一种杀菌剂醚菌酯的降解菌株及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种杀菌剂醚菌酯的降解菌株及其应用。该菌株为中华单胞菌（Sinomonas soli）TS‑04，于2018年7月5日保存于广东省微生物菌种保藏中心，保藏号为GDMCC No：60410。本发明专利技术首次公开了中华单胞菌对醚菌酯等甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂的降解作用，并筛选得到上述高效快速降解菌株TS‑04，而且，该菌在较宽的pH和温度范围内均能有效降解醚菌酯，并耐受较高浓度杀菌剂，可以作为优良的农药降解菌应用于水体和土壤等污染环境的生物修复方面。本发明专利技术为打破现有治理农药残留污染瓶颈提供了新的开发途径，丰富了农药降解菌的种质资源库，应用前景好。

【技术实现步骤摘要】
一种杀菌剂醚菌酯的降解菌株及其应用
本专利技术属于生物降解
更具体地，涉及一种杀菌剂醚菌酯的降解菌株及其应用。
技术介绍
甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂常见类型有醚菌酯、嘧菌酯、吡唑醚菌酯，是目前全球销量额最高的保护性杀菌剂，是化学保护性杀菌剂中持效期最长的成分。该类杀菌剂内吸活性好，杀菌谱广，对草莓白粉病、黄瓜白粉病、梨黑星病、稻瘟病等真菌性植物病害具有良好的防效，对几乎所有真菌性病害均有防治效果，对葡萄所有真菌性病害均有效。因此应用十分广泛。但是，甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂不同成分，安全性存在较大差别；其除了杀菌活性外，也具有一定的生长调节作用，在使用中需加以注意。而且，化学合成农药普遍具有难于降解、半衰期长的特点，大量施用或操作不规范都会残留在作物、水体和土壤等环境中，长久下来会影响土壤肥力，甚至降低农作物产量，更会对生态环境和人类健康造成危害。研究报道表明，醚菌酯对大型溞和草鱼亚成体具有潜在毒性（Cui,ChaiandLiu,etal.Toxicityofthreestrobilurins(kresoxim-methyl,pyraclostrobin,andtrifloxystrobin)onDaphniamagna[J].EnvironmentalToxicologyandChemistry,2017,36(1):182-189.），并对两栖类胚胎有严重的致畸和致癌作用（Li,LiuandYang,etal.StronglethalityandteratogenicityofstrobilurinsonXenopustropicalisembryos:basingontenagriculturalfungicides[J].EnvironmentalPollution,2016,208(B):868-874.）。此外，醚菌酯原药对大鼠经口亚慢性毒性实验表明这种农药对哺乳类动物的血液和肝脏都有毒性作用，肝脏可能是其重要的毒性靶器官（蔡婷峰,葛怡琛,高洪彬等.醚菌酯原药对SD大鼠亚慢性经口毒性研究,中国职业医学,2015,3:2095-2619）。微生物降解农药的研究始于20世纪40年代末，在目前已有的处理农药残留方法中，微生物降解以其安全、成本低、操作便利且无二次污染的优点倍受国内外研究人员的关注。而微生物降解特异性比较明显，因此需要筛选到高效降解的菌种。目前，关于醚菌酯降解菌的研究非常少，目前尚未有关于醚菌酯生物修复的报道。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是克服现有醚菌酯等甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂农药残留降解修复技术的不足，提供一株降解醚菌酯等甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂农药的新菌株，能够快速高效降解醚菌酯等，可用于修复醚菌酯残留污染的土壤和水体等环境。本专利技术的目的是提供中华单胞菌（Sinomonassoli）在降解甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂以及修复甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂污染的自然环境方面的应用。本专利技术另一目的是提供一株可高效降解甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂的中华单胞菌（Sinomonassoli）菌株TS-04。本专利技术的再一目的是提供所述菌株TS-04在降解甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂以及修复甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂污染的自然环境方面的应用。本专利技术上述目的通过以下技术方案实现：本专利技术首次发现中华单胞菌（Sinomonassoli）对醚菌酯等甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂的降解作用，并筛选得到一株高效快速降解醚菌酯等甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂的中华单胞菌菌株TS-04，该菌株是从广东佛山某农药厂污水处理口的活性污泥中经人工富集培养、分离纯化得到，对醚菌酯具有高效快速的降解效能，在以醚菌酯等甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂为唯一碳源的基础盐培养基中培养5天，对醚菌酯的降解率达到85%以上；且在较宽的pH（5.0～9.0）和温度（25～37℃）条件下均能较好降解醚菌酯，可耐高浓度醚菌酯；将该菌株接种污染土壤10天后，土壤中杀菌剂残留量降低85%以上，降解能力优异，可高效快速去除水体和土壤中该类农药残留量，菌株TS-04可以作为优良的生物降解菌应用于醚菌酯农药污染的生物修复。