列为5'-GAAATTACGTGGCTGCCATT-3'，所述下游引物的核苷酸序列为5'-GGTAGTTTTGGCCCTCACAA-3'。3.根据权利要求1所述的一种基于SSR标记法的西葫芦杂交种子纯度鉴定方法，其特征在于，采用改良热碱法提取杂交西葫芦叶片单株的基因组DNA，所述改良热碱法包括：将所述西葫芦子叶剪碎置于离心管中，向离心管中加入NaOH，将离心管在沸水中放置预定时间，向离心管中加HCl中和，将离心管放置于Tris-HCl进行沸水浴，得到所述杂交西葫芦叶片单株的基因组DNA。4.根据权利要求1所述的一种基于SSR标记法的西葫芦杂交种子纯度鉴定方法，其特征在于，在所述以杂交西葫芦叶片单株的基因组DNA为模板，加入上游引物和下游引物，进行PCR扩增，得到扩增产物的步骤之前，还包括：提取西葫芦叶片基因组DNA；以所述西葫芦叶片基因组DNA中母本材料和父本材料...

【专利技术属性】
技术研发人员：周渭皓，史建宁，陈洁，
申请(专利权)人：宁夏泰金种业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：宁夏,64