The invention discloses a method for observing the same cell by ordinary optical microscopy, fluorescence microscopy and scanning electron microscopy. The method is characterized in that the sample is embedded by paraffin, the embedded sample is sliced by tissue, and the slice progress is determined by preliminary observation. After dyeing with light composite dyes, two kinds of observation results were obtained by microscopy under white light and fluorescence excitation of different bands. Then the remaining embedded samples were observed by scanning electron microscopy after treatment, and the scanning results of the sample section were obtained. The present invention not only obtains the basic morphology, size and basic structure of a cell by ordinary optical microscope, but also obtains some special structure of the cell by fluorescence microscope, and obtains three-dimensional image of the cell interior by scanning electron microscope. This will be very helpful for the study of cell morphology and development, as well as the internal structure of cells, especially the morphology and function of the nucleus.
【技术实现步骤摘要】
普通光学、荧光和扫描电子显微镜对同一细胞形态的观察方法
本专利技术属于生物实验
,具体涉及对同一细胞的普通光学显微镜,荧光显微镜和扫描电子显微镜这三种形态观察的方法。
技术介绍
细胞是生物体的基本结构与功能单位,对于细胞的研究是生命科学的传统也是热点。然而对于同一个细胞,通常的手段是利用光学显微镜观察;近代以来开始利用透射电子显微镜和扫描电子显微镜进行观察,透射电子显微镜可以观察到细胞内部结构,扫描电子显微镜可以观察到细胞表面的形态;现在先进的技术是利用冷冻断裂或者激光共聚焦显微镜观察细胞内部结构。然而所有这些显微镜都只能对同一个细胞利用一种方法来进行观察,不能达到对于同一个细胞利用两种或两种以上的方法来观察和分析。石蜡切片是通过将生物组织切成薄片,然后利用组织染色,在光学显微镜观察获得组织切面轮廓以及组织中各种细胞的大小与形态,所得的图像具有粗线条、大轮廓的特点,但是由于石蜡切片的图像为平面图像且光学显微镜放大的倍数有限(最大放大倍数1600倍),很难对细胞的三维立体形态和亚细胞结构做观察。荧光染色,是在常规组织切片染色的基础上利用荧光染料对细胞进行标记,然后通过荧光显微镜进行观察,可以获得组织中某些特定的细胞,或者细胞中某些特定的细胞器。扫描电子显微镜技术通常是获得细胞的外部形态,其结果具有很强的立体感,能获得三维结构图像,且分辨率极高,对植物组织和亚细胞结构的准确分辨十分有利。然而扫描电子显微镜只能观察到组织细胞表面的形态。现有的技术方案是寻找三个尽可能一致处理的细胞样品,分别用组织染色显微观察、荧光染色显微观察与扫描电子显微镜三种方法分别观察 ...
【技术保护点】
1.利用普通光学显微镜、荧光显微镜和扫描电子显微镜对同一细胞进行观察的方法,其特征在于,对样品石蜡包埋后进行组织切片,切片进度根据在普通显微镜下初步观察组织切片的结果来确定,石蜡切片所得切片,通过组织与荧光复合染料染色,然后在白光和不同波段的荧光激发下利用普通光学显微镜和荧光显微镜进行观察,最后将剩余已经包埋好的样品蜡块经过脱蜡处理后再进行电镜扫描,获得样品切面的扫描电子显微镜结果。
【技术特征摘要】
1.利用普通光学显微镜、荧光显微镜和扫描电子显微镜对同一细胞进行观察的方法,其特征在于,对样品石蜡包埋后进行组织切片,切片进度根据在普通显微镜下初步观察组织切片的结果来确定,石蜡切片所得切片,通过组织与荧光复合染料染色,然后在白光和不同波段的荧光激发下利用普通光学显微镜和荧光显微镜进行观察,最后将剩余已经包埋好的样品蜡块经过脱蜡处理后再进行电镜扫描,获得样品切面的扫描电子显微镜结果。2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,在普通光学显微镜下,细胞壁不显色,细胞膜显示绿色,细胞质显示蓝色,细胞核显示紫红色,核仁显示深紫色,导管细胞紫红色,在不同荧光的波段激发下,细胞中不同结构显示不同颜色,所述的荧光波段为B激发光波滤色组件:激发BP460-490,截止BA520,分色DM500,细胞壁为绿色,细胞膜不显色,细胞质不显色,细胞核为红...
【专利技术属性】
技术研发人员:张鑫,赵忠,李登武,裴国亮,张国云,匡顺,贾智硕,罗美青,
申请(专利权)人:西北农林科技大学,
类型:发明
国别省市:陕西,61
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