因此，以下应用均应在本专利技术的保护范围之内：中华单胞菌（Sinomonassoli）在降解甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂方面的应用。中华单胞菌（Sinomonassoli）在修复甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂污染的自然环境方面的应用。一株可高效降解甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂的菌株，为中华单胞菌（Sinomonassoli）菌株TS-04，于2018年7月5日保存于广东省微生物菌种保藏中心，保藏号为GDMCCNo：60410。上述菌株TS-04在降解甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂方面的应用。上述菌株TS-04在修复甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂污染的自然环境方面的应用。其中，优选地，所述甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂为醚菌酯、嘧菌酯和/或吡唑醚菌酯。具体的，所述自然环境包括水体或土壤。一种含有中华单胞菌（Sinomonassoli）的高效降解甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂的菌剂。优选地，菌剂中中华单胞菌为所述菌株TS-04。优选地，所述菌剂中菌体数量不低于1.0×103CFU/mL。更优选地，所述菌剂中菌体数量不低于1.0×105～1.0×109CFU/mL。如1.0×107～CFU/mL。本专利技术具有以下有益效果：本专利技术首次公开了中华单胞菌（Sinomonassoli）对醚菌酯、嘧菌酯、吡唑醚菌酯等甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂的降解作用，并筛选得到一株高效快速降解醚菌酯等甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂的中华单胞菌（Sinomonassoli）菌株TS-04，丰富了农药降解菌的种质资源库，在该类农药残留污染的水体和土壤生物修复中有重大应用价值，为打破现有治理农药残留污染瓶颈提供了新的开发途径。而且，该菌在较宽的pH和温度范围内均能有效降解醚菌酯，并耐受较高浓度醚菌酯（200mg/L），证明菌株TS-04可以作为优良的农药降解菌应用于醚菌酯等甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂污染环境的生物修复方面。附图说明图1为TS-04菌在LB固体培养基上培养1d的菌落形态特征图。图2为TS-04菌的扫描电镜图。图3为TS-04菌的16SrDNA的系统发育树。图4为TS-04菌生长与降解醚菌酯的动态关系。图5为TS-04菌在不同pH条件下对醚菌酯的降解效果。图6为TS-04菌在不同温度下对醚菌酯的降解效果。图7为TS-04菌在不同接菌量下对醚菌酯的降解效果。图8为TS-04菌对不同浓度醚菌酯的降解效果。图9为TS-04菌生长与降解嘧菌酯的动态关系。具体实施方式以下结合说明书附图和具体实施例来进一步说明本专利技术，但实施例并不对本专利技术做任何形式的限定。除非特别说明，本专利技术采用的试剂、方法和设备为本
常规试剂、方法和设备；以下实施例所用试剂和材料均为市购。以下实施例中所述培养基配方如下：基础盐培养基（MSM，g/L）：（NH4）2SO4，2.0g；CaCl2·2H2O，0.01g；FeSO4·7H2O，0.001g；Na2HPO4·12H2O，1.5g；MgSO4·7H2O，0.2g；KH2PO4，1.5g，pH8.0。固体培养基：每1L液体培养基加入17～20g琼脂粉。LB培养基：酵母提取物5.0g，蛋白胨10.0g，氯化钠10.0g，去离子水1000mL，pH7本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.中华单胞菌（Sinomonas soli）在降解甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂方面的应用。

【技术特征摘要】
1.中华单胞菌（Sinomonassoli）在降解甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂方面的应用。2.中华单胞菌（Sinomonassoli）在修复甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂污染的自然环境方面的应用。3.一株可高效降解甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂的菌株，其特征在于，其为中华单胞菌（Sinomonassoli）菌株TS-04，于2018年7月5日保存于广东省微生物菌种保藏中心，保藏号为GDMCCNo：60410。4.权利要求3所述菌株TS-04在降解甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂方面的应用。5.权利要求3所述菌株TS-04在修复甲氧基丙...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈少华，滕诗雨，冯彦媚，占卉，顾雅雯，郭毅博，温小云，
申请(专利权)人：华南农业大学，
类型：发明
国别省市：广东,44