一株微生物采油菌W-Y5及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一株微生物采油菌W‑Y5及其应用。微生物采油菌W‑Y5具体为Tepidiphilus sp.W‑Y5，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCC No.15902。实验证明，Tepidiphilus sp.W‑Y5不仅具有降解石油的功能，可用于石油污染的治理和修复，而且还可以用于微生物采油，提高采油率。本发明专利技术具有重要的应用价值。

【技术实现步骤摘要】
一株微生物采油菌W-Y5及其应用
本专利技术属于生物
，具体涉及一株微生物采油菌W-Y5及其应用。
技术介绍
石油污染分布广泛，涉及采油、炼油、化工、机械等各种工业以及石油泄漏等各种污染环境。石油烃组分复杂多样，疏水性强而难以被普通微生物所接触、所降解、所利用。微生物采油技术就是通过向地层中注入营养或微生物，利用油藏中微生物的生长代谢活动，提高原油产量和采收率。传统的石油功能菌株多分离于水体、土壤中。现有的研究表明，微生物除分布在水、土中外，在石油油相中也有广泛的分布，因此从石油油相中分离相关的功能菌株在微生物采油技术中具有重要意义。
技术实现思路
本专利技术的目的是降解石油。本专利技术首先保护Tepidiphilussp.W-Y5，该菌株已于2018年06月05日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号)，保藏编号为CGMCCNo.15902。Tepidiphilussp.W-Y5CGMCCNo.15902简称Tepidiphilussp.W-Y5。本专利技术还保护一种菌剂，该菌剂含有所述Tepidiphilussp.W-Y5。所述菌剂的用途为A1)或A2)或A3)或A4)：A1)微生物采油；A2)乳化原油；A3)降解石油；A4)石油污染治理和/或修复。所述菌剂的制备方法可包括如下步骤：将Tepidiphilussp.W-Y5接种至细菌培养基并进行培养，获得Tepidiphilussp.W-Y5浓度为107-109CFU/mL(如107-108CFU/mL、108-109CFU/mL、107CFU/mL、108CFU/mL或109CFU/mL)的菌液，即为所述菌剂。所述细菌培养基可为LB液体培养基。所述菌剂的制备方法中，所述培养的条件可为：45～55℃(如45～50℃、50～55℃、45℃、50℃或55℃)、100-200r/min(如100-150r/min、150-200r/min、100r/min、150r/min或200r/min)培养20～30h(如20～24h、24～30h、20h、24h或30h)。除了活性成分，所述菌剂还可以包括载体。所述载体可为固体载体或液体载体。所述固体载体可为矿物材料、植物材料或高分子化合物。所述矿物材料可为粘土、滑石、高岭土、蒙脱石、白碳、沸石、硅石和硅藻土中的至少一种。所述植物材料可为玉米粉、豆粉和淀粉中的至少一种。所述高分子化合物可为聚乙烯醇。所述液体载体可为有机溶剂、植物油、矿物油或水。所述有机溶剂可为癸烷和/或十二烷。所述菌剂中，所述活性成分可以以被培养的活细胞、活细胞的发酵液、细胞培养物的滤液或细胞与滤液的混合物的形式存在。所述组合物的剂型可为多种剂型，如液剂、乳剂、悬浮剂、粉剂、颗粒剂、可湿性粉剂或水分散粒剂。根据需要，所述菌剂中还可添加表面活性剂(如吐温20、吐温80等)、粘合剂、稳定剂(如抗氧化剂)、pH调节剂等。本专利技术还保护所述Tepidiphilussp.W-Y5或上述任一所述的菌剂的应用，可为a1)或a2)：a1)微生物采油；a2)制备微生物采油的产品。本专利技术还保护所述Tepidiphilussp.W-Y5或上述任一所述的菌剂的应用，可为b1)或b2)：b1)乳化原油；b2)制备乳化原油的产品。本专利技术还保护所述Tepidiphilussp.W-Y5或上述任一所述的菌剂的应用，可为c1)或c2)：c1)降解石油；c2)制备降解石油的产品。本专利技术还保护所述Tepidiphilussp.W-Y5或上述任一所述的菌剂的应用，可为d1)或d2)：d1)石油污染治理和/或修复；d2)制备石油污染治理和/或修复的产品。本专利技术还保护一种产品，其含有所述Tepidiphilussp.W-Y5或上述任一所述的菌剂；所述产品可具有如下A1)-A4)中至少一种功能：A1)微生物采油；A2)乳化原油；A3)降解石油；A4)石油污染治理和/或修复。本专利技术还保护一种微生物采油的方法，可包括如下步骤：在采油过程中，加入所述Tepidiphilussp.W-Y5或上述任一所述的菌剂。