一种检测新型鹅星状病毒抗体的间接ELISA检测试剂盒及应用制造技术

技术编号:19687737 阅读:80 留言:0更新日期:2018-12-08 10:12
本发明专利技术公开了一种检测新型鹅星状病毒抗体的间接ELISA检测试剂盒,所述试剂盒包含包被有新型鹅星状病毒ORF1b蛋白重组抗原的酶标板;所述新型鹅星状病毒ORF1b蛋白重组抗原的制备方法如下:以保藏编号为CCTCC NO:V201808的鹅星状病毒的全基因序列为模板,利用引物对扩增得到ORF1b基因片段,构建重组表达载体,通过原核表达系统表达鹅星状病毒ORF1b蛋白重组抗原。本发明专利技术的间接ELISA检测试剂盒可以对新爆发的以痛风为主要症状的新型鹅星状病毒抗体进行快速、有效的检测,以监测鹅群中新型鹅星状病毒的流行情况。

【技术实现步骤摘要】
一种检测新型鹅星状病毒抗体的间接ELISA检测试剂盒及应用
本专利技术涉及生物制品
,具体涉及一种检测新型鹅星状病毒抗体的间接ELISA检测试剂盒及应用。
技术介绍
星状病毒(AStV)是一类无囊膜、呈球形、直径为28-30nm的单股正链RNA病毒,基因组具有感染性,长6.4-7.9kb,该病毒的感染具有一定的流行性,可引起人或动物的肠炎、腹泻,有的伴有呕吐和腹痛。星状病毒科根据感染宿主的不同可分为哺乳动物星状病毒属和禽星状病毒属,禽星状病毒可以引起禽类发生多种疾病,其临床表现因病毒毒株、毒力或感染宿主的不同而有差异。鹅星状病毒(Gooseastrovirus,GAstV),主要侵害幼龄雏鹅,该病已经在多个省份流行发生,使鹅的死亡率上升,极大危害我国养鹅业的健康发展。2017年2~12月,我国山东、安徽、江苏、辽宁、河南及广东等地雏鹅群爆发了一种以痛风为主要特征的传染性疾病。该病主要发生于5~20日龄的雏鹅,死亡率最高可达50%。患病雏鹅体腔及关节发生严重尿酸盐沉积,卧地倦动,采食困难,造成雏鹅生长缓慢,料肉比升高,肉鹅出栏合格率显著降低,对肉鹅养殖业造成严重经济损失。研究证实本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测新型鹅星状病毒抗体的间接ELISA检测试剂盒,其特征在于,所述间接ELISA检测试剂盒包含包被有新型鹅星状病毒ORF1b蛋白重组抗原的酶标板。

【技术特征摘要】
1.一种检测新型鹅星状病毒抗体的间接ELISA检测试剂盒,其特征在于,所述间接ELISA检测试剂盒包含包被有新型鹅星状病毒ORF1b蛋白重组抗原的酶标板。2.根据权利要求1所述的间接ELISA检测试剂盒,其特征在于,所述新型鹅星状病毒ORF1b蛋白重组抗原的制备方法如下:以保藏编号为CCTCCNO:V201808的鹅星状病毒的全基因序列为模板,利用引物对扩增得到ORF1b基因片段,构建重组表达载体,通过原核表达系统表达新型鹅星状病毒ORF1b蛋白重组抗原;所述引物对的序列分别如SEQIDNO.1和SEQIDNO.2所示。3.根据权利要求2所述的间接ELISA检测试剂盒,其特征在于,将所述重组表达载体转化至BL21(DE3)感受态细胞中,加入IPTG进行诱导表达;将表达产物经过变性和复性后,获得纯化的新型鹅星状病毒ORF1b蛋白重组抗原。4.根据权利要求1所述的间接ELISA检测试剂盒,其特征在于,所述新型鹅星状病毒ORF1b蛋白重组抗原的包被量为500ng/孔。5.根据权利要求1-4任一项所述的间接ELISA检测试剂盒,其特征在于,所述间接ELISA检测试剂盒还包含:酶标抗体、样品稀释液、洗涤液、阴性对照血清、阳性对照血清、底物显色液A、B和终止液。6.根据权利要求5所述的间接ELISA检测试剂盒,其特征在于,所述酶标抗体为酶标兔抗鹅抗体。7.权利要求1-6任一项所述的间接ELISA检测试剂盒在新型鹅星状病毒的流行病学调查中的应用;所述新型鹅星状病毒的保藏编号为CCTCCNO:V201808。8.一种新型鹅星状病毒抗体的间接ELISA检测方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)包被:以保藏编号为...

【专利技术属性】
技术研发人员:刁有祥唐熠刘赫
申请(专利权)人:山东农业大学
类型:发明
国别省市:山东,37

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