本发明专利技术公开了吴茱萸碱和吴茱萸次碱在制备增强NLRP3炎症小体活化药物中的应用。吴茱萸碱和吴茱萸次碱可通过增强巨噬细胞炎症小体活化，产生有活性的Caspase‑1，释放成熟的IL‑1β等炎症介质，促进已致敏巨噬细胞焦亡。吴茱萸碱和吴茱萸次碱的上述活性，可用于增强人体炎症反应强度，治疗炎症小体活化不足的相关疾病，包括结核分枝杆菌胞内感染引起的肺结核和口腔结核、单增李斯特菌病及其他胞内感染细菌引起的相关疾病、致病性真菌感染引起的相关疾病、疮疖、牙根尖周病、慢性胃炎、慢性肠炎、痢疾、腹泻等。
Application of Evodiamine in the Preparation of Drugs Enhancing the Activation of NLRP3 Inflammatory Body
The invention discloses the application of evodiamine and rutaecarpine in the preparation of drugs for enhancing NLRP3 inflammatory body activation. Evodiamine and rutaecarpine can enhance the activation of inflammatory bodies in macrophages, produce active Caspase_1, release mature inflammatory mediators such as IL_1 beta, and promote the death of sensitized macrophages. The above-mentioned activities of evodiamine and rutaecarpine can be used to enhance the intensity of human inflammatory response and to treat diseases related to inactivation of inflammatory corpuscles, including tuberculosis and oral tuberculosis caused by intracellular infection of Mycobacterium tuberculosis, Listeria monocytogenes and other diseases related to intracellular infection, pathogenic fungi. Infection causes related diseases, sores, periapical diseases, chronic gastritis, chronic enteritis, dysentery, diarrhea and so on.
【技术实现步骤摘要】
吴茱萸碱在制备增强NLRP3炎症小体活化的药物中的应用
本专利技术属于生物医学和药物领域，具体涉及吴茱萸碱和/或吴茱萸次碱作为NLRP3炎症小体活化的增强剂及其在制备治疗NLRP3炎症小体活化不足相关疾病的药物中的应用。
技术介绍
吴茱萸碱(evodiamine)及其衍生物吴茱萸次碱(rutaecarpin)等是从芸香科中药原植物吴茱萸、石虎和疏毛吴茱萸的果实中提取的有效成分。吴茱萸碱的分子量303.36，分子式C19H17N3O；吴茱萸次碱的分子量287.32，分子式C18H13N3O，两者的化学结构如下式所示。吴茱萸碱为黄色粉末，不溶于水，易溶于氯仿、丙酮等有机溶剂。吴茱萸碱有健胃、镇痛、止干呕和止嗳酸等功效，既往研究发现，吴茱萸碱具有阻滞细胞周期、抑制肿瘤细胞迁移和增殖等抗肿瘤活性和减肥等其他活性；另外吴茱萸碱可以保护由酵母多糖引起的小肠损伤，以及在治疗阿尔茨海默病中有一定疗效，这两方面的用途，分别可见公开专利文件(专利号：CN104473931A、CN101829117A)。