一种枣根提取物、提取分离方法及其应用技术

本发明专利技术属于植物提取分析技术领域，特别涉及一种枣根提取物、提取分离方法及其应用，枣根提取物包括以下15种组分：熊果酸、ceanothenic acid、丁香酚‑β‑D‑葡萄糖苷、二氢查尔酮‑4′‑β‑D‑吡喃葡萄糖苷、齐墩果酸、3‑氧代齐墩果酸、儿茶素、桦木酸、大枣萘醌、无刺枣苄苷Ⅱ、β‑谷甾醇、豆甾醇、胡萝卜苷、对羟基苯甲酸、槲皮素。本发明专利技术利用乙醇提取、乙酸乙酯萃取，结合运用硅胶、CHP‑20P、大孔树脂、Sephadex LH‑20等柱层析技术对枣根提取物进行了分离，可应用于延缓阿尔兹海默症和治疗糖尿病药物的研究。

【技术实现步骤摘要】
一种枣根提取物、提取分离方法及其应用
本专利技术属于植物提取分析
，特别涉及一种枣根提取物、提取分离方法及其应用。
技术介绍
枣，别名为干枣、红枣、枣子、大枣、良枣、刺枣、贯枣，是植物枣(ZiziphusjujubaMill.)的干燥成熟果实，归属于鼠李科(Rhamnaceae)枣属(ZiziphusMill.)植物。始载于第一部中药学专著《神农本草经》，且被列为诸药之上品。大枣的历史悠久，被列为我国的“五果”(桃、李、栗、杏、枣)之一，既是普通食品，又是传统中药，其味甘、平、无毒，归脾、胃、心经。枣树，高达10余米，为落叶小乔木，稀灌木。树皮为褐色或灰褐色，枝平滑无毛，分长枝(枣头)和短枝(枣股)，长枝弯曲呈“之”字形。据《中国果树志枣卷》记载，枣树在我国有700个品种，栽培范围极广，树种分布集中于河北、山西、山东、陕西、山西、河南以及新疆维吾尔自治区等新兴枣产区。在《本经》中有记载，大枣有养血安神、补中益气、缓和药性的功效，现代临床应用上，大枣可提高人体免疫力，抑制癌细胞，治疗胆结石，预防骨质疏松，防治高血压，治疗溃疡病，现代药理学研究表明大枣具有免疫调节、抗氧化、抗肿瘤、护肝、降血糖等活性。近年来对枣属植物化学成分和药理作用研究较多的是果实和枝叶部分，而对枣根的化学成分及药理活性方面尚未报道。本专利技术提供了一种枣根的提取分离方法。
技术实现思路
本专利技术利用乙醇提取、乙酸乙酯萃取，结合运用硅胶、CHP-20P、大孔树脂、SephadexLH-20等柱层析技术对枣根提取物进行了分离，可应用于延缓阿尔兹海默症和治疗糖尿病药物的研究。本专利技术提供了一种枣根提取物，包含以下组分：式①所示的熊果酸、式②所示的ceanothenicacid、式③所示的丁香酚-β-D-葡萄糖苷、式④所示的二氢查尔酮-4′-β-D-吡喃葡萄糖苷、式⑤所示的齐墩果酸、式⑥所示的3-氧代齐墩果酸、式⑦所示的儿茶素、式⑧所示的桦木酸、式⑨所示的大枣萘醌、式⑩所示的无刺枣苄苷Ⅱ、式所示的β-谷甾醇、式所示的豆甾醇、式所示的胡萝卜苷、式所示的对羟基苯甲酸、式所示的槲皮素；一种上述枣根提取物的提取分离方法，包括如下步骤：S1，将枣根粉碎过40目筛，用体积浓度为90％的乙醇溶液渗漏提取2次，每次48h后再开始渗漏，合并两次提取液并减压浓缩，得浸膏；S2，加水溶解S1中的浸膏，得浸膏溶液，用相当于浸膏溶液2倍体积的乙酸乙酯萃取2次，合并2次乙酸乙酯萃取层，减压浓缩，得乙酸乙酯萃取浸