一种检测异菌脲的时间分辨荧光免疫层析试纸条及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种检测异菌脲的时间分辨荧光免疫层析试纸条及其制备方法和应用。该试纸条包括底板及在底板上依次搭接粘贴的样品吸收垫、结合物释放垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，结合物释放垫上包埋有荧光微球标记的异菌脲单克隆抗体，硝酸纤维素膜上固定有检测区和质控区，检测区喷涂有异菌脲半抗原‑载体蛋白偶联物，质控区喷涂有羊抗鼠抗抗体，异菌脲半抗原是由3,5‑二氯苯异氰酸酯与甘氨酸乙酯盐酸盐、6‑氨基己酸甲酯盐酸盐等经过一系列反应得到。本发明专利技术提供的试纸条和检测方法具有操作简单、灵敏度高、检测速度快、成本低的优点，能实现对大批量样品中异菌脲的快速检测。

【技术实现步骤摘要】
一种检测异菌脲的时间分辨荧光免疫层析试纸条及其制备方法和应用
本专利技术属于农药残留检测领域，具体涉及一种检测烟草及烟草制品中异菌脲的时间分辨荧光免疫层析试纸条及其制备方法和应用。
技术介绍
异菌脲（Iprodione）属于二甲酰亚胺类，是一种广谱性触杀型保护性杀菌剂，广泛应用于烟草、果树、蔬菜的病害防治和水果的贮藏保鲜。异菌脲可以通过根部吸收起内吸作用，可有效防治对苯并咪唑类内吸杀菌剂有抗性的真菌。其主要防治对象为由葡萄孢菌、交链孢菌、核盘菌等引起的病害，如灰霉病、早疫病、黑斑病、菌核病等。我国针对不同作物，制定了异菌脲的最大残留限量标准，其中在油菜籽、黄瓜中的最大残留限量为2mg/kg，在番茄、苹果、梨中的最大残留限量为5mg/kg，在葡萄、香蕉中的最大残留限量为10mg/kg。国际烟草科学研究合作中心（CORESTA）规定烟草中异菌脲的指导性残留限量为0.5mg/kg，我国尚未制定异菌脲的最大残留限量，在实际生产中，以0.5mg/kg作为烟草最大残留量判定标准。目前，常用检测方法有高效液相色谱法、液相色谱-串联质谱法、气相色谱法、气相色谱-质谱联用法等。由于以上方法均需先进检测本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测异菌脲的时间分辨荧光免疫层析试纸条，包括底板及在底板上依次搭接粘贴的样品吸收垫、结合物释放垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，其特征在于所述结合物释放垫上包埋有荧光微球标记的异菌脲单克隆抗体，所述硝酸纤维素膜上固定有检测区和质控区，所述检测区喷涂有异菌脲半抗原‑载体蛋白偶联物，所述质控区喷涂有羊抗鼠抗抗体；所述异菌脲单克隆抗体是以异菌脲半抗原‑载体蛋白偶联物作为免疫原制备获得；所述异菌脲半抗原‑载体蛋白偶联物是由异菌脲半抗原与载体蛋白偶联得到，所述异菌脲半抗原是由3,5‑二氯苯异氰酸酯与甘氨酸乙酯盐酸盐反应生成2‑(3‑(1,5‑二氯苯基脲基))乙酸乙酯，水解得到2‑(3‑(1,5‑二氯苯基...

【技术特征摘要】
1.一种检测异菌脲的时间分辨荧光免疫层析试纸条，包括底板及在底板上依次搭接粘贴的样品吸收垫、结合物释放垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，其特征在于所述结合物释放垫上包埋有荧光微球标记的异菌脲单克隆抗体，所述硝酸纤维素膜上固定有检测区和质控区，所述检测区喷涂有异菌脲半抗原-载体蛋白偶联物，所述质控区喷涂有羊抗鼠抗抗体；所述异菌脲单克隆抗体是以异菌脲半抗原-载体蛋白偶联物作为免疫原制备获得；所述异菌脲半抗原-载体蛋白偶联物是由异菌脲半抗原与载体蛋白偶联得到，所述异菌脲半抗原是由3,5-二氯苯异氰酸酯与甘氨酸乙酯盐酸盐反应生成2-(3-(1,5-二氯苯基脲基))乙酸乙酯，水解得到2-(3-(1,5-二氯苯基脲基))乙酸，再经过成环反应，得到3-(3,5-二氯苯基)-2,4-咪唑烷基二酮，再与6-氨基己酸甲酯盐酸盐与三光气反应得到的6-异氰酸基己酸甲酯反应生成6-(3-(3,5-二氯苯基)-2,4-二氧咪唑烷基-1-甲酰胺基)己酸甲酯，最后在酸性条件下水解得到，其分子结构式为：。2.如权利要求1所述的检测异菌脲的时间分辨荧光免疫层析试纸条，其特征在于：所述异菌脲半抗原的制备反应过程如下：。3.根据权利要求1所述的检测异菌脲的时间分辨荧光免疫层析试纸条，其特征在于：所述荧光微球是直径为100~30...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈黎，范子彦，刘惠民，唐纲岭，崔华鹏，樊美娟，赵乐，王晓瑜，秦亚琼，王洪波，
申请(专利权)人：中国烟草总公司郑州烟草研究院，国家烟草质量监督检验中心，
类型：发明
国别省市：河南,41