NLRP3(NOD-likereceptorfamily,PyrincontainingDomain3)炎症小体是机体固有免疫第一道防线的重要组成部分。不仅病原体(包括细菌、真菌和病毒)感染能够激活NLRP3炎症小体，损伤相关分子模式如胞外ATP(由细菌或受感染的宿主细胞释放)、尼日利亚菌素(nigericin，来自吸水链霉菌Streptomyceshygroscopicus)、尿酸钠晶体(MSU，痛风致病因子)等危险信号也能激活NLRP3炎症小体。体内外大量的研究证明，NLRP3炎症小体活化能够强化感染部位的固有免疫应答。致敏的巨噬细胞内NLRP3炎症小体被活化后，产生有活性的Caspase-1，进一步剪切加工pro-IL-1β(白介素/interleukin-1β前体蛋白)，产生并释放成熟IL-1β等炎症介质；后者可趋化中性粒细胞参与吞噬病原微生物，并促进T、B细胞分化和抗体分泌。其次，NLRP3炎症小体活化后导致的细胞焦亡有利于胞内致病菌的释放，并被其他吞噬细胞所吞噬、杀伤而清除。因此，NLRP3炎症小体的活化有利于清除入侵的病原微生物，加速炎症的缓解和组织修复，例如抑制葡聚糖硫酸钠(肠粘膜损伤模型的常用诱导剂)诱导的小鼠急性肠炎；小檗碱抗痢疾作用，可能与其上调NLRP3炎症小体活化有关。如果NLRP3炎症小体活化不足，则不能有效清除病原微生物以及被炎症活化的巨噬细胞，势必造成慢性炎症性疾病，甚至细菌性或真菌性败血症的发生。NLRP3炎症小体活化不足常见于胞内寄生菌(如单增李斯特菌、结核分枝杆菌)、真菌(如白色念珠菌)等病原体感染，使得致病菌在体内或细胞内持续存在和繁殖。中国专利申请CN106176741A公开了小檗碱在制备增强炎症小体活化药物中的应用。但是，小檗碱与本专利技术的吴茱萸碱(和吴茱萸次碱)是不同的药物，其药源植物也不同，一个是黄连，一个是吴茱萸。目前，尚未有关于吴茱萸碱增强NLRP3炎症小体活化的功能的报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供吴茱萸碱和/或吴茱萸次碱在制备增强NLRP3炎症小体活化的药物中的应用。在NLRP3炎症小体活化不足的局部免疫功能低下相关疾病状态下，吴茱萸碱和/或吴茱萸次碱可增强机体巨噬细胞NLRP3炎症小体的活化，从而提高机体的固有免疫机能，增强机体的抵抗和清除感染的能力。本专利技术的目的通过下述技术方案实现：吴茱萸碱和/或吴茱萸次碱在制备增强NLRP3炎症小体活化的药物中的应用；所述增强NLRP3炎症小体活化的表现包括如下方面：增强NLRP3炎症小体诱导剂诱导的巨噬细胞中Caspase-1的活化，增强ASC斑块的形成，促进炎症因子的成熟和释放，促进GasderminD蛋白的切割产生具有膜成孔能力的N端片段，并诱导细胞焦亡，从而增强抵抗病原微生物感染的能力；所述的NLRP3炎症小体诱导剂是以下组合中的一种：A、脂多糖(LPS)与三磷酸腺苷(ATP)；B、LPS与尼日利亚菌素(nigericin)；C、LPS与尿酸钠晶体(MSU)；D、LPS与二氧化硅纳米颗粒；E、LPS与β-葡聚糖(β-glucan)。所述的炎症因子包括IL-1β；所述的细胞焦亡是一种程序性的炎症性细胞死亡方式，表现为细胞鼓胀而破裂，细胞内多种炎症介质被释放，因而有利于清除胞内感染菌，增强炎症反应；所述的增强抵抗病原微生物感染的能力是通过增强组织局部炎症反应强度而实现的，包括IL-1β分泌水平提高，从而抵抗腹腔细菌感染而导致的死亡；所述的病原微生物包括大肠杆菌，但不限于大肠杆菌，还包括其它革兰氏阴性菌，革兰氏阳性菌(如金黄色葡萄球菌、粪肠球菌[Enterococcusfaecalis]、单增李斯特菌、结核杆菌、肺炎链球菌等)，以及真菌等。