治疗和诊断纤维化或纤维化相关疾病的手段和方法技术

本发明专利技术涉及蛋白质寡聚体，其包含(i)至少两个胶原18的NC‑单体或(ii)至少两个胶原18的内皮抑制素结构域或(iii)至少两个胶原18内皮抑制素结构域的N端肽，用于治疗，减轻或预防纤维化或纤维化相关疾病，血管内皮生长因子(VEGF)相关疾病或基质金属蛋白酶(MMP)相关疾病。本发明专利技术还涉及所提及的蛋白质寡聚体用于检测和/或诊断纤维化或纤维化相关疾病，血管内皮生长因子(VEGF)相关疾病或基质金属蛋白酶(MMP)相关疾病。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】治疗和诊断纤维化或纤维化相关疾病的手段和方法本专利技术涉及蛋白质寡聚体，其包含(i)至少两个胶原18的NC-1单体或(ii)至少两个胶原18的内皮抑制素结构域或(iii)至少两个胶原18内皮抑制素结构域的N端肽，所述蛋白质寡聚体用于治疗，减轻或预防纤维化或纤维化相关疾病，血管内皮生长因子(VEGF)相关疾病或基质金属蛋白酶(MMP)相关疾病。本专利技术还涉及所提及的蛋白质寡聚体用于检测和/或诊断纤维化或纤维化相关疾病，血管内皮生长因子(VEGF)相关疾病或基质金属蛋白酶(MMP)相关疾病。由器官成纤维细胞过度沉积细胞外基质(ECM)组分如纤连蛋白(FN)和I型胶原(Col1α1)被定义为纤维化。器官纤维化是许多导致终末期器官衰竭的疾病的最终共同途径。不可控制的伤口愈合应答(包括急性和慢性炎症，血管生成，驻留细胞活化和细胞外基质重塑)被认为参与纤维化的发病机理。肺纤维化包括一组肺实质的间质性疾病，其由多种原因引起，包括肺肿瘤的放疗和化疗(Am.J.Respir.CritCareMed.(2002)165，p.277-304；Movsas等.(1997)Chest111，p.1061-1076)。辐射诱发的病理生理事件与其他类型肺损伤(如手术，化疗和特发性肺纤维化(IPF))后发生的病理生理事件有明显相似之处(Rubin等.(1995)，Int.J.Radiat.Oncol.Biol.Phys.33，p.99-109)。在2006年根据美国医疗保健索赔数据库发表的一项研究中，IPF的患病率在每10万人中有14-42.7例，这取决于是否使用了狭义或广泛的病例发现标准(Raghu等.(2006)，Am.J.Respir.Crit.CareMed.174，p.810-6)。最近，在2012年5月，一项系统的文献调查估计，欧盟特发性肺纤维化(IPF)的患病率为每10万人26例。Rafii等的综述总结了各种关于IPF发病率的研究结果(J.ThoracDis.(2013)，5，p.48-73)。IPF代表进行性肺病死亡的最常见原因。回顾性研究表明，IPF诊断后的中位生存期为2-3年，但IPF病程可变，部分患者经历长期稳定，而其他患者频繁发作或急剧下降(Raghu等.(2011)，Am.J.Respir.Crit.CareMed.183，p.788-824；Selman等.(2001)，Ann.Intern.Med.134，p.136-51；Boon等.(2009)，PLoSOne，4，e5134)。临床上，IPF的特征是间质浸润，进行性呼吸困难和肺功能恶化，这可导致呼吸衰竭死亡(Am.J.Respir.CritCareMed.(2002)，165，p.277-304；AllenandSpiteri(2002)，Respir.Res.3，p.13；GrossandHunninghake(2001)，N.Engl.J.Med.345，p.517-525)。目前尚不存在用于IPF的理想动物模型，但迄今为止博来霉素和辐射诱发的肺纤维化模型已被用于研究肺纤维化(Rubin，同前)。从分子的角度来看，TGF-β是原型纤维化细胞因子，它在纤维化器官中增加，通过刺激细胞外基质分子的合成、激活成纤维细胞到表达α-平滑肌肌动蛋白的肌成纤维细胞和下调基质金属蛋白酶(MMP)而促进纤维化的发展。虽然异常的TGF-β表达与系统性硬化中纤维化的发病机制有关，但在早期系统性硬化的小型试验中评估的抗TGF-β单克隆抗体未显示任何功效(Varga等.(2009)，NatureReviewsRheumatology5，p.200-6)。另一项研究的结果表明PDGF信号传导在肺纤维化的发病机制中起关键作用，并表明抑制纤维发生而不是炎症对于抗纤维化治疗至关重要(Abdollahi等.(2005)，J.Exp.Med.201，p.925-35)。最近，已经报道了在TGF-β-和博来霉素诱导的纤维化中C端内皮抑制素多肽的抗纤维化活性，但没有报道N端内皮抑制素多肽的(WO201I/050311；Yamaguchi等.(2012)，Sci.Transl.Med.，4，p.136ra71)。内皮抑制素是胶原XVIII的天然存在的183个氨基酸的蛋白水解片段，其定位于血管周围的基底膜中。已经广泛描述了该蛋白质的抗肿瘤特性，将内皮抑制素划分为血管生成的内源性抑制剂[Bergers，G.，等.，Effectsofangiogenesisinhibitorsonmultistagecarcinogenesisinmice.Science，1999.284(5415)：p.808-12；O′Reilly，M.S.，等.，Endostatin：anendogenousinhibitorofangiogenesisandtumorgrowth.Cell，1997.88(2)：p.277-85.，Folkman，J.