一种快速筛选电荷反转型阳离子基因载体的SPR方法技术

本发明专利技术公开了一种快速筛选电荷反转型阳离子基因载体的SPR方法，主要创新在于利用SPR技术可以在线、实时的监测物质结构变化的技术特点来在线评价电荷反转型阳离子基因载体对DNA的负载及释放能力，建立了一种体外快速筛选基因载体的方法。用过氧化氢或酶等模拟体内的活性氧簇，在线研究载体在不同浓度的活性氧物质作用下对DNA的释放效果。旨在帮助评价基因载体的性能，缩短基因载体性能评价时间，建立快速筛选性能优良的基因载体的方法，加速基因药物的研发。该方法无需标记样品，实验步骤简单，检测快，现象直观，是一种体外快速评价、筛选性能优良的基因载体的理想研究方法。

【技术实现步骤摘要】
一种快速筛选电荷反转型阳离子基因载体的SPR方法
本专利技术涉及基因载体性能的评估方法
，尤其涉及一种快速筛选电荷反转型阳离子基因载体的SPR方法。
技术介绍
基因治疗是目前治疗遗传性疾病的有效方法,但是DNA体积大和负电荷的性质影响了细胞膜的摄取，并且静脉注射的游离DNA会被血液中的血清核酸酶快速降解,以上缺点都限制了基因治疗在临床的应用。针对基因治疗存在的问题，人们正在积极的寻找有效的基因载体来进行药物传递。非病毒基因载体由于具有良好的生物相容性、安全和可以大批量生产等优点受到人们的关注。在众多基因载体中阳离子载体由于其具有低毒性和转染效率高的特点相比于其他非病毒基因载体来说被更广泛的用于基因治疗的研究。但是阳离子载体/DNA复合物纳米颗粒是热力学稳定的，通常难于解离，这极大的阻碍了在细胞中对DNA的释放，影响转染效率。于是有研究学者设计出了能够在活性氧簇作用下发生从正电荷向负电荷转变的阳离子载体，该种载体在肿瘤细胞等活性氧簇相对较高的病变细胞中发生快速的电荷反转，释放DNA，从而解决阳离子载体转染效率低的问题。然而，电荷反转型阳离子载体热稳定性以及对DNA的负载及释放研究本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种快速筛选电荷反转型阳离子基因载体的SPR方法，其特征在于，包括以下步骤：A、在修饰了一定浓度电荷反转型阳离子基因载体的金膜表面流动注射不同浓度的DNA，利用实验室自行搭建的差分型表面等离子体基元共振仪，在线实时监测载体对DNA的捕捉情况，根据不同浓度DNA作用下SPR信号的变化，评价载体对DNA的负载能力；B、将阳离子载体与DNA在一定的N/P比条件下合成载体/DNA复合物纳米粒子；C、在修饰了一定浓度载体/DNA复合物纳米粒子的金膜表面流动注射不同浓度的过氧化氢，根据不同浓度过氧化氢作用下SPR信号的变化，评价纳米粒子对DNA的释放情况。

【技术特征摘要】
1.一种快速筛选电荷反转型阳离子基因载体的SPR方法，其特征在于，包括以下步骤：A、在修饰了一定浓度电荷反转型阳离子基因载体的金膜表面流动注射不同浓度的DNA，利用实验室自行搭建的差分型表面等离子体基元共振仪，在线实时监测载体对DNA的捕捉情况，根据不同浓度DNA作用下SPR信号的变化，评价载体对DNA的负载能力；B、将阳离子载体与DNA在一定的N/P比条件下合成载体/DNA复合物纳米粒子；C、在修饰了一定浓度载体/DNA复合物纳米粒子的金膜表面流动注射不同浓度的过氧化氢，根据不同浓度过氧化氢作用下SPR信号的变化，评价纳米粒子对DNA的释放情况。2.如权利要求1所述的快速筛选电荷反转型阳离子基因载体的SPR方法，其特征在于，所述的过氧化氢可以替换为任何活性氧物质。3.如权利要求2所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：姚鑫，赵瑞欢，
申请(专利权)人：中国科学院大学，
类型：发明
国别省市：北京,11