核苷修饰物3’-O-CH2N3-2’-O-Me-胞嘧啶核苷的新型制备方法技术

本发明专利技术涉及核苷修饰物3’‑O‑CH2N3‑2’‑O‑Me‑胞嘧啶核苷的新型制备方法。本发明专利技术的方法以天然核苷修饰物2’‑O‑Me‑N

【技术实现步骤摘要】
核苷修饰物3’-O-CH2N3-2’-O-Me-胞嘧啶核苷的新型制备方法
本专利技术属于核苷化合物合成领域，更具体地，本专利技术涉及一种新型核苷修饰物3’-O-CH2N3-2’-O-Me-胞嘧啶核苷的制备方法。
技术介绍
近年，随着基因组创药的发展，反义寡核苷酸药物被急速开发，究其原因在于其较传统药物来讲具有以下几点优势：1)特异性较强。一个15聚体的反义寡核苷酸含有30-45氢键，而低分子的传统药物(200-600u)与靶点一般只形成1-4个键；2)信息量较大。遗传信息从DNA-RNA-蛋白质，用互补寡核苷酸阻断某种蛋白的合成是很准确的；3)反义药物以核酸为靶点，与蛋白质作为靶点比较，更易合理设计新药物。由于作用于遗传信息传递的上游，所需药量较低，副作用可能较少。随着技术研究的推进，对反义药物的研究正兴盛起来。国内已有数家科研单位正在开展反义药物的研究，并已有若干反义寡核苷酸产品处在临床前试验阶段，相信国产反义药物有望在未来5～8年内上市并造福于国内广大患者。但是，目前反义药物的工业化合成工艺进行仍处于初级阶段，而实验室规模的工艺制备，无法满足工业化要求。因此，本领域迫切需要提供有效且无需特别设备，适合大规模工业化生产反义药物或其前期合成原料的技术。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种新型核苷修饰物3’-O-CH2N3-2’-O-Me-胞嘧啶核苷的制备方法。在本专利技术的第一方面，提供一种制备式I所示核苷修饰化合物的方法，所述的方法包括：(1)以2’-O-Me-N4-Bz-胞嘧啶核苷(化合物F)作为原料，与硅烷化试剂反应，选择性地将5’-OH进行硅烷化保护，获得中间体E；其中，R1为硅烷化保护基团；(2)将(1)的中间体E与乙酸酐(Ac2O)于DMSO中进行反应，单一性地修饰3’-OH基团，得到中间体D；(3)将(2)的中间体D与磺酰氯进行反应，单一性地修饰3’-O-CH2SCH3基团，得到中间体C；(4)将(3)的中间体C与叠氮化试剂进行反应，单一性地修饰3’-O-CH2Cl基团，得到叠氮基取代的中间体B；(5)将(4)的中间体B脱除保护基，从而得到目标化合物A；在一个优选例中，(1)中，所述的硅烷化试剂为R1-Cl，选自：TMS-Cl，TBDMS-Cl，TBDPS-Cl或其组合，优选地为TBDMS-Cl；较佳地，2’-O-Me-N4-Bz-胞嘧啶核苷与R1-Cl按照摩尔比为1∶1.0-3.0(较佳地为1∶1.2-2.0；最佳地为1∶1.5)；或将5’-OH进行硅烷化保护在溶剂1中进行，所述的溶剂1选自：吡啶，二氯甲烷/三乙胺，乙腈/三乙胺；优选地为吡啶；较佳地，按照重量体积比溶剂1的用量为2’-O-Me-N4-Bz-胞嘧啶核苷的5～10倍。在另一优选例中，(1)中，进行硅烷化保护后，还包括进行结晶处理的步骤以纯化所述的中间体E；较佳地，以乙酸乙酯/正庚烷作为溶剂进行结晶；更佳地，按照重量体积比，结晶溶剂用量为2’-O-Me-N4-Bz-胞嘧啶核苷重量的5～10倍。在另一优选例中，(1)中，2’-O-Me-N4-Bz-胞嘧啶核苷以溶剂1溶解后减压带水，之后在60℃，进一步加入溶剂1溶解，搅拌、降温至0±2℃，加入硅烷化试剂进行反应。