一种基因碱基编辑器制造技术

本发明专利技术提供的人源载脂蛋白B信使RNA脱氨酶催化亚基3A(APOBEC3A)、CRISPR相关Cas蛋白以及尿嘧啶糖苷酶抑制剂(UGI)[视情况而定加与不加]的融合表达的蛋白(碱基编辑器)。该碱基编辑器能够在DNA中进行碱基编辑，将胞嘧啶脱氨为尿嘧啶，即使胞嘧啶位于GpC位点或者高甲基化状态下，该碱基编辑器仍然具有较高的编辑效率。

【技术实现步骤摘要】
一种基因碱基编辑器
本专利技术涉及一种基因碱基编辑器。
技术介绍
基因组编辑技术指利用可设计的核酸酶(分子剪刀)通过碱基插入、缺失或置换等方式，对生物体基因组DNA特定片段进行改造从而达到对目标基因进行编辑的一种基因工程技术。利用基因组编辑技术对细胞进行遗传学操纵，可广泛的应用于生命科学基础研究、生物技术开发、农业技术开发以及医药研发领域。例如：直接在体内校正引起遗传疾病的基因突变，将能够从根本上治疗遗传疾病；对农作物进行精确的基因工程改造，使其产量提高或能够抵抗环境污染或病原体的感染；对微生物基因组进行精准改造，从而促进可再生生物能源的开发等。CRISPR/Cas(Clusteredregularlyinterspacedshortpalindromicrepeats/CRISPR-associatedprotein)基因组编辑系统自问世以来，就有着其它基因组编辑技术无可比拟的优势，被认为能够在活细胞中广泛使用，并且是迄今为止最有效、最便捷的基因组编辑系统。Cas核酸酶利用引导RNA(guideRNA，gRNA)可在多种细胞的基因组特定靶点定位，对其进行切割从而产生DNA双链断裂(本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.融合蛋白包括两个组分。第一个片段是人源载脂蛋白B信使RNA脱氨酶催化亚基3A(APOBEC3A)，第二个片段是CRISPR相关(Cas)蛋白‑Cas9。

【技术特征摘要】
2018.02.23 CN PCT/CN2018/0769911.融合蛋白包括两个组分。第一个片段是人源载脂蛋白B信使RNA脱氨酶催化亚基3A(APOBEC3A)，第二个片段是CRISPR相关(Cas)蛋白-Cas9。2.权利要求1中的融合蛋白包含一个尿嘧啶糖苷酶抑制剂(UGI)。3.权利要求1中的融合蛋白的大小不超过2500个氨基酸。4.权利要求1中的融合蛋白中的APOBEC3A包含来自于SEQIDNO：1的氨基酸序列，或者与SEQIDNO：1的氨基酸残基的29-199位具有至少90％的序列同一性并保留胞苷脱氨酶活性。5.权利要求4中的融合蛋白中的APOBEC3A包含选自SEQIDNO：1-10的氨基酸序列。6.权利要求1中的融合蛋白中的Cas蛋白来自于以下组群SpCas9，FnCas9，St1Cas9，St3Cas9，NmCas9，SaCas9，AsCpf1，LbCpf1，FnCpf1，VQRSpCas9，EQRSpCas9，VRERSpCas9，RHAFnCas9，以及KKHSaCas9。7.权利要求1中的融合蛋白中的Cas蛋白是Cas蛋白组群(SpCas9，FnCas9，St1Cas9，St3Cas9，NmCas9，SaCas9，AsCpf1，LbCpf1，FnCpf1，VQRSpCas9，EQRSpCas9，VRERSpCas9，RHAFnCas9，以及KKHSaCas9)中某些蛋白的突变体，其保留了这些Cas蛋白的DNA结合活性，但不产生DNA双链断裂。8.权利要求7中的融合蛋白的组分Cas蛋白的突变体能够在其结合的DNA双链的一条链上引入一个缺口。9.权利要求7中的融合蛋白的组分Cas蛋白包含如SEQIDNO：11所示的氨基酸序列。10.在权利要求1融合蛋白中，第一片段位于第二片段的N端侧。11.权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈佳，杨力，黄行许，杨贝，王潇，李佳楠，
申请(专利权)人：上海科技大学，
类型：发明
国别省市：上海,31