膏；S3，用甲醇将S2中乙酸乙酯萃取浸膏溶解，加入100～200目硅胶拌样，然后加热使溶剂完全挥发，将得到的固体干燥后研磨，过80～100目筛，采用干法上样在100～200目硅胶柱上，用二氯甲烷-甲醇溶液进行梯度洗脱，同时进行薄层液相色谱TLC跟踪监测，结合HPLC谱图分析，将乙酸乙酯萃取层浸膏划分为极性不同的8份馏分，然后运用硅胶、CHP-20P、大孔树脂、SephadexLH-20柱层析技术中的一种或多种反复层析分离，得式①-共15种枣根提取物。优选地，二氯甲烷-甲醇溶液的体积比为(200～1)∶1。一种上述枣根提取物在制备延缓阿尔兹海默症和治疗糖尿病药物中的应用。优选地，所述枣根提取物中大枣萘醌、齐墩果酸、儿茶素、熊果酸、ceanothenicacid、无刺枣苄苷Ⅱ在抑制α-葡萄糖苷酶活性、乙酰胆碱酯酶活性中的应用。与现有技术相比，本专利技术的有益效果：本专利技术利用乙醇提取、乙酸乙酯萃取，结合运用硅胶、CHP-20P、大孔树脂、SephadexLH-20等柱层析技术对枣根提取物进行了分离，其中部分提取物具有良好的乙酰胆碱酯酶和α-葡萄糖苷酶抑制活性，可应用于延缓阿尔兹海默症和治疗糖尿病药物的研究，极具应用前景。附图说明图1为本专利技术实施例1中乙酸乙酯萃取浸膏的分离过程图；图2为本专利技术枣根提取物中6种化合物分析时的高效液相色谱图；图3为本专利技术枣根提取物中6种化合物的混合标准品的高效液相色谱图。其中，图2-3中1-二氢查尔酮-4′-β-D-葡萄糖苷,2-丁香酚-β-D-葡萄糖苷，3-无刺枣苄苷Ⅱ,4-对羟基苯甲酸,5-儿茶素,6-槲皮素。具体实施方式下面结合附图1-3对本专利技术的几个具体实施方式进行详细描述，但应当理解本专利技术的保护范围并不受具体实施方式的限制。实施例1一种枣根提取物的提取分离方法，包括以下步骤：S1，将枣根粉碎过40目筛，用体积浓度为90％的乙醇溶液渗漏提取2次，每次浸泡48h后再开始渗漏，合并两次提取液并减压浓缩，得浸膏，具体如下：4.7kg枣根粉碎过40目筛，用60L体积浓度为90％的乙醇溶液渗漏法提取，每次浸泡48h，然后开始渗透，分别收集一次滤液和一次滤渣，一次滤液作为得到提取液，一次滤渣再按照上述步骤渗漏提取1次，合并两次提取液并45℃、0.09Mpa下减压浓缩，得浸膏(293.60g)。S2，加水溶解S1中的浸膏，得浸膏溶液，用相当于2倍体积浸膏溶液的乙酸乙酯萃取2次，合并2次萃取时得到的乙酸乙酯萃取层，在45℃、0.09Mpa下减压浓缩，得乙酸乙酯萃取浸膏(107g)。S3，用甲醇将S2中乙酸乙酯萃取浸膏溶解，加入100～200目硅胶拌样，然后加热使溶剂完全挥发，将得到的固体干燥后研磨，过80～100目筛，采用干法上样在100～200目硅胶柱上，用体积比为(200～1)∶1的二氯甲烷-甲醇溶液进行梯度洗脱，同时进行薄层液相色谱TLC跟踪监测，结合HPLC谱图分析，按洗脱溶剂的体积比大致将乙酸乙酯萃取层浸膏划分为极性不同的8种馏分，分别命名为Fr1(洗脱液体积比200:1～190:1)、Fr2(洗脱液体积比180:1～150:1)、Fr3(洗脱液体积比140:1～110:1)、Fr4(洗脱液体积比100:1～80:1)、Fr5(洗脱液体积比70:1～60:1)、Fr6(洗脱液体积比50:1～30:1)、Fr7(洗脱液体积比30:1～20:1)、Fr8(洗脱液体积比10:1～1:1)。