在另一优选例中，(1)中，进行硅烷化保护后、结晶之前，还包括进一步处理及萃取的步骤；较佳地，该步骤包括：向反应体系中加入乙醇搅拌，之后加入NaHCO3，搅拌，之后减压浓缩，溶于乙酸乙酯后，以盐水萃取后去水相，有机相进行干燥和过滤，乙酸乙酯淋洗，之后减压浓缩干。在另一优选例中，(2)中，乙酸酐的用量为中间体E的5～10倍摩尔当量；或所述的中间体E与乙酸酐在溶剂2中反应，同时加入DMSO，所述溶剂2为醋酸；较佳地，DMSO的用量为中间体E的20～30倍摩尔当量；较佳地，按照重量体积比溶剂2的用量为中间体E的5～10倍。在另一优选例中，(2)中，进行反应后，还包括进行结晶处理的步骤，以纯化所述的中间体D；较佳地，以乙酸乙酯/正庚烷作为结晶的溶剂；更佳地，按照重量体积比，结晶溶剂用量为中间体E的5～10倍。在另一优选例中，(2)中，化合物E以DMSO和AcOH溶解，冷却、搅拌，加入乙酸酐，控制加入速度使得温度小于40℃；加完后在45±2℃搅拌，反应10～15小时。在另一优选例中，(2)中，反应后、结晶之前，还包括进一步处理及萃取的步骤；较佳地，该步骤包括：反应体系降温至20±5℃；以乙酸乙酯稀释后以氯化钠萃取，合并水相；以乙酸乙酯反萃取，合并有机相；干燥、过滤、淋洗固体；之后减压浓缩干。在另一优选例中，(3)中，中间体D和磺酰氯的摩尔比为1∶1.0-3.0(较佳地为1∶1.5-2.5；最佳地为1∶2.0)。在另一优选例中，中间体D与磺酰氯在溶剂3中反应，所述的溶剂3为二氯甲烷/环己烯；较佳地，二氯甲烷的用量为中间体D重量体积比的5～10倍，环己烯的用量为中间体D重量体积比的1～2倍。在另一优选例中，(3)中，中间体D先用溶剂3溶解，再加入环己烯，加完后降温至-5±5℃；以二氯甲烷稀释磺酰氯后加入反应体系，控制温度0℃以下；加完后在0±5℃下搅拌反应。在另一优选例中，(4)中，所述叠氮化试剂选自：叠氮化钠，叠氮化锂，TMS-N3或其组合；优选叠氮化钠；较佳地，中间体C和叠氮化试剂的摩尔比为1∶3.0-10.0(较佳地为1∶4.0-6.0；最佳地为1∶5.0)。在另一优选例中，中间体C与叠氮化试剂在溶剂4中进行反应；较佳地，溶剂4选自：DMF，DMSO，乙腈或其组合；优选DMF；较佳地，按照重量体积比，溶剂4的用量为中间体C的5～10倍。在另一优选例中，(4)中，进行反应后，还包括进行结晶处理的步骤，以纯化所述的中间体B；较佳地，以乙酸乙酯/正庚烷作为结晶的溶剂；更佳地，按照重量体积比，结晶溶剂用量为中间体C的5～10倍。在另一优选例中，(4)中，在(3)的反应产物中加入叠氮化试剂，于30±2℃搅拌反应2±1小时。在另一优选例中，(4)中，反应后、结晶之前，还包括进一步处理及萃取的步骤；较佳地，该步骤包括：反应体系以乙酸乙酯稀释，以氯化钠萃取，合并水相，以乙酸乙酯反萃取，合并有机相，进一步再以氯化钠萃取以及以乙酸乙酯反萃取，合并有机相；干燥；过滤；淋洗固体；之后减压浓缩干。在另一优选例中，(5)中，中间体B与碱性试剂进行反应以脱去保护基；较佳地，所述碱性试剂选自：氢氧化钠，氢氧化钾或其组合；更佳地，所述碱性试剂的用量为化合物B的5～10倍摩尔当量；或中间体B与碱性试剂在溶剂5中进行反应，所述溶剂5选自：水/甲醇，水/乙醇，水/THF；优选地为水/乙醇；较佳地，重量体积比溶剂5的用量为化合物B的5～10倍，其中有机溶剂占比为50～90％。