，Antiangiogenesisincancertherapy--endostatinanditsmechanismsofaction.ExpCellRes，2006.312(5)：p.594-607]。此外，它抑制许多信号级联，例如促炎性NF-κB，凝血和粘附级联[Abdollahi，A.，等.，Transcriptionalnetworkgoverningtheangiogenicswitchinhumanpancreaticcancer.ProcNatlAcadSciUSA，2007.104(31)：p.12890-5]。尽管有医学需要，但迄今为止在开发有效的纤维化治疗策略方面取得的进展非常小(参见例如Am.J.Respir.CritCareMed.(2002)，165，p.277-304；Allen和Spiteri，同前；Gross和Hunninghake，同前；Kamp(2003)，Chest124，p.1187-11909；Mason等.(1999)，Am.J.Respir.Crit.CareMed.160，p.1771-1777；Rafii等.(2013)，J.ThoracDis.5，p.48-73)。因此，本领域需要开发有效的纤维化治疗方式。可以将本专利技术所基于的技术问题视为提供符合上述需要的手段和方法。该技术问题已通过权利要求和下文中表征的实施方案解决。因此，本专利技术涉及蛋白质寡聚体，其包含(i)至少两个胶原18的NC-1单体或(ii)至少两个胶原18的内皮抑制素结构域或(iii)至少两个胶原18内皮抑制素结构域的N端肽，所述蛋白质寡聚体用于治疗，减轻或预防纤维化或纤维化相关疾病。本专利技术还涉及蛋白质寡聚体，其包含(i)至少两个胶原18的NC-1单体或(ii)至少两个胶原18的内皮抑制素结构域或(iii)至少两个胶原18内皮抑制素结构域的N端肽，所述蛋白质寡聚体用于治疗，减轻或预防血管内皮生长因子(VEGF)相关疾病或基质金属蛋白酶(MMP)相关疾病。如本文所用，术语“蛋白质”或“多肽”或“肽”(如果没有另外说明，所有术语可互换使用)包括基本上不含其他宿主细胞多肽的分离的和/或纯化的(多)肽。本文提及的术语“肽”包括至少2，3，4，5，6，7，8，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.蛋白质寡聚体，其包含(i)至少两个胶原18的NC‑1单体或(ii)至少两个胶原18的内皮抑制素结构域或(iii)至少两个胶原18内皮抑制素结构域的N端肽，其用于治疗，减轻或预防纤维化或纤维化相关疾病，血管内皮生长因子(VEGF)相关疾病或基质金属蛋白酶(MMP)相关疾病。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.12.03 EP 15197746.91.蛋白质寡聚体，其包含(i)至少两个胶原18的NC-1单体或(ii)至少两个胶原18的内皮抑制素结构域或(iii)至少两个胶原18内皮抑制素结构域的N端肽，其用于治疗，减轻或预防纤维化或纤维化相关疾病，血管内皮生长因子(VEGF)相关疾病或基质金属蛋白酶(MMP)相关疾病。2.用于根据权利要求1的用途的蛋白质寡聚体，其中所述蛋白质寡聚体与纤连蛋白，VEGF，MMP-2和/或MMP-9结合。3.用于根据权利要求1或2的用途的蛋白质寡聚体，其中人胶原18的NC-1单体包含寡聚化结构域，铰链区和/或内皮抑制素结构域或所述内皮抑制素结构域的片段，以及任选的铰链区内的重组蛋白酶切割位点。4.用于根据权利要求1或2的用途的蛋白质寡聚体，其中胶原18的内皮抑制素结构域选自SEQIDNO:18或SEQIDNO:19的氨基酸序列或胶原18内皮抑制素结构域的N端肽选自SEQIDNO:18或SEQIDNO:19的氨基酸残基1至132的氨基酸序列。5.用于根据权利要求1至4中任一项的用途的蛋白质寡聚体，其还在胶原18的NC-1单体，胶原18的内皮抑制素结构域或胶原18内皮抑制素结构域的N端肽中包含纤连蛋白的RGD基序和/或PHSRN基序。6.用于根据权利要求1至5中任一项的用途的蛋白质寡聚体，其中人胶原18的NC-1单体，胶原18的内皮抑制素结构域或胶原18内皮抑制素结构域的N端肽包含天然或异源寡聚化结构域。7.用于根据权利要求6的用途的蛋白质寡聚体，其中所述天然寡聚化结构域是胶原18的非三螺旋三聚化结构域。8.用于根据权利要求6的用途的蛋白质寡聚体，其中所述异源寡聚化结构域是选自由以下各项组成的组的寡聚化结构域：Fc结构域，人工寡聚化结构域或Fc结构域和人工寡聚化结构域两者。9.用于根据权利要求8的用途的蛋白质寡聚体，其中所述Fc结构域来自IgG，优选人IgG1或knobs-into-holes(KiH)改造的人IgG1。10.用于根据权利要求8的用途的蛋白质寡聚体，其中所述人工寡聚化结构域包含胶原18的内皮抑制素结构域的第7位的单突变，其中谷氨酰胺被半胱氨酸替代。11.用于根据权利要求1至10中任一项的用途的蛋白质寡聚体，其还包含血管抑素，血小板反应蛋白，抗PD-1/PD-L1抗体或用于纤维化或纤维化相关疾病，VEGF相关疾病或MMP相关疾病的另一种疗法。12.用于根据权利要求1至11中任一项的用途的蛋白质寡聚体，其中所述纤维化或纤维化相关疾病选自由以下各项组成的组：皮肤纤维化，优选硬皮病；瘢痕疙瘩；增生性瘢痕；硬斑...

【专利技术属性】
技术研发人员：阿米尔·阿布多拉希，卡什·贾瓦海里恩，约根·德布斯，周成，
申请(专利权)人：海德堡生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：德国,DE