Fr3部分采用硅胶柱层析，干法上样，用CH2Cl2-MeOH(50:1～1:1)梯度洗脱，TLC跟踪监测结合HPLC谱图分析又大致划分为5小段(洗脱液体积比：50:1～40:1、35:1～30:1、20:1～15:1、10:1～5:1、5:1～1:1)，发现在第2段样品中有细小针状晶体出现，过滤将晶体分离出来后，取少量溶解，点板发现只有一个紫色斑点且呈点性较好，进而进行HPLC分析，得到的谱图为单峰且峰形较好，得到式①，编号Y-1。将其余几段馏分分别进行硅胶柱分离，梯度洗脱，洗脱溶剂为甲醇-二氯甲烷(70:1～1:1)，最后用纯甲醇冲洗，在过柱过程中结合薄层液相色谱分析(TLC)跟踪检测，合并成分相同或相似的馏分并用旋转蒸发仪将溶剂蒸干，反复进行硅胶柱层析，最终分离得到只有两到三个点的样品以及只需除杂的样品，尝试CHP、LH-20等多种反相填料，最终确定用填料CHP-20P继续分离，得到式②(甲醇：水体积比为10:90)、式③(甲醇：水体积比为20:80)、式④(甲醇：水体积比为10:90)三种化合物，分别编号为Y-2、Y-3、Y-4。比较Fr4部分与Fr3部分的峰形谱图发现两部分有一些重合的峰，因此先进行大致划段，将重合部分大致划分开来后，重点对化合物不同的部本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种枣根提取物，其特征在于，包含以下组分：式①所示的熊果酸、式②所示的ceanothenic acid、式③所示的丁香酚‑β‑D‑葡萄糖苷、式④所示的二氢查尔酮‑4′‑β‑D‑吡喃葡萄糖苷、式⑤所示的齐墩果酸、式⑥所示的3‑氧代齐墩果酸、式⑦所示的儿茶素、式⑧所示的桦木酸、式⑨所示的大枣萘醌、式⑩所示的无刺枣苄苷Ⅱ、式

【技术特征摘要】
1.一种枣根提取物，其特征在于，包含以下组分：式①所示的熊果酸、式②所示的ceanothenicacid、式③所示的丁香酚-β-D-葡萄糖苷、式④所示的二氢查尔酮-4′-β-D-吡喃葡萄糖苷、式⑤所示的齐墩果酸、式⑥所示的3-氧代齐墩果酸、式⑦所示的儿茶素、式⑧所示的桦木酸、式⑨所示的大枣萘醌、式⑩所示的无刺枣苄苷Ⅱ、式所示的β-谷甾醇、式所示的豆甾醇、式所示的胡萝卜苷、式所示的对羟基苯甲酸、式所示的槲皮素；2.如权利要求1所述的枣根提取物的提取分离方法，其特征在于，包括如下步骤：S1，将枣根粉碎过40目筛，用体积浓度为90％的乙醇溶液渗漏提取2次，每次浸泡48h后再开始渗漏，合并两次提取液并减压浓缩，得浸膏；S2，加水溶解S1中的浸膏，得浸膏溶液，用相当于浸膏溶液2倍体积的乙酸乙酯萃取2次，合并2次乙酸乙酯萃取层，减压浓缩，得乙酸乙酯萃取浸膏；S3，用甲醇将S2中乙酸乙酯萃取浸膏溶解...

【专利技术属性】
技术研发人员：白乃生，杨美琪，田梦琪，郭森，王姗姗，王梦旭，王天义，彭赛男，白璐，
申请(专利权)人：西北大学，
类型：发明
国别省市：陕西,61