PD1/CTLA4结合剂制造技术

本发明专利技术提供了结合PD1和CTLA4的多特异性分子，例如包含多于一种ISVD或纳米抗体。这些分子已经被工程改造以减少施用这种分子的受试者体内预先存在抗体的结合的发生。提供了用这样的分子增加免疫应答、治疗癌症和/或治疗感染性疾病的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】PD1/CTLA4结合剂本申请要求2015年11月18日提交的美国临时专利申请号62/256,985的权益；所述申请以其整体通过引用并入本文。计算机可读格式的核苷酸/氨基酸序列表以其整体通过引用并入。含有所述序列表的文件是353k字节ASCII文本文件，其创建于2016年11月15日且名为“24236WOPCTSEQ”。专利
本专利技术部分涉及结合程序性细胞死亡蛋白1(“PD1”)和细胞毒性T-淋巴细胞相关蛋白4(“CTLA4”)的双特异性多肽。具体而言，本专利技术部分涉及包含至少一个(诸如一个或两个)结合PD1的重链免疫球蛋白单一可变结构域(在本文中也称为“ISV”或“ISVD”)和至少一个(诸如一个或两个)结合CTLA4的重链免疫球蛋白单一可变结构域的双特异性多肽。专利技术背景消除免疫调节分子(诸如细胞毒性T淋巴细胞抗原4(CTLA4))代表通过操纵免疫系统诱导肿瘤消退、稳定疾病和延长存活的新的且有前景的策略。抗CTLA4抗体伊匹单抗(ipilimumab)目前销售用于适应症，包括黑色素瘤。已经在接受CTLA4抗体的具有黑色素瘤的患者中看到肿瘤消退和至进展的时间延长的证据，并本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.PD1/CTLA4结合剂，其包含结合人PD1的免疫球蛋白单一可变结构域(ISVD)和在以下残基集合中的一个或多个处结合人CTLA4的ISVD：·VRVTVL(SEQ ID NO：195的氨基酸33‑38)，·ADSQVTEVC(SEQ ID NO：195的氨基酸41‑49)；和·CKVELMYPPPYYLG(SEQ ID NO：195的氨基酸93‑106)；其中结合CTLA4的ISVD和/或结合PD1的ISVD在残基11和89处包含突变，其中所述残基编号是Kabat残基编号；其中所述PD1/CTLA4结合剂任选地包含半衰期延长剂和/或C端延长剂。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.11.18 US 62/2569851.PD1/CTLA4结合剂，其包含结合人PD1的免疫球蛋白单一可变结构域(ISVD)和在以下残基集合中的一个或多个处结合人CTLA4的ISVD：·VRVTVL(SEQIDNO：195的氨基酸33-38)，·ADSQVTEVC(SEQIDNO：195的氨基酸41-49)；和·CKVELMYPPPYYLG(SEQIDNO：195的氨基酸93-106)；其中结合CTLA4的ISVD和/或结合PD1的ISVD在残基11和89处包含突变，其中所述残基编号是Kabat残基编号；其中所述PD1/CTLA4结合剂任选地包含半衰期延长剂和/或C端延长剂。2.PD1/CTLA4结合剂，其包含：·一个或多个结合PD1的ISVD，其包含：包含氨基酸序列IHAMG(SEQIDNO：3)或GSIASIHAMG(SEQIDNO：6)的CDR1；包含氨基酸序列VITXSGGITYYADSVKG(SEQIDNO：4；其中X是W或V)或VITWSGGITY(SEQIDNO：7)的CDR2；和包含氨基酸序列DKHQSSXYDY(SEQIDNO：5；其中X是W或F)的CDR3；以及·一个或多个结合CTLA4的ISVD，其包含：包含氨基酸序列FYGMG(SEQIDNO：10)或GGTFSFYGMG(SEQIDNO：13)的CDR1；包含氨基酸序列DIRTSAGRTYYADSVKG(SEQIDNO：11)或DIRTSAGRTY(SEQIDNO：14)的CDR2；和包含氨基酸序列EXSGISGWDY(SEQIDNO：12；其中X是M或P)的CDR3；以及，任选地，半衰期延长剂和/或C端延长剂。3.权利要求1-2中任一项的PD1/CTLA4结合剂，其中所述结合PD1的ISVD包含氨基酸序列：(SEQIDNO：135)；和所述结合CTLA4的ISVD包含氨基酸序列：其中X是D或E；或者其中X1是D或E且其中X2是S、V、G、R、Q、M、H、T、D、E、W、F、K、A、Y或P；以及，任选地，半衰期延长剂和/或C端延长剂。4.权利要求1-3中任一项的PD1/CTLA4结合剂，其包含各ISVD之间的肽接头。5.权利要求1-4中任一项的PD1/CTLA4结合剂，其包含：·PD1ISVD，其包含SEQIDNO：135中所述的氨基酸序列；·35GS接头，其包含SEQIDNO：86中所述的氨基酸序列；·CTLA4ISVD，其包含SEQIDNO：143(D1E)中所述的氨基酸序列；·35GS接头，其包含SEQIDNO：86中所述的氨基酸序列；·HSAISVD，其包含SEQIDNO：144中所述的氨基酸序列；和·C端丙氨酸。6.权利要求1-4中任一项的PD1/CTLA4结合剂，其包含：·PD1ISVD，其包含SEQIDNO：135中所述的氨基酸序列；·35GS接头，其包含SEQIDNO：86中所述的氨基酸序列；·PD1ISVD，其包含SEQIDNO：135(D1E)中所述的氨基酸序列；·35GS接头，其包含SEQIDNO：86中所述的氨基酸序列；·CTLA4ISVD，其包含SEQIDNO：143(D1E)中所述的氨基酸序列；·35GS接头，其包含SEQIDNO：86中所述的氨基酸序列；·HSAISVD，其包含SEQIDNO：144中所述的氨基酸序列；和·C端丙氨酸。7.权利要求1-4中任一项的PD1/CTLA4结合剂，其包含：·PD1ISVD，其包含SEQIDNO：135中所述的氨基酸序列；·35GS接头，其包含SEQIDNO：86中所述的氨基酸序列；·CTLA4ISVD，其包含SEQIDNO：143(D1E)中所述的氨基酸序列；·35GS接头，其包含SEQIDNO：86中所述的氨基酸序列；·CTLA4ISVD，其包含SEQIDNO：143(D1E)中所述的氨基酸序列；·35GS接头，其包含SEQIDNO：86中所述的氨基酸序列；·HSAISVD，其包含SEQIDNO：144中所述的氨基酸序列；和·C端丙氨酸。8.权利要求1-4中任一项的PD1/CTLA4结合剂，其包含：·PD1ISVD，其包含SEQIDNO：135中所述的氨基酸序列；·35GS接头，其包含SEQIDNO：86中所述的氨基酸序列；·PD1ISVD，其包含SEQIDNO：135(D1E)中所述的氨基酸序列；·35GS接头，其包含SEQIDNO：86中所述的氨基酸序列；·CTLA4ISVD，其包含SEQIDNO：143(D1E)中所...

【专利技术属性】
技术研发人员：J·潘诺宁，E·鲍曼，M·博蒙，MA·比斯，C·布顿，B·唐布雷赫特，B·维克托尔，D·弗勒里克，罗伯特·A·卡斯特林，
申请(专利权)人：默沙东公司，
类型：发明
国别省市：美国,US