在另一优选例中，(5)中，进行反应后，还包括进行结晶处理的步骤，以纯化所述的化合物A；较佳地，进行结晶的溶剂选自：乙醇，甲醇，乙腈或其组合；优选乙醇；更佳地，按照重量体积比，结晶溶剂用量为化合物B的8～10倍。在另一优选例中，(5)中，将化合物B加入乙醇和水中搅拌溶解，降温至20±5℃，加入碱性试剂，在25±2℃搅拌反应。在另一优选例中，(5)中，反应后、结晶之前，还包括进一步后处理的步骤；较佳地，该步骤包括：将反应体系调节pH为7～8，于45±2本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种制备式I所示核苷修饰化合物的方法，

【技术特征摘要】
1.一种制备式I所示核苷修饰化合物的方法，其特征在于，所述的方法包括：(1)以2’-O-Me-N4-Bz-胞嘧啶核苷作为原料，与硅烷化试剂反应，选择性地将5’-OH进行硅烷化保护，获得中间体E；其中，R1为硅烷化保护基团；(2)将(1)的中间体E与乙酸酐于DMSO中进行反应，单一性地修饰3’-OH基团，得到中间体D；(3)将(2)的中间体D与磺酰氯进行反应，单一性地修饰3’-O-CH2SCH3基团，得到中间体C；(4)将(3)的中间体C与叠氮化试剂进行反应，单一性地修饰3’-O-CH2Cl基团，得到叠氮基取代的中间体B；(5)将(4)的中间体B脱除保护基，从而得到目标化合物A；2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，(1)中，所述的硅烷化试剂为R1-Cl，选自：TMS-Cl，TBDMS-Cl，TBDPS-Cl或其组合，优选地为TBDMS-Cl；较佳地，2’-O-Me-N4-Bz-胞嘧啶核苷与R1-Cl按照摩尔比为1∶1.0-3.0；或将5’-OH进行硅烷化保护在溶剂1中进行，所述的溶剂1选自：吡啶，二氯甲烷/三乙胺，乙腈/三乙胺；优选地为吡啶；较佳地，按照重量体积比溶剂1的用量为2’-O-Me-N4-Bz-胞嘧啶核苷的5～10倍。3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，(1)中，进行硅烷化保护后，还包括进行结晶处理的步骤以纯化所述的中间体E；较佳地，以乙酸乙酯/正庚烷作为溶剂进行结晶；更佳地，按照重量体积比，结晶溶剂用量为2’-O-Me-N4-Bz-胞嘧啶核苷重量的5～10倍。4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，(2)中，乙酸酐的用量为中间体E的5～10倍摩尔当量；或所述的中间体E与乙酸酐在溶剂2中反应，同时加入DMSO，所述溶剂2为醋酸；较佳地，DMSO的用量为中间体E的20～30倍摩尔当量；较佳地，按照重量体积比溶剂2的用量为中间体E的5～10倍。5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，(2)中，进行反应后，还包括进行结晶处理的步骤，以纯化所述的中间体D；较佳地，以乙酸乙酯/正庚烷作...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙波，李喜群，郑伟建，许文凯，
申请(专利权)人：上海兆维科技发展有限公司，上海兆维生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：上海,31