NLRP3活化不足的局部免疫功能低下相关疾病，包括(但不限于)结核分枝杆菌胞内感染引起的肺结核和口腔结核、单增李斯特菌病及其他胞内感染细菌引起的相关疾病(呕吐、出血性皮疹、化脓性结膜炎、发热、脑膜炎、败血症等)、致病性真菌感染引起的相关疾病(肺炎、肝炎、脑膜炎、口腔粘膜病、阴道炎、宫颈炎、肾炎、心包炎、支气管炎、脚气等)、疮疖、牙根尖周病、慢性胃炎、慢性肠炎、痢疾、腹泻。所述的增强NLRP3炎症小体活化的药物包含可接受的辅料；所述的辅料优选为缓释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、吸附载体、表面活性剂或润滑剂；所述的增强NLRP3炎症小体活化的药物可为片剂、颗粒剂、胶囊、滴丸、膏剂、缓释剂、口服液、注射剂。本专利技术相对于现有技术具有如下的优点及效果：吴茱萸碱和吴茱萸次碱可显著促进LPS+ATP或LPS+尼日利亚菌素诱导的炎症因子IL-1β的释放及ASC斑块的形成，同时促进细胞焦亡，并可有效降低腹腔细菌感染引起的死亡。吴茱萸碱的上述新活性与用途，尚未见公开文献报道。吴茱萸碱通过增强NLRP3炎症小体活化，提高IL-1β分泌，从而增强固有免疫细胞的功能，对临床治疗因NLRP3等炎症小体活化不足的局部免疫功能低下相关疾病具有重要意义，可用于相关药物开发。附图说明图1是吴茱萸碱对LPS+ATP诱导的小鼠骨髓来源巨噬细胞炎症小体激活的促进作用的免疫印迹分析图。图2是吴茱萸碱对LPS+ATP诱导的小鼠骨髓来源巨噬细胞免疫荧光显微术分析ASC斑块形成的促进作用试验结果图；其中，A为ASC斑块的免疫荧光显微分析图，B为含有ASC斑块的细胞百分比分析直方图。图3是吴茱萸碱对LPS+nigericin诱导的小鼠骨髓来源巨噬细胞免疫荧光显微术分析ASC斑块形成的促进作用试验结果图；其中，A为ASC斑块的免疫荧光显微分析图，B为含有ASC斑块的细胞百分比分析直方图。图4是吴茱萸碱对LPS+ATP诱导的小鼠骨髓来源巨噬细胞细胞焦亡的促进作用的碘化丙锭(PI)染色荧光图和GasderminD切割免疫印迹分析图；其中，A为PI染色荧光显微图，B为焦亡细胞占总细胞的百分比分析图，C为GasderminD被Caspase-1切割产生N端片段(32kDa)的免疫印迹分析图。图5是吴茱萸碱对LPS+nigericin诱导的小鼠骨髓来源巨噬细胞细胞焦亡的促进作用的碘化丙锭(PI)染色荧光图和Gasd本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.吴茱萸碱和/或吴茱萸次碱在制备增强NLRP3炎症小体活化的药物和在制备治疗NLRP3炎症小体活化不足相关疾病的药物中的应用。
【技术特征摘要】
1.吴茱萸碱和/或吴茱萸次碱在制备增强NLRP3炎症小体活化的药物和在制备治疗NLRP3炎症小体活化不足相关疾病的药物中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述增强NLRP3炎症小体活化的表现包括如下方面：增强NLRP3炎症小体诱导剂诱导的巨噬细胞中Caspase-1的活化，增强ASC斑块的形成，促进炎症因子的成熟和释放，促进GasderminD蛋白的切割产生具有膜成孔能力的N端片段，并诱导细胞焦亡，从而增强抵抗病原微生物感染的能力。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述的NLRP3炎症小体活化不足相关疾病包括：结核分枝杆菌胞内感染引起的肺结核和口腔结核、单增李斯特菌病引起的疾病、致病性真菌感染引起的疾病、疮疖、牙根尖周病、慢性胃炎、慢性肠炎、痢疾、腹泻。4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述的NLRP3炎症小体诱导剂是以...
【专利技术属性】
技术研发人员：欧阳东云，何贤辉，查庆兵，李陈广，徐丽慧，曾琼祯，
申请(专利权)人：暨南大学，
类型：发明
国别省市：广东,44
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