一种猫早孕的发光检测试剂的制备方法及应用技术

本发明专利技术提供一种猫早孕的发光检测试剂的制备方法，将松弛素抗体R021与吖啶酯离心浓缩除去杂质，按照3：1质量比将松弛素抗体R021与吖啶酯充分混匀进行标记偶联，室温下，pH 6.3的条件下，轻轻震荡标记3h，用0.1M的PBS透析，除去未结合的吖啶酯，经过Sephadex G50凝胶层析柱纯化，化学发光仪上收集发光强度高的产物，合并纯化后的松弛素抗体R021与吖啶酯偶联物，保存在发光试剂缓冲液，分装，保存备用，本试剂填补国内没有猫早孕检测试剂的空白，实现猫松弛素的定性、定量、快速检测。在交配后14天，即可检测出是否怀孕，大大早于外部观察法、触诊法和超声波的30天检测，真正实现早早孕检测。

【技术实现步骤摘要】
一种猫早孕的发光检测试剂的制备方法及应用
本专利技术是一种猫早孕的发光检测试剂的制备方法及应用，属于生物制剂领域。
技术介绍
现有技术中，母猫的妊娠诊断方法很多，目前较常用的方法有外部观察法、触疹检查法、超声波探测法等，外部观察法和触诊法均需要有相当经验的人才能作出较正确的诊断。超声波探测一般怀孕30天的孕猫检测成功率较高，存在检查时间较长的问题，而国内还没有专门针对猫早孕的检测试剂，与人的HCG不同(即猫妊娠用人和犬的早孕试剂是检测不出来，或者不准确的。有种属差异)，猫妊娠的最佳检测指标，现在公认的或者外国成熟的检测指标就是松弛素(Relaxin)。妊娠期猫松弛素的分泌量随着妊娠期增长而逐渐增多，在分娩后或自发流产前迅速下降至无法检测，所以需要一些新的检测试剂要解决上述问题。
技术实现思路
针对现有技术存在的不足，本专利技术目的是提供一种猫早孕的发光检测试剂的制备方法及应用，以解决上述
技术介绍
中提出的问题。为了实现上述目的，本专利技术是通过如下的技术方案来实现：一种猫早孕的发光检测试剂的制备方法，包括如下步骤：S1：将松弛素抗体R021与吖啶酯离心浓缩除去杂质，按照3：1质量比将松弛素本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种猫早孕的发光检测试剂的制备方法，其特征在于包括如下步骤：S1：将松弛素抗体R021与吖啶酯离心浓缩除去杂质，按照3：1质量比将松弛素抗体R021与吖啶酯充分混匀进行标记偶联，室温下，pH6.3的条件下，轻轻震荡标记3h，用0.1M的PBS透析，除去未结合的吖啶酯；S2：经过SephadexG50凝胶层析柱纯化，化学发光仪上收集发光强度高的产物，合并纯化后的松弛素抗体R021与吖啶酯偶联物，保存在发光试剂缓冲液，分装，保存备用。

【技术特征摘要】
1.一种猫早孕的发光检测试剂的制备方法，其特征在于包括如下步骤：S1：将松弛素抗体R021与吖啶酯离心浓缩除去杂质，按照3：1质量比将松弛素抗体R021与吖啶酯充分混匀进行标记偶联，室温下，pH6.3的条件下，轻轻震荡标记3h，用0.1M的PBS透析，除去未结合的吖啶酯；S2：经过SephadexG50凝胶层析柱纯化，化学发光仪上收集发光强度高的产物，合并纯化后的松弛素抗体R021与吖啶酯偶联物，保存在发光试剂缓冲液，分装，保存备用。2.根据权利要求1所述的一种猫早孕的发光检测试剂的制备方法，其特征在于：所述发光试剂缓冲液采用PBS、1％海藻糖以及0.5％TrionX-100混合，发光试剂缓冲液的pH为6.3。3.根据权利要求1所述的一种猫早孕的发光检测试剂的制备方法，其特征在于：所述松弛素抗体R021采用1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC/N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)法将羧基磁珠活化后与松弛素抗体F102偶联，以制得抗体磁珠，通过用包被缓冲液，pH6.0)清洗羧基磁珠3次，随后加入等质量的EDC和NHS(1mg磁珠对应1.2mgEDC)，置于室温下活化30min；用包被缓冲液洗去未反应的活化剂，加入抗体F102室温反应2h；用封闭缓冲液置换...

【专利技术属性】
技术研发人员：李来庆，
申请(专利权)人：广州艺佳生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44