本专利技术还保护一种乳化原油和/或降解石油的方法，可包括如下步骤：向原油或含有原油的液相体系中加入所述Tepidiphilussp.W-Y5或上述任一所述的菌剂。本专利技术还保护一种石油污染治理和/或修复的方法，可包括如下步骤：采用所述Tepidiphilussp.W-Y5或上述任一所述的菌剂处理石油污染物。实验证明，本专利技术提供的Tepidiphilussp.W-Y5CGMCCNo.15902不仅具有降解石油的功能，可用于石油污染的治理和修复，而且还可以用于微生物采油，提高采油率。本专利技术具有重要的应用价值。附图说明图1为W-Y5菌株乳化原油的效果。图2为物模驱油结果曲线。保藏说明拉丁名：Tepidiphilussp.菌株编号：W-Y5保藏机构：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏机构简称：CGMCC地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号保藏日期：2018年06月05日保藏中心登记入册编号：CGMCCNo.15902具体实施方式以下的实施例便于更好地理解本专利技术，但并不限定本专利技术。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为自常规生化试剂商店购买得到的。以下实施例中的定量试验，均设置三次重复实验，结果取平均值。液体无机盐培养基：将5gNaCl、1gNH4H2PO4、1g(NH4)2SO4、1gK2HPO4和3gKNO3溶于去离子水，然后用去离子水定容至1L，调节pH值至7-8；121℃灭菌30min。LB液体培养基：将10gNaCl、10g蛋白胨和5g酵母粉溶于去离子水，然后用去离子水定容至1L，调节pH值至7-8；121℃灭菌30min。LB固体培养基：将10gNaCl、10g蛋白胨、5g酵母粉和15g琼脂粉溶于去离子水，然后用去离子水定容至1L，调节pH值至7-8；121℃灭菌30min。LB固体平板：将约55℃的LB固体培养基倒入无菌培养皿，冷却后得到LB固体平板。实施例1、W-Y5菌株的分离、鉴定与保藏一、W-Y5菌株的分离取1g原油(2017年8月采自新疆油田油井)，加入100mL液体无机盐培养基，50℃、150rpm振荡培养30d后，稀释涂布在LB固体平板上，50℃培养7d，挑取单菌落划线纯化后保存，将分离纯化获得的分离物命名为W-Y5菌株。二、W-Y5菌株的鉴定1、形态学鉴定将W-Y5菌株接种至LB固体平板上，50℃暗培养，5d后观察菌落的形态并通过高分辨率透射电镜分析观察菌体的形态特征。实验结果表明，W-Y5菌株的菌落直径为1-2mm；W-Y5菌株短杆状、不产生芽孢。2、生理生化特征分析参考《常见细菌系统鉴定手册》(东秀珠，蔡妙英.常见细菌系统鉴定手册.北京:科学出版社，2011.)和《微生物学实验》(沈萍,范秀容,李广武.微生物学实验(第三版).北京:高等教育出版社，1999.)测定W-Y5菌株的生理生化特征。结果表明，W-Y5菌株的生理生化特征如下：革兰氏染色阴性，氧化酶反应阳性，过氧化氢酶反应阳性。3、16srDNA序列同源性分析(1)将W-Y5菌株接种于LB本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.Tepidiphilus sp.W‑Y5，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCC No.15902。

【技术特征摘要】
1.Tepidiphilussp.W-Y5，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCCNo.15902。2.一种菌剂，其特征在于：所述菌剂含有权利要求1所述Tepidiphilussp.W-Y5。3.权利要求1所述Tepidiphilussp.W-Y5或权利要求2所述的菌剂的应用，为a1)或a2)：a1)微生物采油；a2)制备微生物采油的产品。4.权利要求1所述Tepidiphilussp.W-Y5或权利要求2所述的菌剂的应用，为b1)或b2)：b1)乳化原油；b2)制备乳化原油的产品。5.权利要求1所述Tepidiphilussp.W-Y5或权利要求2所述的菌剂的应用，为c1)或c2)：c1)降解石油；c2)制备降解石油的产品。6.权利要求1所述Tepidiphilussp.W-Y5或权利要求2所述的菌剂的应用，...

【专利技术属性】
技术研发人员：池昌桥，吴晓笃，
申请(专利权)人：北京润世能源技术有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11